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储卫华

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期刊论文

筛选用转座子Tn916诱变的具有免疫原性的嗜水气单胞菌蛋白酶缺失株

储卫华陆承平

水产学报2001年6月第25卷第3期/JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Juen., 2001, Vol. 25, No. 3,-0001,():

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摘要/描述

以携带质粒pAM120(Apr、Tcr/Tn916)的大肠杆菌CG120株为供体菌,与受体菌嗜水气单胞菌J-1株,采用滤膜接合法进行接合转移,在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选,筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase-),ECPase-菌株其生长速度,对正常鲫血清的抗性降低,用脱脂奶平板法及底物法检测,蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比,突变株致病力降低,对鲫的半数致死量大于108(J-1株对鲫的半数致死量为5×103)。用ECPase-突变株MJ-1株的18h培养物(5×106CFU)接种健康鲫,不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-I活菌免疫鲫,在第5周产生较高的凝集抗体,且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子,ECPase-突变株仍具有免疫原性。

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