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崔中利
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期刊论文
甲基对硫磷水解酶的重组表达及其纯化和性质研究
微生物学报，2004，44（3）：356～360，-0001，（）：
用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶编码基因，构建了重组表达质粒pET29a-mpd，将其转化至EscherichiacoliBL21（DE3）中，经IPTG诱导表达，得到C2末端含有6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶，用Ni2NTA亲和层析纯化得到具有活性的甲基对硫磷水解酶。测定了环境因素对酶活性的影响及酶动力学参数。甲基对硫磷水解酶水解甲基对硫磷时，最适pH8.6～8.8，最佳反应温度15℃；Mn2+、Zn2+、Cu2+可使酶活性增加15%～20%，Ca2+、Mg2+微弱地促进酶的作用，Ni2+对酶活性几乎无影响；1mmolPLEDTA•Na2+几乎不影响酶的活性，而10mmolPLEDTA•Na2+对甲基对硫磷水解酶有较强的抑制作用。甲基对硫磷水解酶水解乙基对硫磷时，最适pH816。25℃时，该酶对甲基对硫磷的米氏常数Km为（68.6±511）μmolPL，kcat为（45±6）S-1；对乙基对硫磷的米氏常数Km为（59.5±6.0）μmolPL，kcat为（8±1）S-1。kcatPKm表明甲基对硫磷水解酶对甲基对硫磷的催化效率更高。
【免责声明】以下全部内容由[崔中利]上传于[2011年03月18日 16时30分23秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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