您当前所在位置: 首页 > 学者

郭雄

  • 87浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 216下载

  • 0评论

  • 引用

期刊论文

携EGEP基因的逆转录病毒包装细胞的分选和滴度测定

郭雄张银刚周京军鱼兵刘兵

第一军医大学学报,2005,25(1)30~36,-0001,():

URL:

摘要/描述

目的 探讨利用荧光激活细胞分选技术获得有效重组逆转录病毒包装细胞系的方法。方法 用脂质体介导pLEGFP转染PA317细胞用荧光显微镜观察转染结果:依据EGFP荧光利用流式细胞仪的分选技术获得多克隆和单克隆源性的包装细胞。并利用PCR、RT-PCR对其鉴定;以NIH3T3为靶细胞。对其滴度进行测定。结果 荧光显微镜显示用脂质体介导的方法成功的转染PA317细胞在4次连续流式细胞仪分选后得到了稳定表达的多克隆和单克隆源性的包装细胞。PCR和RT-PCR分别从多克隆和单克隆源性的包装细胞细胞基因组DNA以及多克隆和部分(6/8)单克隆源性的包装细胞培养上清中的重组逆转录病毒RNA中扩增出了插入的EGFP片段。滴度测定显示得到的包装细胞能够产生有效的病毒滴度。结论 荧光激活细胞分选技术是获得有效病毒滴度的包装细胞的有效方法。

【免责声明】以下全部内容由[郭雄]上传于[2006年10月10日 23时23分37秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

我要评论

全部评论 0

本学者其他成果

    同领域成果