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焦新安

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期刊论文

应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

焦新安刘文博高崧张扬潘志明王芳张如宽刘秀梵

畜牧兽医学报,2003, 34 (2), 183-187 ,-0001,():

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摘要/描述

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针,应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆,最终进行定位。经三轮筛选后,用斑点印迹法检测,得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了24个阳性克隆,再以斑点印迹、竞净ELISA进一步鉴定阳性克隆,证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTTE,将其与沙门氏菌共毛蛋白氨基酸序列相比较,同源性较小,但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的I区高度保守序列为RAXXT,且这种序列排列的几率为1/205,因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外,以阳性克隆免疫Balb/c小鼠,并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定,结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性,这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。

【免责声明】以下全部内容由[焦新安]上传于[2005年04月29日 17时53分34秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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