目的 观察靶向小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的小干扰RNA对体外小鼠巨噬细胞系RAW264.7表达TNF-α的抑制作用。方法: 采用化学法合成针对TNF-αmRNA不同位点设计的3条siRNA序列和一条带有荧光标记的BLOCK-ITTM Fluorescent Oligo（修饰的荧光标记的dsRNA）通过脂质体包裹后将其分别转染至小鼠巨噬细胞系RAW264.7，同时设立一个无任何靶基因的siRNA做为阴性对照（siRNA4）。荧光显微镜下观察siRNA的转染效率；用实时荧光定量 PCR和ELISA法分别检测siRNA对TNF-α的mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果内毒素刺激后6 h ,巨噬细胞表达TNF-αmRNA 和合成分泌的TNF-α量均增加,于9 ～12 h 达 高峰。利用荧光标记的Oligo观察到siRNA转染效率达72%～80%。siRNA1-4转染巨噬细胞后，与未转染组（TNF-αmRNA 0.2935±0.1470，蛋白2104±32pg/ml）相比，siRNA2、3可见内毒素刺激的TNF-αmRNA（0.1576±0.0308、0.1140±0.0277）和TNF-α蛋白表达[(1355± 348)pg/ml、（817±138）pg/ml]均减少（均P< 0.05），其中siRNA3的抑制率非常显著，达61.2%(P< 0.01)。阴性对照siRNA4对细胞基因及蛋白表达无影响。结论内毒素可刺激小鼠巨噬细胞TNF-α的合成。化学合成siRNA转染小鼠巨噬细胞有较高的转染效率，能有效抑制 TNF-αmRNA及蛋白的表达。