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粟永萍

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期刊论文

Red/ET同源重组介导细菌人工染色体的快速修饰*

粟永萍王军平)**张友明)粟永萍)

生物化学与生物物理进展,2005,32(5):468~473,-0001,():

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摘要/描述

随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,已成为功能基因组学研究的一个重要环节。应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSClOI-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL-ne。为正/反向筛选系统,可以快速、高效地对BAC进行剪切、插入、替换等操作,其中能够进行抗性筛选的一步BAC修饰只需一周时间,以插入非抗性标记基因Cre为代表的两步BAC修饰在两周内即可完成。通过阿拉伯多糖诱导调控和简单地变化培养温度,能使pSClOI-BAD-gbaA依托质粒在发挥完Red/ET同源重组作用后自然消失,最终获得完整而纯净的修饰后BAC,为加快功能基因组学研究提供了一个可靠的实验平台

【免责声明】以下全部内容由[粟永萍]上传于[2009年11月09日 10时39分06秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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