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王任直

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期刊论文

二型谷氨酸羧肽酶稳定表达细胞株的建立

王任直TIAN Shi-qiang WANG Ren-zhi LI Gui-lin et al.

基础医学与临床,2004,24(3):331~334,-0001,():

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摘要/描述

为了深入研究二型谷氨酸羧肽酶(glutamatecarboxypeptidaseⅡ,GCPⅡ)功能和了解其在兴奋性氨基酸代谢过程中作用,拟构建GCPⅡ的表达载体,建立稳定表达细胞株;采用聚合酶链反应,酶切连接,和蓝白筛选的方法,构建表达载体;磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞,G418筛选阳性细胞克隆;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株。采用PCR方法扩增出GCPⅡ;构建含有GCPⅡ基因的表达载体—pcDNA3112NA;建立了细胞株HEK2932NA。成功构建了GCPⅡ的表达载体,建立了稳定表达细胞株,为深入研究该酶的功能和兴奋性氨基酸毒性作用奠定了基础。

【免责声明】以下全部内容由[王任直]上传于[2006年04月19日 17时22分16秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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