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王一飞
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期刊论文
重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达*
中国病理生理杂志，2004，20（6）：954～959，-0001，（）：
目的：为提高表达量，简化纯化工艺，获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白，构建带有6×His纯化标签的原核表达载体，优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法：将抑癌基因nm23-H/从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE40中；梯度变化表达条件获得产物高表达；镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白；Western blot鉴定产物的免疫原性；HPLC测定产物的激酶活性；鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果：pQE-40中亚克隆的nm23-H/序列无误；目的蛋白最高表达量可达49.6%；纯化的表达产物能与天然NDPK-A的多克隆抗体特异结合；酶比活为472U/rag；具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论：表达质粒-nm23HI能高效表达重组人NDPK-A，纯化工艺简便，产物活性与天然NDPK-A无异。
【免责声明】以下全部内容由[王一飞]上传于[2009年10月21日 11时11分47秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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