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翁心华

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期刊论文

KatG基因点突变与结核分枝杆菌异烟肼耐药相关性研究

翁心华莫凌张文宏王骥庞茂银

中华传染病杂志,2004,22(2):94~97,-0001,():

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摘要/描述

目的 探讨过氧化氢酶编码基因(KatG)基因点突变和结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药性之间的关系,筛选相关位点用于筛查临床INH耐药株基基型。方法 采用三步法聚合酶链反应(PCR)对临床耐异烟肼菌株中发现的6个位点进行定点诱变,用含诱变基因的pET24b质粒转化大肠埃希菌BL21菌株,在异丙基硫代-D半乳糖苷(IPTG)导下表达,使用镍亲和柱和Q-琼脂糖快速流动凝胶纯化各KatG诱变蛋白并测定其过氧化氢酶和过氧化物酶活性。结果 完成KatG基因6个位点的诱变及相应诱变蛋白的表达和纯化,过氧化氢酶、过氧化物酶活性测定发现,3个诱变蛋白[KatG(W321G)、KatG(R418Q)和KatG(A456S)]基本失活,其余3个诱变蛋白的活性亦有不同程度下降。结论 所引入的6个突变均可造成KatG蛋白过氧化氢-过氧化物酶活性下降,与结核分枝杆菌1NH耐药有关,可用于筛查临床INH耐药株基因型。

【免责声明】以下全部内容由[翁心华]上传于[2005年01月28日 21时56分45秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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