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张传溪
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期刊论文
中华蜜蜂蜂毒镇静肽基因的cDNA克隆和表达
中国生物化学与分子生物学报，2003，（3）：343～348，-0001，（）：
从中华蜜蜂（Apis cerana cerana）工蜂毒腺中快速抽提总RNA，用RT-PCR扩增得到大小约为250bp的cDNA片段，测序得到的片段长度为234bp，为蜂毒前镇静肽原（preprosecapin）基因编码区的cDNA。以3’RACE方法，扩增和测定了3′端非编码区219bp 序列。中蜂前镇静肽原cDNA 序列与已报道的欧洲意蜂该基因cDNA序列具有92%同源性，氨基酸序列具有87%同源性。代表成熟肽镇静肽的最后25个氨基酸序列，中蜂与意蜂同源性为88%。3’端非编码区cDNA序列与欧洲意蜂序列有7311%同源性。将中华蜜蜂蜂毒镇静肽成熟肽编码区与3’非编码区部分克隆，构建了镇静肽与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEXPAcSecapin。将载体转化大肠杆菌BL21 （DE3） 进行融合表达。表达产物与抗GST抗体在29kD处有很强的交叉反应。大肠杆菌超声破碎后的上清液用SDS-PAGE检测到表达的蛋白多为可溶性融合蛋白，通过亲和层析柱纯化和凝血酶的切割得到了镇静肽蛋白。
【免责声明】以下全部内容由[张传溪]上传于[2005年01月19日 19时16分34秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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