目的研究抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞（CTL）克隆识别靶细胞的肽特异性和人类白细胞抗原（HLA）限制性，以及其赖以识别抗原肽的T细胞受体（TCR）基因表达序列的分子特征。方法利用体外CTL刺激扩增体系，应用免疫球蛋白重链可变区（IgHV）框架区上的B淋巴瘤相关抗原九肽（IgHV1-QLVQSGAEV和IgHV3-SLYLQMNSL）负荷的抗原递呈细胞（APC），刺激正常HLA-A 0201供者的外周血单个核细胞（PBMC），每周1次共4次，用流式细胞仪检测体外培养细胞的免疫表型的变化，并用肽/主要组织相容性基因复合体（MHC）-四聚体方法检测肽特异性的CTL增殖情况。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测CTL与不同的靶细胞共同孵育时释放干扰素（IFN-）的能力。应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）和T细胞受体（TCR）基因指纹谱型图方法检测培养前后的淋巴细胞的克隆变化，并用直接测序的方法得到CTL克隆的TCR基因序列。结果B淋巴瘤相关抗原肽4次刺激体外培养的PBMC后CD8’CTL大量增殖，CD4/CD8明显下降（0.10 VS 1.43，P<0.05）。IgHV1-QLVQSGAEV/HLA-A 0201四聚体和CD8双阳性的肽特异性CTL数量（49.38%）比刺激前（0.04%）明显上升。ELISA检测IFN- 的分泌表明其识别靶细胞是肽特异性和HLA限制性的。TCR基因指纹谱型图显示抗原肽反复刺激获得的CTL的TCR表达集中于个别基因家族，呈克隆性增殖。结论应用IgHV基因框架区来源的B淋巴瘤相关抗原九肽可以使特异性CTL克隆增殖，这些克隆以肽特异性和HLA限制性的方式识别靶细胞。了解这些CTL的作用和TCR识别相关抗原肽的分子结构，将有助于确定体内T细胞和B细胞相互调节的机制。