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禾谷镰刀菌随机插入突变体文库的构建

Constuction of random insertion mutant library of Fusarium graminearum

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侯毅平,周明国

(南京农业大学植物保护学院)

摘要:以禾谷镰刀菌Y2021A为出发菌株,建立潮霉素磷酸转移酶基因(hph)随机插入突变体文库。制备禾谷镰刀菌Y2021A原生质体,将hph转化到菌株Y2021A中,共获得hph随机插入突变体10 163个,其中10 125个能在100 mg/L 潮霉素B的马铃薯蔗糖琼脂培养基(potato sucrose medium,PSA)平板上正常生长,被认定为hph随机插入阳性突变体;随机选取5个突变体进行Southern blotting杂交,结果表明hph基因在突变体中均为单拷贝插入,并且插入到不同的位置;在部分突变体中筛选到5个致病性显著下降的突变体,为研究禾谷镰刀菌致病相关基因提供了宝贵材料。该突变体文库为研究禾谷镰刀菌致病机理及其他生物学表型提供了宝贵的资源。

关键词:植物病理学;禾谷镰刀菌;突变体文库;致病性

该论文以禾谷镰刀菌Y2021A 为供试菌株,建立了潮霉素磷酸转移酶基因(hph)随机插入突变体文库,以便研究其功能及其功能基因组。作者建立了禾谷镰刀菌Y2021A 原生质体转化技术体系,获得饱和突变体,并随机选取5 个突变体进行Southern 杂交,验证5个突变体均为单拷贝插入,进一步筛选鉴定并明确了部分突变体的致病性明显下降,发现了禾谷镰刀菌致病相关基因,为实验研究奠定基础。该论文科学规范,推荐为年度优秀论文。

综合指数: 60

推荐指数:87
关注指数:76
动态指数:7

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