基于pHBH法的岩藻聚糖硫酸酯酶酶活测定方法的建立

张翠玉; 薛长湖; 于龙; 续晓琪; 王彦超; 常耀光

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基于pHBH法的岩藻聚糖硫酸酯酶酶活测定方法的建立

首发时间：2013-08-02

张翠玉 ¹
张翠玉，（1987-）,女,硕士研究生,食品化学与营养支持。
薛长湖 ² 于龙 ² 续晓琪 ² 王彦超 ² 常耀光 ²
常耀光（1985-），男，讲师，主要研究方向为水产化学

1、中国海洋大学食品科学与工程学院，山东青岛 266003
2、中国海洋大学食品科学与工程学院，青岛266003

摘要：本文首先采用对羟基苯甲酰肼(pHBH)对岩藻糖进行显色，建立了测定岩藻糖还原端含量的pHBH法，该方法操作简便、灵敏度高，检测限为0.26 μg/mL，定量限为0.85 μg/mL。在此基础上，以Flavobacteriaceae sp. CZ1127产生的岩藻聚糖硫酸酯酶为实验材料，对岩藻聚糖硫酸酯酶活测定方法中的几个关键影响因素进行了研究，建立了一套快速可靠的岩藻聚糖硫酸酯酶酶活测定方法：准确移取375 μL 0.055%岩藻聚糖硫酸酯溶液，加入375 μL 稀释一定倍数的酶液，混匀后于28℃酶解反应30 min，然后加入pHBH试剂250 μL，100℃反应5 min，迅速冷却后于415 nm处测定吸光值，计算相应酶活。采用此方法，酶活检测限可以达到0.048 mU。

关键词：食品科学 pHBH 岩藻糖岩藻聚糖硫酸酯酶糖苷酶

For information in English, please click here

The establishment of fucoidanase activity determination method on basis of pHBH method

ZHANG Cuiyu ¹
张翠玉，（1987-）,女,硕士研究生,食品化学与营养支持。
XUE Changhu ² YU Long ² XU Xiaoqi ² WANG Yanchao ² CHANG Yaoguang ²
常耀光（1985-），男，讲师，主要研究方向为水产化学

1、College of Food Science and Engineering,Ocean University of China, Qingdao 266003
2、College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,Qingdao,266003

Abstract：In this study, a new method using 4-Hydroxyben zhydrazide for the content determination of fucose reducing end was establided at frist. The detection limit of this method was 0.26 μg/mL and the quantification limit was 0.85 μg/mL. It possessed several advantages, including simple-operating, high precision and sensitivity. On base of this, we study some key factors for the fucoidanase activity detection. Then we built a fast and reliable fucoidanase activity detection method as follows: a mixture of 375 μL fucoidan solution with the concentration of 0.055% and 375 μL enzyme solution was frist reacted at 28℃ for 30minutes.After that 250 μL of pHBH was added in , the mixture was then reacted at 100 ℃ for 5 minutes. After cooling off, the absorbance was detemined at 415nm . Using this method, the fucoidanase activity detection limit was as low as 0.048 mU.

Keywords： Food science pHBH Fucose Fucoidanase Glucosidase

基金：

1. 高等学校博士学科点专项科研基金（20110132120015）

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张翠玉，薛长湖，于龙，等. 基于pHBH法的岩藻聚糖硫酸酯酶酶活测定方法的建立[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2013-08-02]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201308-10.

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论文编号	201308-10
论文题目	基于pHBH法的岩藻聚糖硫酸酯酶酶活测定方法的建立
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