噬菌体展示筛选与狂犬病毒P互作的宿主蛋白

董婉玉; 李有文; 傅振芳; 彭贵青

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噬菌体展示筛选与狂犬病毒P互作的宿主蛋白

首发时间：2017-05-25

董婉玉 ^{1
2}
董婉玉（1989-），女，预防兽医学博士研究生，主要从事RABV与宿主蛋白的互作研究
李有文 ^{1
2} 傅振芳 ^{1
2} 彭贵青 ^{1
2}
彭贵青（1979-），男，教授，博导，从事兽医传染病防控理论和技术研究

1、华中农业大学动物医学院，武汉 430070
2、华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉，430070

摘要：狂犬病是一种人或其他温血动物的病毒性脑脊髓炎，在家畜和野生动物之间可以自然感染与传播，感染后一旦出现临床症状，致死率几乎100%。其病原体是弹状病毒科狂犬病毒属的狂犬病毒（Rabies virus, RABV）。狂犬病毒有五种结构蛋白，其中磷酸化蛋白P是一种多功能的非催化活性蛋白，在病毒的转录和复制过程中发挥重要作用，而狂犬病毒的致病机制仍未完全阐明。本研究首先表达纯化了狂犬病毒P蛋白，以纯化的P蛋白为靶蛋白，通过T7噬菌体展示的方法筛选相互作用蛋白。通过5轮的淘选，筛选得到多个阳性克隆，其中核糖体大亚基蛋白L9（RPL9）与P蛋白特异性相互作用，并通过ELISA、GST pull-down得到验证，为进一步阐明狂犬病毒的复制和致病机理奠定基础。

关键词：狂犬病毒 P蛋白噬菌体展示技术相互作用

For information in English, please click here

Screening the Host Proteins Interaction with Rabies Virus P by Phage Display System

Dong wanyu ^{1
2}
董婉玉（1989-），女，预防兽医学博士研究生，主要从事RABV与宿主蛋白的互作研究
Li youwen ^{1
2} Fu zhenfang ^{1
2} Peng guiqing ^{1
2}
彭贵青（1979-），男，教授，博导，从事兽医传染病防控理论和技术研究

1、College of Veterinary Medicine, Huazhong Agriculture University, Wuhan 430070
2、State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Hubei Wuhan,430070

Abstract：Rabies is a kind of viral encephalomyelitis for people or other warm-blooded animals. once appear clinical symptoms, the fatality rate is almost 100%. The pathogen is Rabies virus, which belong to the Lyssavirus genus of the Rhabdoviridae family. Rabies virus is composed of five structural proteins. The phosphorylated protein (P), which is an uncatalytic activity protein, plays an important role in the virus replication, transcription and interferon antagonism. Moreover, the pathogenesis of rabies virus is still far from understanding. To identify a cellular protein(s) that interacts with RABV P protein, we performed a phage display-based protein interaction screen. Through five rounds of elutriation, we obtained several positive clones. And the results show that RPL9 is the target of P protein. Binding between RPL9 and P was also demonstrated by ELISA, GST pull-down. Our study laid the foundation to further clarify the mechanism of rabies virus replication and pathogenesis.

Keywords： Rabies virus P Phage display technology Interaction

基金：

1. 高校博士点基金（20130146120004）

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董婉玉，李有文，傅振芳，等. 噬菌体展示筛选与狂犬病毒P互作的宿主蛋白[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2017-05-25]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201705-1326.

No.4735276120315214****

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论文编号	201705-1326
论文题目	噬菌体展示筛选与狂犬病毒P互作的宿主蛋白
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