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论文编号 201705-937
论文题目 硫化氢合成酶在SVZ区神经干细胞中的表达鉴定及硫化氢对神经干细胞增殖的影响
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硫化氢合成酶在SVZ区神经干细胞中的表达鉴定及硫化氢对神经干细胞增殖的影响

首发时间:2017-05-16

袁雨晴 1   

袁雨晴(1992年2月),女,主要研究方向:帕金森病的病理机制

胡丽芳 1   

胡丽芳(1978年9月)女,副教授、硕导,帕金森病的病理机制

杜陈陈 1   
  • 1、苏州大学神经科学研究所,江苏省苏州市 邮编 215123

摘要:为探讨硫化物对SVZ区神经干细胞增殖的影响,本研究分离C57BL小鼠胚胎(E13-14)SVZ区神经干细胞进行体外培养,悬浮培养的神经球传代贴壁培养2次后用于实验,首先通过干细胞表面标记物nestin及Sox2免疫荧光共染鉴定神经干细胞,结果所获得的细胞为神经干细胞。其次,使用免疫荧光结合western blot及反转录PCR的方法鉴定胚胎神经干细胞内硫化氢内源性合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine β-synthase, CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase, CSE)的表达,Q-PCR测定CBS与CSE mRNA的相对含量;免疫荧光方法鉴定成年C57BL小鼠SVZ区及胎鼠E14脑组织切片中CBS、CSE及nestin的表达。实验结果表明在成年C57BL小鼠SVZ区及体外培养的神经干细胞内CBS均有较高含量的表达及胎鼠E14脑组织切片及体外培养的神经干细胞内CSE的表达。最后,硫化氢供体NaHS作用于成年小鼠后后,利用Brdu免疫荧光染色法检测到神经干细胞的大量增殖。

关键词: 神经生物学 硫化氢 神经干细胞 增殖 胱硫醚-β-合成酶 胱硫醚-γ-裂解酶

For information in English, please click here

The expression of hydrogen sulfide synthase in neural stem cells of SVZ and the effect of hydrogen sulfide on proliferation of neural stem cells

YUAN Yuqing 1   

袁雨晴(1992年2月),女,主要研究方向:帕金森病的病理机制

HU Lifang 1   

胡丽芳(1978年9月)女,副教授、硕导,帕金森病的病理机制

DU Chenchen 1   
  • 1、Institute of Neuroscience,Soochow University,Suzhou,Jiangsu Province,215123,China

Abstract:To study the possible effects of H2S on neural stem cells proliferation in mouse subventricular zone (SVZ). Neural stem cells (NSCs) were isolated from SVZ of E13-14 C57BL mouse. For neurosphere counting experiment, the embryonic NSCs of the 2nd to 4th passage were used in this study. The NSCs specific markers nestin and Sox2 were used for identification and labeling of NSCs in immunofluorescent study. And the result showed that about 99% of the isolated embryonic NSCs were positively stained with NSCs specific markers nestin and Sox2. Then immunofluorescent staining, western blot and RT-PCR were applied to identify the distribution and expression of H2S-producing enzymes including cystathionine beta synthase (CBS) and cystathionine gamma-lyase (CSE) in embryonic NSCs, adult SVZ area of C57BL mice and in the brain of embryonic E14, which revealed CBS expression and its co-localization with nestin in the adult SVZ of C57BL mice, as well as in vitro cultures of NSCs. CSE was detected in the brain of embryonic E14 and in vitro cultures of embryonic NSCs. At last, Brdu incorporation assay in combination with immunofluorescent study were applied to detect the proliferation of NSCs in adult mice following treatment with H2S donors NaHS, while the data showed that H2S donors promoted the proliferation of NSCs in mouse SVZ.

Keywords: neurobiology hydrogen sulfide neural stem cell proliferation, cystathionine beta synthase cystathionine gamma- lyase

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袁雨晴,胡丽芳,杜陈陈. 硫化氢合成酶在SVZ区神经干细胞中的表达鉴定及硫化氢对神经干细胞增殖的影响[EB/OL]. 北京:中国科技论文在线 [2017-05-16]. http://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201705-937.

No.4733548120091314****

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