大豆苹果酸脱氢酶1的亚细胞定位及抗体制备

李佳文; 刘磊; 李志强; 付爱根; 徐敏

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大豆苹果酸脱氢酶1的亚细胞定位及抗体制备

首发时间：2017-10-11

李佳文 ¹
李佳文(1993-)，男，学士，主要研究方向：蛋白的提取与纯化
刘磊 ² 李志强 ³ 付爱根 ¹ 徐敏 ²
徐敏（1973-）女，副教授，博导，主要研究方向：大豆遗传学

1、西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室
2、陕西省生物技术重点实验室
3、西北大学生命科学学院, 西安710069

摘要：大豆MDH1蛋白为NAD+/NADH依赖型苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase, MDH, EC 1.1.1.37)，这是一种古老的氧化还原酶，在细菌，古细菌及真核生物中广泛存在。本实验通过在洋葱表皮及烟草叶片中瞬时表达MDH1-GFP，确认了MDH1定位于线粒体，并发现其N末端第二的氨基酸对其正确定位十分重要。本实验还制备并纯化了MDH1的特异性多克隆抗体，为今后研究MDH1的作用机制奠定了基础，也为检测植物线粒体MDH水平进一步研究其作用机制提供了有用的工具。

关键词：分子生物学大豆苹果酸脱氢酶1 线粒体抗体

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Sublocalization of malate dehydrogenase 1 in soybean and its antibody preparation

LI Jiawen ¹
李佳文(1993-)，男，学士，主要研究方向：蛋白的提取与纯化
LIU Lei ¹ LI Zhiqiang ¹ FU Aigen ¹ XU Min ¹
徐敏（1973-）女，副教授，博导，主要研究方向：大豆遗传学

1、Chinese Education Ministry’s Key Laboratory of Western Resources and Modern Biotechnology, Key Laboratory of Biotechnology Shaanxi Province, College of Life Sciences, Northwest University, Xi-an 710069

Abstract：Soybean MDH1 is a NAD+/NADH dependent malate dehydrogenase (MDH, EC 1.1.1.37), which reversibly catalyzes the conversion of malate to oxaloacetate and exists in almost all living organisms including eubacteria, archea, and eukaryotes. Results from present study verified that soybean MDH1 is localized in mitochondria through transient expressing MDH1-GFP in both onion epidermal cells and the leaves of Nicotiana benthamiana. It is also revealed that the second amino acid is essential for transporting MDH1 into mitochondria. The polyclonal antibody prepared in this study is highly efficient and specific, which provides a useful tool to study the mechanism of plant mitochondria MDH.

Keywords： Molecular biology, Glycine max malate dehydrogenase 1 mitochondria antibody

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李佳文，刘磊，李志强，等. 大豆苹果酸脱氢酶1的亚细胞定位及抗体制备[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2017-10-11]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201710-33.

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论文编号	201710-33
论文题目	大豆苹果酸脱氢酶1的亚细胞定位及抗体制备
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