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论文编号 201803-242
论文题目 不同生长阶段大肠杆菌O157:H7适配体的筛选及鉴定
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不同生长阶段大肠杆菌O157:H7适配体的筛选及鉴定

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邹颖

邹颖(1993-),女,江南大学食品学院硕士研究生,食品科学

段诺

段诺(1986-),女,副教授,主要研究方向:食品科学

吴世嘉

王周平

王周平(1974-),男,教授,主要研究方向:食品科学

发送私信

发送给王周平

江南大学食品学院,江苏无锡 214122

摘要:大肠杆菌O157 : H7(Escherichia coli O157:H7, E.coli O157:H7)是肠出血性大肠杆菌(Enteroheamorrhagic Escherichia coli, EHEC)主要的致病菌株,其致病性主要是由其分泌的志贺毒素及其变体而引起,毒性极强,对公众的健康造成了巨大的威胁。因此,实现对大肠杆菌O157:H7准确快速的检测至关重要。在本研究中,考虑到志贺毒素在大肠杆菌O157:H7的不同生长时期均有存在,而且不同生长时期的细菌外膜结构可能存在差异,因此本实验采取不同生长时期的大肠杆菌O157:H7作为靶标,利用Cell-SELEX技术,通过十四轮的筛选(包括三轮反筛),成功获得能与不同生长时期大肠杆菌O157 : H7特异性结合的寡核苷酸适配体。接着通过克隆测序,获得32条寡核苷酸序列并对其进行同源性和二级结构分析,挑选出9条序列进行亲和性和特异性分析。最后利用流式细胞术分析得出序列Apt-5具有良好的亲和力和特异性,解离常数Kd值为9.04±2.08 nmol/L。

关键词: 大肠杆菌O157:H7 适配体 SELEX 流式细胞术

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