基于细胞膜片技术构建组织工程真皮：骨髓间充质干细胞、内皮细胞、成纤维细胞联合培养最适比例的研究

武姗; 项桦; 席大力; 高瑜; 李毕超; 任利玲

0
0
浏览
下载

摘要
关键词
基金信息
论文图表
动态公开评议
相关论文
评论

基于细胞膜片技术构建组织工程真皮：骨髓间充质干细胞、内皮细胞、成纤维细胞联合培养最适比例的研究

首发时间：2018-04-25

武姗 ¹
武姗（1991），女，硕士，组织工程皮肤
项桦 ¹ 席大力 ² 高瑜 ¹ 李毕超 ¹ 任利玲 ¹
任利玲（1973），女，教授、硕导，口腔正畸学

1、兰州大学口腔医学院，兰州 730000
2、兰州大学第一医院，兰州 730000

摘要：目的：研究骨髓间充质干细胞、脐静脉内皮细胞、真皮成纤维细胞在何种比例下联合培养可以形成组织工程真皮，为未来组织工程真皮的构建提供新思路。方法：HUVECs和HDF的复苏、培养，rBMSCs分离提取，以及共培养构建细胞膜片；1、3、7、14天细胞膜片HE染色以及厚度的测量、CD31免疫荧光染色、Ⅰ型、Ⅲ型胶原的免疫组化染色；第7天细胞膜片中的骨髓间充质干细胞干性的鉴定。结果：原代HUVECs、HDF复苏后形态良好，增殖旺盛；rBMSCs呈均一的长梭形，增殖旺盛；显微镜下观察第7天时成纤维细胞60%和80%组、第14天时40%和60%组细胞排列杂乱，编织成致密的网络状；CD31免疫荧光显示第7天、第14天时成纤维细胞60%、80%组内皮细胞形成的管腔状结构最为典型；免疫组化染色显示在第7天时成纤维细胞60%、80%组最接近人类真皮Ⅰ型胶原的含量，在第1天和第7天时成纤维细胞60%、80%组最接近人类真皮Ⅲ型胶原的含量；流式细胞仪鉴定显示在7天的各组细胞膜片中均有CD90标记的干细胞出现。结论：兔骨髓间充质干细胞、人脐静脉内皮细胞和人真皮成纤维细胞以9：5:21（即成纤维细胞60%组）的比例联合培养形成的细胞膜片在培养第7天时具有真皮的部分属性。

关键词：联合培养预血管化骨髓间充质干细胞成纤维细胞内皮细胞细胞膜片

For information in English, please click here

Construction of tissue engineering dermis based on cell membrane technique：the study of the optimal proportion of bone marrow mesenchymal stem cells,endothelial cells and fibroblasts

WU Shan ¹
武姗（1991），女，硕士，组织工程皮肤
XIANG Hua ¹ XI Dali ² GAO Yu ¹ LI Bichao ¹ REN Liling ¹
任利玲（1973），女，教授、硕导，口腔正畸学

1、stomatology School,Lanzhou university,Lanzhou,730000
2、The first hospital of Lan Zhou University,Lan Zhou 730000

Abstract：The proportion of co culture of bone marrow mesenchymal stem cells（BMSCs), umbilical vein endothelial cells （HUVECs）and dermal fibroblasts（HDFs） can form tissue engineering dermis, which is helpful for the construction of tissue engineering dermis in the future. Method：Recoverd and cultured HUVECs and HDF ，separation and extraction of rBMSCs，Co-culture and construction of cell sheets，HE staining and Measurement of thickness of cell sheets on 1, 3, 7, 14 days，immunofluorescence staining of CD31，Immunohistochemical staining of type I and type III collagen，Identification of bone marrow mesenchymal stem cells on the 7 days.Result: The primary HUVECs and HDF had good morphology and strong proliferation, and the rBMSCs had a homogeneous long spindle shape, and the proliferation was strong. Under the microscope,HDF60%,HDF80% on the 7 days and HDF 40%,HDF 60% groups on the 14 days were arranged and woven into a dense network.CD31 immunofluorescence showed HDF60%,HDF80% was the most typical vascular network on the 7,14 days . Immunohistochemical staining showed that, on the 7 days, HDF 60% a,HDF 80% were closest to the content of type I collagen of human dermis . On the 1 days and 7 days, HDF 60% HDF 80% were closest to the content of type III collagen of human dermis. The flow cytometry showed that there were stem cells in every cell sheets of each group on the 7 days. Conclusion:rBMSCs,HUVECs,HDFs co -cultured with 9:5:21 (fibroblast 60% group) were cultured on the 7 days could formed cell sheets that had some properties.

Keywords： Co-culture, prevascularization, bone marrow mesenchymal stem cells, fibroblasts, endothelial cells, cell sheets

基金：

论文图表：

引用

导出参考文献

.txt

.ris

.doc

武姗，项桦，席大力，等. 基于细胞膜片技术构建组织工程真皮：骨髓间充质干细胞、内皮细胞、成纤维细胞联合培养最适比例的研究[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2018-04-25]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201804-251.

No.****

动态公开评议

共计0人参与

动态评论进行中

全部评论

0/1000

论文编号	201804-251
论文题目	基于细胞膜片技术构建组织工程真皮：骨髓间充质干细胞、内皮细胞、成纤维细胞联合培养最适比例的研究
文献类型
收录期刊	上传封面中文期刊英文期刊期刊名称（中文）期刊名称（英文）年，卷（）上传封面中文专著英文专著书名（中文）书名（英文）出版地出版社出版年上传封面中文译著英文译著书名（中文）书名（英文）出版地出版社出版年上传封面中文论文集英文论文集编者.论文集名称（中文） [c]. 出版地出版社出版年， - 编者.论文集名称（英文） [c]. 出版地出版社出版年，- 上传封面中文文献英文文献期刊名称（中文）期刊名称（英文）日期-- 在线地址http:// 上传封面中文文献英文文献文题（中文）文题（英文）出版地出版社,出版日期-- 上传封面中文文献英文文献文题（中文）文题（英文）出版地出版社,出版日期--
英文作者写法：中外文作者均姓前名后，姓大写，名的第一个字母大写，姓全称写出，名可只写第一个字母，其后不加实心圆点“.”, 作者之间用逗号“，”分隔，最后为实心圆点“.”, 示例1：原姓名写法：Albert Einstein,编入参考文献时写法：Einstein A. 示例2：原姓名写法：李时珍；编入参考文献时写法：LI S Z. 示例3：YELLAND R L,JONES S C,EASTON K S,et al.