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论文编号 201805-251
论文题目 K599诱导中棉所24毛状根转化体系的建立
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K599诱导中棉所24毛状根转化体系的建立

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娄亚芳

娄亚芳(1990-),女,硕士研究生,主要研究方向:作物遗传育种. E-mail:louyafang@foxmail.com

张桂寅

张桂寅(1962-),男,研究员,主要研究方向:主要从事棉花遗传育种和种质资源研究

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教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室,河北省作物种质资源重点实验室,河北农业大学,保定,071001

摘要:[目的]为棉花转基因研究的提升和改进提供方法和奠定基础。[方法]利用发根农杆菌 K599分别侵染棉花中棉所24的子叶、茎段和带子叶节的下胚轴,诱导毛状根产生;利用 PCR技术和GUS组织化学染色对转基因毛状根进行分子和生化检测。[结果]中24子叶和带子叶节的下胚轴在发根农杆菌 K599侵染后均能够产生毛状根,但带子叶节的下胚轴诱导率较高,可以达到66.8%,更适合作为转化外植体。PCR检测和GUS染色表明转基因毛状根扩增有目的条带,染色显著变蓝,为阳性毛状根。[结论]建立并优化了发根农杆菌K599介导的棉花遗传转化体系,成功获得阳性转基因毛状根。

关键词: 棉花中24,发根农杆菌,毛状根,转化条件优化

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