您当前所在位置: 首页

论文收录信息

论文编号 201806-41
论文题目 重组L-门冬酰胺酶表达纯化及理化性质表征
文献类型
收录期刊

上传封面

中文期刊 英文期刊

期刊名称(中文)

期刊名称(英文)

年, 卷(

上传封面

中文专著 英文专著

书名(中文)

书名(英文)

出版地

出版社

出版年

上传封面

中文译著 英文译著

书名(中文)

书名(英文)

出版地

出版社

出版年

上传封面

中文论文集 英文论文集

编者 . 论文集名称(中文) [c].

出版地 出版社 出版年-

编者 . 论文集名称(英文) [c].

出版地 出版社 出版年-

上传封面

中文文献 英文文献

期刊名称(中文)

期刊名称(英文)

日期--

在线地址http://

上传封面

中文文献 英文文献

文题(中文)

文题(英文)

出版地

出版社, 出版日期--

上传封面

中文文献 英文文献

文题(中文)

文题(英文)

出版地

出版社, 出版日期--

后印本*

(请提交PDF文档)

重组L-门冬酰胺酶表达纯化及理化性质表征

引用

复制文本

导出参考文献

.txt .ris .doc

徐珊珊 1

徐珊珊(1992-),女,硕士研究生,主要研究方向:蛋白质纯化与功能研究

郑伟娟 12

郑伟娟(19),女,教授、硕导,主要研究方向:蛋白质纯化、分离与性能研究

华子春 123

华子春(1964-),男,教授、博导,主要研究方向:蛋白质结构与功能关系

发送私信

发送给华子春

1、 南京大学生命科学学院,南京 210023 2、 江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所/常州南京大学高新技术研究院,常州213164 3、 南京大学深圳研究院,深圳518057

摘要:目的:重组表达和纯化L-门冬酰胺酶,对其与白蛋白结合能力等性质进行检测,为重组L-asp的进一步结构与功能关系研究和蛋白质工程改造奠定基础;方法:采用改良脉冲稀释法纯化L-门冬酰胺酶,对纯化所得蛋白采用奈氏试剂法测其酶活,动态光散射检测重组L-门冬酰胺酶粒径分布,微量热泳动检测蛋白与人源白蛋白的结合能力,CCK-8在细胞水平检测重组蛋白对淋巴癌细胞以及对正常细胞的的杀伤作用,最后对重组L-门冬酰胺酶体外血浆半衰期进行检测。结果:纯化所得蛋白纯度为90.14%,产率为5.23 mg/L,酶的比活性为201.21 IU/mg;重组蛋白的平均粒径为6.25±0.16 nm;细胞水平活性显示:48 h后,L-asp对Jurkat和Raji细胞的IC50分别为4.15 IU/mL和4.65 IU/mL;72 h后,L-asp对Jurkat和Raji细胞的IC50分别为2.40 IU/mL和2.01 IU/mL;重组L-asp蛋白与HSA的亲和力为14.15 μmol/L,体外血浆半衰期为25 h。结论:本文建立了重组L-asp的表达纯化方法,对重组L-asp的性质进行了表征,为重组L-asp的进一步结构与功能关系研究和蛋白质工程改造奠定了基础。

关键词: 生物工程 门冬酰胺酶 白蛋白结合 细胞毒作用 体外血浆半衰期

图表:

动态公开评议

评论

评论一下

全部评论
评论