重组大肠杆菌双酶一锅法全细胞合成L-苯乳酸研究

茅菁菁; 夏雨; 王周平

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重组大肠杆菌双酶一锅法全细胞合成L-苯乳酸研究

首发时间：2019-01-28

茅菁菁 ¹
茅菁菁（1994-），女，硕士研究生，食品生物技术
夏雨 ¹
夏雨（1975-），男，副教授、硕导，食品生物技术、食品安全危害物的检测与控制
王周平 ¹

1、江南大学食品学院，江苏无锡 214122

摘要：本研究构建了苯丙氨酸脱氢酶和L-羟基异己酸还原酶的共表达重组大肠杆菌E. coli BL21（DE3, pET28a-pdh-ldh），利用全细胞催化L-苯丙氨酸合成L-苯乳酸，且该反应过程能实现辅酶I NAD+和NADH的自循环。对重组大肠杆菌的诱导条件进行了优化，通过单因素试验和正交试验，最终确定了最佳的诱导条件：OD600=0.6时，添加诱导剂IPTG至终浓度为0.8 mmol/L，在22℃下诱导14.0 h。在最佳的诱导条件下得到的重组大肠杆菌E. coli BL21（DE3, pET28a-pdh-ldh）全细胞催化50.0 mmol/L的L-苯丙氨酸，L-苯乳酸的产物浓度能达到18.2 mmol/L，产率为33.0%，显示了较好的应用前景，也为后续酶的改造奠定了基础。

关键词： L-苯乳酸苯丙氨酸脱氢酶 L-羟基异己酸还原酶全细胞转化

For information in English, please click here

Study on One-pot,Two-enzyme biosynthesis of L-phenyllactic by whole cell recombinant E. coli

MAO Jingjing ¹
茅菁菁（1994-），女，硕士研究生，食品生物技术
XIA Yu ¹
夏雨（1975-），男，副教授、硕导，食品生物技术、食品安全危害物的检测与控制
WANG Zhouping ¹

1、School of Food Science and Technology,Jiangnan University,Jiangsu Wuxi 214122

Abstract：In this study, recombinant Escherichia coli BL21(DE3, pET28a-pdh-ldh) with phenylalanine dehydrogenase and L-isocaproate reductases was constructed.L-phenyllactic acid was synthesized from L-phenylalanine by whole cell.The reaction process can achieve self-circulation of coenzymes I NAD+ and NADH. This experiment also optimized the induction conditions of recombinant E.coli BL21 (DE3, pET28a-pdh-ldh). In the whole cell biosynthesis process using collected recombinant cells as catalyst, at optimal induction conditions(OD600=0.6, IPTG concentration：0.8mmol/L, 22℃and 14.0h), the recombinant E. coli BL21(DE3, pET28a-pdh-ldh) produced 18.2 mmol/L L-PLA with a conversion of33.0% from 50.0 mmol/L L-phenylalanine,which showed a good application prospect and laid the foundation for the subsequent enzyme modification.

Keywords： L-phenyllactic acid Phenylalanine dehydrogenase L-isocaproate reductases whole cell biosynthesis

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茅菁菁，夏雨，王周平. 重组大肠杆菌双酶一锅法全细胞合成L-苯乳酸研究[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2019-01-28]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201901-185.

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论文编号	201901-185
论文题目	重组大肠杆菌双酶一锅法全细胞合成L-苯乳酸研究
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