可抑制α-淀粉酶卵黄抗体的制备及其稳定性研究

杨萃; 赵伟; 杨瑞金; 张文斌; 华霄; 仝艳军

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可抑制α-淀粉酶卵黄抗体的制备及其稳定性研究

首发时间：2019-01-15

杨萃 ^{1
2}
杨萃（1994-），女，硕士研究生，研究方向：食品加工与配料。
赵伟 ^{1
2}
赵伟（1982-），男，教授，主要研究方向：食品加工与配料。
杨瑞金 ^{1
2} 张文斌 ^{1
2} 华霄 ^{1
2} 仝艳军 ^{1
2}

1、江南大学国家重点实验室，无锡,214122
2、江南大学食品学院，无锡,214122

摘要：制备可抑制α-淀粉酶卵黄抗体（A-IgY）,分析其对α-淀粉酶活性的抑制效果，并对其稳定性进行研究。以α-淀粉酶为抗原，免疫海兰褐壳蛋鸡，水稀释和二次盐析法提取纯化IgY，SDS-PAGE和尺寸排阻色谱分析IgY的分子量和纯度，PAS法检测糖蛋白，Bernfeld法测IgY对α-淀粉酶的体外抑制效果。所得A-IgY的纯度为92.45%，属于糖蛋白，其重链和轻链分别在65 kDa和25 kDa处。首免后，A-IgY对α-淀粉酶的抑制率逐渐上升，第10周达到最大值（约98%），而后趋于稳定，对相同酶活力的人胰α-淀粉酶的抑制率为82.76%。A-IgY对猪胰α-淀粉酶的抑制率呈现剂量相关性，半抑制浓度（IC50）值为1.189 mg/mL。25~65℃或pH 4~12孵育30 min，A-IgY能保持较高的抑制活性；A-IgY经胃蛋白酶反应1min抑制率下降25%，2h内保持46%的抑制活性；A-IgY在胰蛋白酶液中孵育3 h能保持81%的抑制活性，8h时有66%的抑制活性。A-IgY可用作一种有效的新型、天然、安全的α-淀粉酶抑制剂，可为糖尿病防治的研究提供新思路。

关键词：卵黄抗体 α-淀粉酶抑制稳定性

For information in English, please click here

Preparation and stability of egg yolk immunoglobulin against α-amylase

YANG Cui ^{1
2}
杨萃（1994-），女，硕士研究生，研究方向：食品加工与配料。
ZHAO Wei ^{1
2}
赵伟（1982-），男，教授，主要研究方向：食品加工与配料。
YANG Ruijin ^{1
2} ZHANG Wenbin ^{1
2} HUA Xiao ^{1
2} TONG Yanjun ^{1
2}

1、 State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan Univercity, Wuxi, 214122
2、School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi, 214122

Abstract：In this paper, the egg yolk immunoglobulin against α-amylase (A-IgY) was prepared and analyzed its stability. Hy-line lying hens were immunized with α-amylase, IgY was separated and purified from eggs by using water dilution and salting-out method. The molecular weight and purity of IgY were analyzed by SDS-PAGE and size-exclusion chromatography (SEC) respectively. The glycoprotein identified by periodic acid Schiff (PAS). The inhibitory activity against α-amylase of IgY was measured by Bernfeld method. The purity of A-IgY was 92.45%, which belonged to glycoprotein. The molecular weights of the heavychain and light chain of A-IgY were 65 kDa and 25 kDa respectively. The inhibition rate of A-IgY on α-amylase gradually increased and reached a maximum (about 98%) at the 10th week and then stabilized. The inhibition rate of IgY against human pancreatic α-amylase was 82.76%. The inhibition rate of IgY against porcine pancreatic α-amylase exhibited dose correlation and the semi-inhibitory concentration (IC50) value was 1.189mg/mL. A-IgY maintained its inhibitory activity when it was kept in 25~65 C or pH 4~12 for 30min. The inhibition rate decreased by 25% after A-IgY incubated with pepsin for 1 min and the inhibitory activity of A-IgY maintained 46% after 2 h. A-IgY maintained the inhibitory activity of 81 % after incubated with trypsin for 3h and kept at 66% after 8 h. A-IgY as an effective, new, natural and safe α-amylase inhibitor, which can be used in the prevention and treatment of diabetes.

Keywords： IgY α-amylase inhibition stability

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杨萃，赵伟，杨瑞金，等. 可抑制α-淀粉酶卵黄抗体的制备及其稳定性研究[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2019-01-15]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201901-86.

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论文编号	201901-86
论文题目	可抑制α-淀粉酶卵黄抗体的制备及其稳定性研究
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