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论文编号 201908-37
论文题目 STIMI调控TRPC1参与HEK293细胞铅内流
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STIMI调控TRPC1参与HEK293细胞铅内流

首发时间:2019-08-23

张洪梅 1   

张洪梅(1985年-),女,主要研究方向:劳动卫生与环境卫生

薛勇 1    李文军 1   

李文军(1972年-),男,副教授、硕导,主要研究方向:劳动卫生与环境卫生

  • 1、南方医科大学公共卫生学院职业卫生与职业医学系

摘要:目的:研究Pb2+进入HEK293细胞途径,探讨是否TRPC1参与Pb2+进入细胞。方法:MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V+PI染色检测Pb2+诱导人HEK293细胞的凋亡作用;Western Blot检测PARP蛋白表达的变化;过表达和干扰TRPC1,检测进入HEK293细胞Pb2+浓度;分别过表达STIM1 DD、TRPC1KK,共转染STIM1DD和TRPC1KK,检测进入HEK293细胞Pb2+浓度。结果:Pb2+导致HEK293细胞存活率下降且具有剂量-反应关系、Pb2+能导致HEK293细胞凋亡;过表达和TRPC1分别可促进和减少Pb2+进入HEK293细胞;转染TRPC1KK铅的进入量与对照组相比明显降低;共转STIM1DD+TRPC1KK铅的进入量比TRPC1KK组、STIM1DD组明显增多,差异具有统计学意义(P﹤0.001)。结论:Pb2+诱导的HEK293细胞凋亡。Pb2+铅可以通过SOCE通道进入细胞内,SOCE的重要的分子组成STIM1参与铅进入细胞,STIM1可以通过TRPC1参与铅进入细胞内。

关键词: 劳动卫生学 STIM1 TRPC1 SOC

For information in English, please click here

STIM1 regulate TRPC1 involved in Pb2+ influx in HEK293 cells

Zhang Hongmei 1   

张洪梅(1985年-),女,主要研究方向:劳动卫生与环境卫生

Xue Yong 1    Li Wenjun 1   

李文军(1972年-),男,副教授、硕导,主要研究方向:劳动卫生与环境卫生

  • 1、Department of Occupational Health & Occupational Medicine, School of Public Health,Southern Medical University

Abstract:Objective: invistigate the molecular mechanism of Pb2+ influx in HEK293 cells, whether TRPC1 invovle in Pb2+ influx. Method: The cell viability was measured with MTT colorimetric assay; The apoptosis of SH-SY5Y cells induced by MPP+ was confirmed by hoechst 33342 staining and Annexin V+PI assay ;Western-blotting was used to identify the protein expression changes of PARP; Transfect with wild-type TRPC1 or TRPC1 siRNA, followed 100μM Pb2+ treated for 24 hours, then mesure the amount of Pb2+ into the cells by ICP-STIM1 regulate TRPC1 involved in Pb2+ influx in HEK293 cellsMS. We transfect with STIM1DD、TRC1KK and STIM1DD+TRPC1KK, followed 100μM Pb2+ treated for 24 hours. The amount of Pb2+ into the cells is measured by ICP-MS. Results: overexpression of TRPC1– WT increase Pb2+ influx , on the contrary, knockdown the TRPC1 decrease the Pb2+ influx. The results suggested that TRPC1 take part in Pb2+ into cells. Pb2+ influx decreased obviously because TRPCKK lost the normal function of TRPC1. Pb2+ inflSTIM1 regulate TRPC1 involved in Pb2+ influx in HEK293 cellsux of cotransfection STIM1DD and TRPC1KK more than that of STIM1DD or TRPC1KK. Conclusion: Pb2+ influx the HEK293 cell through SOCE channel. STIM1 regulate TRPC1 through molecular mechanisms involved in Pb2+ into the HEK293 cells, meanwhile involved in the cell toxicity of Pb2+.

Keywords: Labor hygiene STIM1 TRPC1 SOC

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张洪梅,薛勇,李文军. STIMI调控TRPC1参与HEK293细胞铅内流[EB/OL]. 北京:中国科技论文在线 [2019-08-23]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201908-37.

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