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论文编号 202003-71
论文题目 过表达富马酸酶提高嗜乙酰乙酸棒杆菌产琥珀酸
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过表达富马酸酶提高嗜乙酰乙酸棒杆菌产琥珀酸

首发时间:2020-03-06

孙文 1   

孙文(1994-),女,在读研究生,主要研究方向:发酵工程

罗玮 1    郑璞 1   

郑璞(1966-),女,博士生导师,主要研究方向:发酵工程与生物催化

陈春梅 1    陈鹏程 1    吴丹 1   
  • 1、江南大学生物工程学院,江苏无锡 214112

摘要:琥珀酸是极具潜力的大宗化学品,将来源于天然产琥珀酸放线杆菌的富马酸酶基因在乳酸脱氢酶基因缺失的嗜乙酰乙酸棒杆菌中异源表达,得到基因工程菌株△ldh/ fum和△ldh/ pyc/fum,用于发酵产琥珀酸。结果表明:外源富马酸酶的引入,可明显提高菌株好氧培养时的菌体量和菌体比生长速率;同时缺氧条件发酵时,其合成琥珀酸的碳流量提高10 %以上,且积累琥珀酸浓度增加。在3 L发酵罐上采用两阶段发酵,前期好氧培养至菌体生长进入稳定期,然后投入一定比例的葡萄糖和碳酸氢钠,并使起始pH 小于8.2转为限氧发酵。在通气量0.05 vvm,温度30 ℃,转速380 r/min, pH 7.6的条件下发酵90 h,琥珀酸浓度可至108 g/L。说明了过表达富马酸酶是提高嗜乙酰乙酸棒杆菌产琥珀酸的有效途径。

关键词: 琥珀酸 嗜乙酰乙酸棒杆菌 琥珀酸放线杆菌 富马酸酶 发酵

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Overexpression of fumarase to enhances succinate production by C.acetoacidophilum

SUN Wen 1   

孙文(1994-),女,在读研究生,主要研究方向:发酵工程

LUO Wei 1    ZHENG Pu 1   

郑璞(1966-),女,博士生导师,主要研究方向:发酵工程与生物催化

CHEN Chunmei 1    CHEN Pengcheng 1    WU Dan 1   
  • 1、College of biological engineering,Jiangnan university,Wuxi,Jiangsu 214122

Abstract:Succinic acid is a potential bulk chemical. In this work, the fumarase gene derived from Actinobacillus succinogenes were successfully expressed in Corynebacterium acetoacidophilum ATCC 13870 to obtain a genetically engineered strains Δldh / fum and △ ldh / pyc / fum, and used for succinic acid production by fermentation.The results shown that the introduction of exogenous fumarase can significantly increase the cell specific growth rate and biomass. As well as the carbon flux to the formation of succinic acid was increased by more than 10% when fermented under oxygen deprived condition. A two-stage fermentation was performed on a 3 L fermenter, in which aerobic culture was carried out until cell growth at the stable phase, then glucose and sodium bicarbonate were added with the initial pH was less than 8.2, which was converted to oxygen limiting fermentation. Under the conditions of aeration of 0.05 vvm, temperature of 30 ℃, rotation speed of 380 r / min, and pH 7.6 for 90 h fermentation, the concentration of succinic acid reached 108 g / L. It is shown that overexpression of fumarase is an effective way to increase the production of succinic acid by Corynebacterium acetoacidophilum.

Keywords: Succinic acid Corynebacterium acetoacidophilum Actinobacillus succinogenes Fumarase Fermentation

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孙文,罗玮,郑璞,等. 过表达富马酸酶提高嗜乙酰乙酸棒杆菌产琥珀酸[EB/OL]. 北京:中国科技论文在线 [2020-03-06]. http://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/202003-71.

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