2020-06-19
刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans ）寄生于海水硬骨鱼导致"白点病"。肌动蛋白解聚因子（ADF）调节肌动蛋白细胞骨架动力学变化，参与细胞的运动、形态发生、发育以及感染的建立等。本研究旨在克隆和表达刺激隐核虫的ADF基因同源物（CiADF1），分析分子特征并初步评估其免疫效果。结果显示：该基因的开放阅读框（ORF）为324 bp，编码一12.6 kDa的多肽链。逆转录PCR分析发现CiADF1在生活史的各期均表达。用PCR定点诱变改造密码子后，该ORF被插入pGEX-4T-1质粒中并转化到细菌中。该菌经诱导表达与谷胱甘肽S巯基转移酶（GST）融合的重组蛋白rCiADF1。用rCiADF1免疫小鼠获得抗血清。免疫印迹分析显示：rCiADF1免疫鼠血清能识别刺激隐核虫的内源CiADF1，且分子量也与理论值一致；分别以rCiADF1和GST为抗原，腹腔注射免疫大黄鱼 Pseudosciaena crocea 鱼苗，两次免疫后，用亚致死剂量的刺激隐核虫幼虫攻毒（3000/尾），攻毒后5 d，rCiADF1免疫组与GST免疫组、rCiADF1免疫组和未免疫组之间相对免疫保护率分别为50.8%和64.7%，初步说明rCiADF1免疫对宿主鱼有一定的保护作用。
国家自然科学基金（31672244）
国家海洋局“十三五”海洋经济创新发展示范项目（FZHJ11）
福建师范大学生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室 福州 350117,福建师范大学生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室 福州 350117,福建师范大学生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室 福州 350117,福建师范大学生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室 福州 350117
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