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为您找到包含“methyl parathion hydrolase”的内容共2

任天雷,杨海泉,许菲

2018-03-22

甲基对硫磷水解酶作为环境友好绿色催化剂,可降解甲基对硫磷等在土壤中残留的有机磷农药,这使得如何提高甲基对硫磷水解酶的水解效率成为酶工程中备受关注的问题。基于分子结构与生物信息学等多维度特征,确定了催化活性中心周围的9个关键位点。构建了一个含1500个突变体的筛选文库,进行定向进化。经过两轮筛选,最终确定2株催化效率提高的突变体,L258V和L273M。其催化效率常数kcat/Km值分别为134.1 mM-1os-1和166.5 mM-1os-1,与野生酶相比较分别提高了27.3%和58.1%。这种通过半理性设计构建定向进化文库的方法,不仅有效的提高了甲基对硫磷水解酶的筛选效率,更为酶的改造提供了新的思路。

江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122,江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122,江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122

#生物学#

本文收录在生物技术通报,2018,34(10):1-9.

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严红

2016-05-17

对Plesiomonas sp.M6来源的甲基对硫磷水解酶基因进行去掉N端信号肽序列和密码子优化设计,人工合成该基因,通过生物砖技术分别构建该基因的1-4拷贝毕赤酵母表达载体,获得的载体通过电转化方式导入毕赤酵母细胞。通过对表达产物的鉴定和酶学性质研究结果表明:经优化改造后的甲基对硫磷水解酶基因在毕赤酵母细胞成功表达,摇瓶发酵结果显示,该酶表达量达到1.9U/ml,是已报导水平的10倍。酶活性达到15.83U/mg。携带不同拷贝甲基对硫磷水解酶基因的酵母表达菌株在该酶的表达水平上无显著差异。

高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20124208120004

湖北大学生命科学学院

#生物学#

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