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崔中利
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期刊论文
利用短短小芽孢杆菌启动子和信号肽编码序列构建穿梭分泌表达载体
微生物学报，2006，46（4）：526～530，-0001，（）：
以短短小芽孢杆菌B15的总DNA为模板，利用PCR技术克隆到其细胞壁蛋白基因串联启动子和信号肽编码序列，测序分析后提交GenBank，登录号为AY956423。重新设计引物扩增该片段并在PCR产物两侧引入BamHI和PstI酶切位点，将PCR产物双酶切后克隆至穿梭载体pP43NMK的相应位点构建分泌表达载体pP15MK，插入片段置于该载体中mpd基因的上游，并使信号肽编码序列与去除了自身信号肽编码序列的mpd基因阅读框恰好融合。将pP15MK导入枯草杆菌构建表达菌株1A751（pP15MK），在短短小芽孢杆菌启动子和信号肽元件的带动下，mpd基因能够在表达菌株的对数生长期和稳定期持续性高效分泌表达，表达产物结合在细胞膜上；发酵液在48h酶活达到最高值7.79U/mL，是出发菌株邻单胞菌M6表达量的8.1倍。
【免责声明】以下全部内容由[崔中利]上传于[2011年03月18日 16时30分07秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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