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期刊论文
通过同源重组构建酿酒酵母新型表达质粒*
中国科学C辑生命科学,2005,35(1):37~43,-0001,():
利用同源重组的方法,构建了具有高拷贝数和高稳定性的新型酿酒酵母表达质粒。对酵母附加体型载体pHC11进行一系列改造,得到质粒pHC11R,并用适当的酶切线性化;利用PCR反应得到人IFNa2b表达单元片段,它的两端和线性化的pHC11R的两端具有50bp左右的同源区段。上述两个片段共转化酿酒酵母,在酵母体内经同源重组后得到表达质粒pHC11R-IFNa2b,该表达质粒与pHC11-IFNoa2b相比去除了质粒上用于在大肠杆菌中复制和筛选所需的序列,在宿主菌中的稳定性和拷贝数均有明显提高,同时外源基因的表达量也获得了一定程度的提高。在此基础上,进一步构建了带有不同表达元件的pHR系列载体,使得外源基因能够通过同源重组在酿酒酵母中快速、方便地克隆和表达。
【免责声明】以下全部内容由[吕红]上传于[2006年06月20日 23时12分40秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。
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