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孙长凯
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期刊论文
人NMDA受体主亚基M3-M4环基因片段的高效表达、纯化与鉴定
中国生物化学与分子生物学报2003年10月19(5): 588-593/Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology，-0001，（）：
用基因工程方法获得人N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受体主亚基M3-M4环靶片段，以此为免疫原，用于进一步免疫原性及相关应用研究。自人脑胶质瘤组织中提取总RNA，采用RT-PCR扩增出人NMDA受体主亚基M3-M4环的基因片段，并按照计算机辅助原核表达载体pBV220中外源基因高效表达的数学模型预测方法，将其进行优化改构。将目的基因克隆到pBV220中，转化大肠杆菌DH5α，升温诱导表达，从蛋白质水平检测重组体在大肠杆菌中的表达情况，通过制备性SDS-PAGE进行纯化，从相对分子质量、免疫反应性、肽质谱指纹分析等方面进行鉴定。结果表明，成功构建了人NMDA受体主亚基M3-M4环的原核表达载体(命名为pBV-NR1L3)，通过基因优化，实现了高效表达。凝胶扫描分析表达量约占菌体总蛋白29%，重组肽纯度达95%以上。
【免责声明】以下全部内容由[孙长凯]上传于[2007年05月31日 12时23分37秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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