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孙茂盛
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期刊论文
人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定
第一军医大学学报，2004，24（8）：913～916，-0001，（）：
目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子。方法应用RT-PcR的方法得到survivin的cDNA，并构建成pBV220-survivin原核表达质粒，将其导入E.coli B121（G01d）中，诱导表达survivin蛋白。通过DEAE sepbaroseFastFlow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白。用Western blotting检测表达产物。结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致，表达质粒在E.coli B121（Gold）中得到高效表达，表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30%以上表达产物以包涵体的形式存在。通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白，其纯度达到95%以上。wester blotting证明表达产物具有特异性。结论获得了较高纯度的survivin蛋白，为进一步深入研究该蛋白的细胞调亡调控功能提供了工具。
【免责声明】以下全部内容由[孙茂盛]上传于[2005年02月25日 00时59分16秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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