背景与目的：RNA干扰（ RNA interference，RNAi） 是指双链RNA导入细胞后诱导靶mRNA发生特异性的降解，导致基因转录后沉默的现象。RNAi在基因功能和抗病毒基因治疗等方面均有报道。但对喉癌等头颈恶性肿瘤中高表达的人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）基因，目前尚未见报道。本课题利用RNAi 技术，研究短发夹RNA（short hairpinRNA，shRNA）抑制hTERT基因表达对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用。方法：根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA。建立人喉癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型。将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内，观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤组织内的表达；以HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变；以原位末端标记法（TUNEL法）检测肿瘤细胞的凋亡情况；以免疫组化SP法检测hTERT蛋白在肿瘤内的表达；光镜下观察心、肝、肾、脾结构的改变并测量血液学和血液生化指标。结果：pshRNA组（A组）、空质粒载体组（B组）与生理盐水组（C组）之间比较，A组与C组瘤体积有显著性差异（P<0.01），B组与C组之间瘤体积无显著性差异（P>0.05），抑瘤率为76.50%。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后，共聚焦显微镜下见大量的癌细胞表达绿色荧光。病理学检查及TUNEL检测发现：A组肿瘤生长受到抑制，细胞分裂相少见，可见大量肿瘤细胞坏死及凋亡，该组肿瘤细胞的凋亡指数[（26.47±4.25）%]明显高于B组[（ 3.40±1.41）%]和C组[（2.73±1.35）%]。给予pshRNA后瘤体内hTERT蛋白表达明显下调，而且对心、肝、肾、脾无明显损害，对造血系统无影响。结论：表达shRNA的DNA载体质粒沉默hTERT基因可显著抑制人喉癌裸鼠肿瘤的生长，而且对心、肝、肾、脾及造血系统无明显的毒副作用。