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汪天虹
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期刊论文
丝状真菌瑞氏木霉外源基因表达系统的构建
中国生物化学与分子生物学报，2003，19（6）：736～745，-0001，（）：
采用PCR技术体外扩增获得了瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶（CBH）启动子和终止子序列。并以大肠杆菌质粒PUC19为骨架，在该启动子和终止子序列间加入多克隆位点，构建了瑞氏木霉强表达整合型载体PTRIL。以质粒PAN721为模板，体外扩增了带有潮霉素磷酸转移酶（hph）基因的DNA片段，将hph插入PTRIL的cbh1启动子和终止子序列之间，构建了Pcbh1-hph-Tcbh1表达盒。用此表达盒转化瑞氏木霉C30原生质体,在潮霉素平板上得到15株抗性转化子。对其中的H1转化子进行了PCR和Southern印迹分析，证实hph基因确实整合到转化子染色体DNA上，并在Pcbh1启动子控制下进行高效表达。转化子H1对潮霉素抗性达150mgPL，比出发菌株提高2倍.瑞氏木霉强表达整合型载体PTRIL的构建成功为开展瑞氏木霉分子生物学研究以及进一步的工程菌株构建工作奠定了基础。
【免责声明】以下全部内容由[汪天虹]上传于[2006年11月07日 19时02分32秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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