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魏林

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期刊论文

A族链球菌表面蛋白Fba的原核表达及免疫原性分析

魏林马翠卿李彩虹王秀荣王秀文尹晓琳顾海燕冯惠东

中华传染病杂志,2008,26(3):146~150,-0001,():

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摘要/描述

目的 研究A族链球菌(GAS)表面新型纤连蛋白Fba的免疫原性,探讨GAS感染机体的免疫应答机制。方法 PCR扩增fba基因,测序正确后克隆至原核表达质粒pGEX4T-2,并在-E. coli BL21中表达,应用ELISA和Western印迹法鉴定目的蛋白表达,以该蛋白作为抗原,包被酶联板,检测GAS全菌免疫鼠血清、33份抗链球菌“O”阳性患者血清。同时,将该蛋白免疫Balb/C小鼠,3次免疫后收集皿清,检测IgG效价。结果 ELISA和Western印迹证实,表达的Fba重组蛋白可与已知兔抗Fba阳性血清产生特异性反应;且Fba蛋白可与GAS全菌免疫鼠血清、抗链球菌“O”阳性患者血清发生特异性结合。Fba蛋白免疫小鼠后抗血清IgG效价达1:4800。结论 GAS感染或Fba蛋白免疫动物后均可诱导动物体产生Fba抗体,该抗体与Fba重组蛋白可产生特异性反应,提示Fba蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。Fba蛋白可作为GAS的候选疫苗及检测GAS感染患者血清效价的重要工具。

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