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项光亚

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期刊论文

叶酸-PGA偶联酶的制备及体外催化活性动力学性质*

项光亚张奇龙娜吴继洲

华中科技大学学报(医学版),2005,34(5):547~549 ,-0001,():

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摘要/描述

目的 制备叶酸与青霉索酰化酶G(PGA)偶联酶并测定其体外催化活性动力学性质,为叶酸导向酶催化前体药物的肿瘤治疗(FDEPT)奠定基础。方法 通过双功能偶联剂l-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)将叶酸与PGA偶联,产物经Sephadcx G-25纯化。根据叶酸在363nm处的摩尔吸收系数计算偶联比。以PDAB法测定偶联酶的催化活性。结果 偶联酶的偶联比为3~4;比活约为29.8U/mg;偶联酶和原酶作用的最适pH均为8.O,最适温度为55℃,偶联酶和原酶在pH5~8的范围内都较稳定,Km和Vmax值分别为4.92μmol/ml,3.28/ml和4.71μmol/ml.3.37μmol/ml。结论 叶酸与PGA偶联不会导致PGA催化活性降低。

【免责声明】以下全部内容由[项光亚]上传于[2009年12月25日 20时20分34秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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