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于文功
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期刊论文
低温培养对大肠杆菌电穿孔转化效率的影响①
，-0001，（）：
在18℃和37℃振荡培养大肠杆菌DH5α并制备感受态细胞，用Eppendorf公司的Multiporator电转移仪进行电穿孔转化，研究了培养温度对转化效率的影响。实验结果表明，低温（18℃）培养的细菌，回收时的OD600值在0.5～1.0时，转化效率都维持在高水平；而在37℃培养的细菌，转化效率仅在OD600 0.6～0.7时出现一个锐利的峰值，此OD600值前后转化效率显著下降。在不影响细胞生长的情况下，18℃培养细菌的转化效率随电场强度增加而升高；而37℃培养的细菌在电场强度超过20.5kV/cm时转化效率将大幅度下降。另外，还对影响转化效率的其他因素（培养基、振荡培养时的转速、细胞密度、质料浓度、电击前后勤部冰浴时间等）进行了优化，建立了一个便利而高效的质料DNA电转化方法，获得1.02×10 10cfu/μg DNA的高转化效率。
【免责声明】以下全部内容由[于文功]上传于[2005年02月25日 17时34分30秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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