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余新炳

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期刊论文

日本血吸虫翻译控制肿瘤蛋白基因的杆状病毒表达载体构建和在昆虫细胞中的表达*

余新炳王海胡少敏黄艳吕刚吴忠道**余新炳*

中国人兽共患病杂志,2005,21(8):656~659,-0001,():

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摘要/描述

构建日本血吸虫的翻译控制肿瘤蛋白(SjTCTP)基因的杆状病毒重组供体质粒pFASTA-TCTP,用该重组转移质粒转化含有杆状病毒表达载体以构建BacmidGFP-TCTP,感染昆虫细胞进行表达。方法将已克隆的sjTCTP基因与线性化的pFAslA进行连接为pFAsTA-TCTP,使pFASTA-TCTP与DH10BAC感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组BacmidGFP-TCTP克隆,提取BacmidGFP-TCTP转染昆虫细胞Sf9获得有感染力的病毒,利用病毒感染sf9细胞进行蛋 白表达。通过荧光镜观察、RT-PCR、SDS-PAGE和western-Blotting检测表达情况。结果获得了重组sjTCTP的杆状病毒,细胞能表达出与sjTCTP单抗结合的、分子量为23kDa左右的融合有组氨酸标签的目的蛋白。结论SjTCTP能在昆虫细胞中获得良好表达,为其的分子生物学活性研究奠定了基础。

【免责声明】以下全部内容由[余新炳]上传于[2006年11月01日 23时03分11秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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