李刚
基因芯片技术应用于肝炎病毒的研究;丙型肝炎和乙型肝炎病毒耐药基因的研究;传染性非典型肺炎抗体变化规律的研究。
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- 姓名:李刚
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学术头衔:
博士生导师
- 职称:-
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学科领域:
内科学
- 研究兴趣:基因芯片技术应用于肝炎病毒的研究;丙型肝炎和乙型肝炎病毒耐药基因的研究;传染性非典型肺炎抗体变化规律的研究。
李刚,男,64年3月出生。博士,教授、主任医师,博士生导师。1987年中山医科大学六年制本科毕业,分配到中山大学附属第三医院传染病科工作至今,历任住院医师、讲师、副教授、教授,从事传染病的防治。1998年到英国进修一年。现担任中山大学附属第三医院副院长,广东省病毒性肝炎临床与实验研究中心办公室主任,粤港肝炎研究中心办公室主任,英国皇家热带医学与卫生学会海外会员。
5年来已完成或目前承担科研课题16项,其中国家级3项(包括SARS 973专项课题,国家自然科学基金),省部级4项。发表论文46篇,3篇SCI收录论文。获得省部级科技进步奖3项,参与编写4部专著3部教材,包括五年制、七年制及八年制全国医药院校规划教材。2001年评为首届广东省十大杰出留学青年回国创业之星,广东省千百十工程省级学术带头人培养对象,广东省抗击非典二等功臣,广州市抗击非典标兵,广东省五四奖章获得者。建立多项检测技术,包括丙型肝炎病毒、庚型肝炎病毒、登革病毒、乙型脑炎病毒、乙型肝炎病毒变异基因等的检测。
研究方向集中在3方面,基因芯片技术应用于肝炎病毒的研究;丙型肝炎和乙型肝炎病毒耐药基因的研究;传染性非典型肺炎抗体变化规律的研究。
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【期刊论文】中国人4型登革病毒E基因部分片段的cDNA克隆与序列分析
李刚, 姚集鲁, 彭文伟, 王飞
Chinese J Exp Clin Virol, March 1997, Vol. 11, No.1,-0001,():
-1年11月30日
1993年10月广东省发生登革热的流行,我们从其中一个病人血清中扩增到4 型登革病毒(DV4)包膜蛋白基因(E)的部分cDNA片段,对其进行了分子克隆及序列测定。DV RNA经随机引物逆转录后用DV4特异的引物扩增,获得421bp的产物,补齐和提纯后插入pUC18和pUC19质粒载体,采用双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列,与同型DV代表株比较,同源性达到93172%,与不同型DV的同源性介乎61126%~64140%,而与同属的乙型脑炎病毒比较,同源性只有40131%。比较推导的氨基酸序列后发现一个含有12个氨基酸的保守区,可能是黄病毒属中具有重要生物学功能的部位。
登革热病毒, 克隆,, 分子, 碱基序列
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【期刊论文】丙型肝炎病毒(HCV)广东株包膜蛋白区cDNA的序列测定*
李刚, 姚集鲁, 彭文伟
病毒学报,1997,13(1):24~32,-0001,():
-1年11月30日
采用微粒吸附法从广东省一慢性丙型肝炎病人血清中提取丙型肝炎病毒(HCV)RNA,经随机引物逆转录为cDNA,再经聚合酶链反应(PCR),获得包膜蛋白区(E1,E2/NS1)两个部分重叠的产物片段,分别为489bp和806bp。其中,489bp片段主要位于E1区,小部分位于C区;806bp片段位于E2/ NS1区。将489bp片段插入pUC19载体,再亚克隆进pUC18质粒载体。806bp片段则插入到pBV220质粒及M13mp18、M13mp19噬菌体。将所测定的序列(共为1246bp)与多个已知分离株相应序列比较后发现,核苷酸同源性介乎61.00%-89.41%,与Ⅱ(1b)型同源性最大,超过86%;推导的氨基酸同源性为60.24%-87.23%。与其它株比较,HCV广东株(HCV-GD)较大变异区包括251-258、383-406、434-446及475-480位氨基酸。其中两个与公认的高变异区(383-408、475-480)相对应。
丙型肝炎病毒(, HCV), ,, 分子克隆,, 核苷酸序列
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李刚, 廖家杰, 马会慧, 梁英杰, 姚集鲁, 姚春斓, 苏永洪, 汤文辉, 崇雨田, 陈青
中华微生物学和免疫学杂志,1999,19(3):206~210,-0001,():
-1年11月30日
目的 了解华南地区庚型肝炎病毒(HGV)的流行状况及HGV不同株和不同基因区的同源性。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术(RT 2PCR) 检测来自广东、香港、云南的不同人群血清标本共1991份。对其中20份的5'端非编码区(5'U TR)238bp和3份非结构蛋白5区(N S5)621bp进行了序列测定和同源性分析。结果 一般人群HGV RNA阳性率为(0173~1134)%,献血员(2152~2190)%,静脉吸毒者17186%,血液透析患者14113%,接受骨髓移植者41167%,在非甲~ 戊型肝炎病人为25130%,肝细胞癌14148%,乙型肝炎7122%,丙型肝炎(8133~16113)%。不同株5'U TR 同源性介乎(90140~100)%;不同株N S5区核苷酸同源性(93130~94100)%,氨基酸为(97~9912)%。结论 接受骨髓移植、血液透析、静脉吸毒者,乙型、丙型、非甲~戊型肝炎病人及肝细胞癌患者是HGV的高感染人群。不同HGV株存在一定的地区性差异;同一地区不同人群的HGV 株变异不明显;序列中存在高度保守区及较大变异区。
庚型肝炎病毒, 聚合酶链反应, DNA序列分析, 同源性
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李刚, 姚集鲁
中华医学杂志,2001,81(1):61~62,-0001,():
-1年11月30日
目前公认对丙型肝炎治疗有效的药物是干扰素,其最终疗效亦只有20%左右。影响干扰素疗效的因素是多方面的[1],其中位于丙型肝炎病毒(HCV) 非结构蛋白NS5A 的第2209 至2248 位氨基酸序列与干扰素疗效密切相关,该区域称为干扰素敏感决定区( ISDR) [2,3 ] 。干扰素的抗HCV作用机理并不完全清楚,有报道认为干扰素诱导的细胞内抗病毒作用部分是由干扰素诱导的RNA 蛋白激酶( PKR) 介导的[4,5 ] 。我们构建了含不同ISDR 的基因“盒”,在体外表达相应的蛋白质, 探讨它们与PKR 的关系,试图从分子水平了解HCV 对干扰素的耐受机制。
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李刚, 陈雪娟, 陈文思, 代志琰, 张天托②, 杨林, 崇雨田, 刘淑芳, 江元森, 姚集鲁
中国免疫学杂志,2003,19:372~374,-0001,():
-1年11月30日
目的:了解严重急性呼吸道综合征(SARS)特异性IgM和IgG抗体的变化规律。方法:采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20例SARS患者系列血清中特异性IgM和IgG抗体,系列血清包括患者发病后1周,2周,3周,4周,8周,12周所采集的样本。结果:20例患者发病后第1周IgM和IgG抗体均为阴性;第2周时16例IgM抗体阳性,17例IgG抗体阳性;第3周后所有患者IgG抗体阳性并持续至第12周,而IgM抗体阳性患者逐渐减少,至第12周时所有患者均为阴性。结论:SARS特异性IgM抗体消失较早,其存在是近期感染的标志;IgG抗体的持续存在可能是获得病后免疫力的标志。
严重急性呼吸道综合征, 传染性非典型肺炎, IgM抗体, IgG抗体
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