石建党
类固醇激素作用分子机制。
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- 姓名:石建党
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学术头衔:
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学科领域:
生物化学
- 研究兴趣:类固醇激素作用分子机制。
石建党,男,2002年7月毕业于中国天津医科大学分子病毒学专业,获博士学位。现任副研究员。1990.09 ~ 1994.07在南开大学生物系生物化学专业学习;1994.07 ~ 1999.09在天津医科大学分子生物学中心实验室任助教,承担天津医科大学博士、硕士研究生《医学分子生物学实验技术》部分课程;1996.09 ~ 1999.07在天津医科大学生化与分子生物学专业攻读硕士研究生学位;1999.09 ~ 2002.07攻读天津医科大学分子病毒学专业博士研究生学位;2002.11 ~ 2005.01在南开大学分子生物学研究所做博士后研究;2004.08 ~ 2004.11 受“天津市优秀博士后赴欧洲开展合作研究”项目资助,在德国卡尔斯鲁厄研究中心学习,主要内容为“类固醇激素的快速反应”;2005年至今在南开大学生命科学学院任教师。目前的主要研究方向为:类固醇激素作用分子机制。
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【期刊论文】BPH-1通过分泌PGE2上调前列腺间质细胞ERRα的表达
石建党, 苗琳), 石建党), 周颖), 杜小玲), 吴荃), 王克明), 张琚)
中国生物化学与分子生物学报,2008,24(8):742~747,-0001,():
-1年11月30日
雌激素受体相关受体a(estrogen receptor-related receptor a,ERRa)是一类可以直接或间接参与雌激素应答反应的孤儿核受体,它与雌激素受体(estrogen receptor,ER)在结构上有很强的同源性。雌激素效应在良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasis,BPH)的发生和发展中起着重要的作用。通常,孤儿核受体的转录活性多受一些非经典激素如维生素A衍生物、前列腺素类、固醇的调控。本文研究前列腺上皮细胞分泌的活性因子对间质细胞ERRa表达调控的分子机制。收集前列腺增生上皮细胞系BPH-1和前列腺癌上皮细胞系DU-145的条件培养(condition medium,CM)培养间质细胞,采用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测前列腺间质细胞(prostatic sfromal cells,PrSC)中ERRα的表达,筛选CM中影响ERRa表达的活性因子。研究结果显示,BPH-1的CM可以上调ERRα的表达,而DU-145的CM对ERRα的表达没有影响;BPH-1中合成前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的限速酶--环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的mRNA表达水平和PGE2的分泌水平明显高于DU-145中COX-2表达水平和PGE2分泌水平;用经添加COX-2抑制剂NS-398的培养液处理BPH-l,其CM中PGE2的浓度明显下降,并失去了对ERRa表达的上调作用;添加PGE2可上调间质细胞中ERRa的表达。结果表明,BPH-1通过分泌PGE2促进间质细胞ERRa的表达,提示:在良性前列腺增生的发生和发展中,上皮细胞的旁分泌作用可促进间质细胞由ERRα介导的雌激素效应。
雌激素受体相关受体a(, ERRa), , 良性前列腺增生, 上皮,, 间质相互作用, 前列腺素E2
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石建党, 于林, 王春雨, 杨睿, 王亮, 张琚
南开大学学报(自然科学版),2008,41(4):55~58,-0001,():
-1年11月30日
从前列腺中提取总RNA,RT-PCR获得Erβ基因,将其联人pEGFP载体,得到重组质粒pEGFP-Erβ,再将上述质粒的GFP-Erβ融合蛋白,用Western Blot鉴定纯化的融合的免疫原性。用纯化的蛋白转导事先转染ERE-Luc报道质粒的Hela细胞,用Luciferase Assay鉴定转导蛋白的生物学活性。证明TAT-GFP-Erβ蛋白具有完整的生物活性。
TAT, 蛋白转导, 原核表达, 雌激素受体β
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【期刊论文】TGFβ1介导雌二醇对前列腺间质细胞smoothelin表达的促进作用
石建党, 吴荃, 张智松, 周颖, 张琚
南开大学学报(自然科学版),2007,40(2):57~61,-0001,():
-1年11月30日
研究了雌激素在促进前列腺基质细胞化过程中作用的分子机制.在前列腺基质细胞培养液中分别添加TGFβ1,雌二醇、雌二醇和ICll82.780、睾酮、睾酮和芳香化酶抑制剂、双氢睾酮、雌二醇和TGFβ1中和抗体;用半定量RT—PCR的方法检测基质细胞中平滑肌细胞特异蛋白smoothelin和TGFβ1 mRNA的表达水平;用ELISA测定基质细胞培养基中TGFβ1的浓度.结果显示TGFβ1可明显促进smoothelin的表达;雌二醇和睾酮能明显刺激TGFβ1基因和蛋白的表达水平,而雌激素受体抑制剂ICll82.780和芳香化酶抑制剂可分别抑制雌二醇和睾酮对TGFβ1表达的促进作用;双氢睾酮对TGFβ1基因的表达没有影响.TGFβ1中和抗体能抑制雌二醇对smoothelin的促表达作用.结果显示雌二醇可能通过诱导TGFβ1促进前列腺平滑肌细胞特异蛋白smoothelin的表达.
良性前列腺增生, 雌二醇, 转化生长因子β1, smoothelin
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【期刊论文】含有肌球蛋白重链启动子的p-EGFP1质粒的构建
石建党, 程勇, 张琚, 刘建明
南开大学学报(自然科学版),2004,37(1):75~78,-0001,():
-1年11月30日
从前列腺组织中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增得到肌球蛋白启动子,将扩增片段和处理好的p-EGFP1载体相连,连接产物转人到大肠杆菌HB101中,经筛选得到连有myosin启动子的p-EGFP1重组质粒。用酶切和PCR的方法对重组质粒进行鉴定,成功构建的质粒可用于前列腺平滑肌细胞和成纤维细胞的分离,这将对于阐明前列腺基质增生的机理起到重要作用。
前列腺增生, p-EGFP1质粒, 平滑肌细胞, 成纤维细胞
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【期刊论文】基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在人前列腺组织及各种类型前列腺细胞中的表达*
石建党, 张立国, 张琚, 赵洪
中国病理生理杂志,2005,21(6):1106~1110,-0001,():
-1年11月30日
目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)在人前列腺组织及各种类型细胞中的表达。方法:用半定量RT-PCR的方法,对癌变和非癌变部分的前列腺组织、原代培养的平滑肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞以及4种前列腺上皮细胞系(BPH-1、LNCaP、DU-145和PC-3)中MMP2、MMP7和MMP9、膜型基质金属蛋白酶1和3(MT1-MMP和MT3-MMP)及其组织抑制因子1和2(TIMP-1和TIMP-2)的mRNA水平进行了测定。结果:MMP-2主要在前列腺基质细胞中表达;MMP-7和MMP-9则在前列腺上皮细胞中有较高的表达;MT1-MMP、MT3-MMP、TIMP-1在前列腺基质细胞和上皮细胞中均有表达,但MT1-MMP和MT3-MMP在成纤维细胞中的表达量较高;另外,各种基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在各种前列腺细胞系中也存在差异表达。结论MMPs和TIMPs在前列腺组织及其各种类型细胞中的差异表达提示:它们可能在前列腺癌的转移中起着不同的作用。
基质金属蛋白酶类, 前列腺, 上皮细胞, 间质细胞
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石建党, 李江峰, 杨洪波, 王克明, 吴荃, 张琚
中国病理生理杂志,2005,21(4):817~819,-0001,():
-1年11月30日
目的:探讨良性前列腺基质增生组织中细胞增殖及凋亡状态的改变。方法:采用双抗体免疫组化方法,对6例良性前列腺增生和4例正常前列腺组织标本中平滑肌细胞的增殖状态进行研究;采用免疫组化和TUNEL相结合的方法,在连续的组织切片上观察基质细胞凋亡状态的变化。结果:在增生的前列腺组织中,处于增殖状态的平滑肌细胞比例远远高于正常前列腺组织,处于凋亡状态的基质细胞比例低于正常前列腺组织。结论:良性前列腺增生组织中,平滑肌细胞的增殖增加和基质细胞的凋亡减少同时发生。
前列腺增生, 平滑肌细胞, 增殖, 细胞凋亡
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【期刊论文】前列腺增生组织中间质细胞增殖和表型转化与雌激素受体α表达的关系
石建党, 周颖, 杨睿, 刘杰, 杜小玲, 王克明, 张琚
解剖学报,2008,39(5):666~669,-0001,():
-1年11月30日
目的比较人正常前列腺(NP)和前列腺增生(BPH)中间质细胞标记蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)和雌激素受体α(ERα)的表达差异,并检测.BPH组织间质细胞标记蛋白与PCNA或ERα同时呈阳性染色的细胞。方法对4例NP和8例BPH连续切片应用免疫组织化学方法,观察波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肌球蛋白(myosin)、PCNA和ERα的表达定位。结果与NP相比在BPH中,α-SMA阳性染色细胞显著增加;波形蛋白在间质中阳性染色细胞有所增加,在腺泡基底层及临近腺泡外层间质中阳性染色细胞明显增加;在临近腺泡外的数层间质细胞中肌球蛋白和ERα由部分阳性变为完全阴性染色,而在远离腺泡的间质中其阳性染色细胞由散在斑块状分布变为簇状密集排列;PCNA在间质中阳性染色细胞有所增加,在基底细胞层中阳性染色细胞显著增加。连续切片免疫组织化学染色显示,在腺泡上皮基底层存在PCNA与波形蛋白、ERα共定位的细胞;在间质中存在肌球蛋白与ERα共定位的细胞。结论与NP相比,BPH间质细胞表型发生明显变化,且其增殖和表型转化与ERα表达定位的改变密切相关。
前列腺增生, 间质细胞标记蛋白, 增殖细胞核抗原, 雌激素受体α, 免疫组织化学, 人
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【期刊论文】染色质免疫沉淀技术在研究DNA与蛋白质相互作用中的应用
石建党, 王春雨, 朱彦, , 张琚
遗传,2005,27(5):801~807,-0001,():
-1年11月30日
在后基因组时代,DNA-蛋白质的相互作用是研究基因表达调控的一个重要领域。与其他方法相比,染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprec_pitation assay,ChIP)是一种在体内研究DNA-蛋白质相互作用的理想的方法。近年来这种方法与DNA芯片和分子克隆技术相结合,可用于高通量的筛选已知蛋白因子的未知DNA靶点和研究反式作用因子在整个基因组上的分布情况,这将有助于深入理解DNA-蛋白质相互作用的调控网络。总结了染色质免疫沉淀技术的方法,特别介绍了使用这些方法取得的最新进展。
DNA.蛋白质相互作用, 染色质免疫沉淀技术(, ChIP), , DNA芯片, ChIP-克隆
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【期刊论文】新基因BP1抗体制备及其在乳腺癌表达的初步观察*
石建党, 李玉皓, 张新, 王德发
南开大学学报(自然科学版),2006,39(4):79~82,-0001,():
-1年11月30日
为了探讨新同源盒基因BP1在乳腺癌的表达,运用生物信息学方法设计19肽,合成并偶联到大分子载体KLH上制成人工免疫原,制备兔抗BP1多克隆抗体IgG. 蛋白印迹方法检测BP1在乳腺癌细胞系MCF7、MDA-MB-231细胞均有表达:免疫组织化学结果显示,BP1蛋白在乳腺癌的表达率显著高于癌旁组织,在雌激素受体阴性肿瘤的表达率高于雌激素受体阳性组。BP1基因的异常表达参与了乳腺癌的发生,是一种新的乳腺癌分子标志物。
乳腺癌, BP1, 蛋白印迹, 免疫组化
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【期刊论文】一株致普通棉耳狨猴严重下呼吸道感染的副粘病毒种系进化分析
石建党, 李梅, 石立莹, 李晓眠, 张国际, 秦宇, 袁立军
中华微生物学和免疫学杂志,2007,27(7):603~606,-0001,():
-1年11月30日
目的探讨副粘病毒Tianjin株的种系进化地位。方法将副粘病毒Tanjiin株HN核苷酸、氨基酸序列与GenBank发布的副粘病毒相应序列进行比较,构建种系进化树,阐明副粘病毒Tianjin株在副粘病毒科中的分类地位。结果基于HN核苷酸序列的种系进化分析表明,副粘病毒Tianjin株属于副粘病毒科、副粘病毒亚科、呼吸道病毒属,与仙台病毒亲缘关系最近。Tianjin株与仙台病毒BB1株HN核苷酸、氨基酸序列同源性分别为94.8%、95.1%,与其他仙台病毒,在84.8%~88.7%和89.6%-91.7%之间。Tianjin株与BBl株HN核苷酸序列的差异明显大于同一进化分支内的仙台病毒之间的差异。Tianjin株HN蛋白存在18个独特的氨基酸残基变异。结论结合种系进化分析结果、病毒的宿主来源和致病特点,提示副粘病毒Tianjin株不属于仙台病毒现有的3个进化分支而自成独立的一支。
副粘病毒, 仙台病毒, HN序列, 种系进化分析
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