The function and usage of vMIPα encoded by K6 gene of herpesvirus 8 (HHV8) which has homology with human macrophage protein (MIP) have not been clearly known. In the present note the K6 gene of HHV8 was cloned and transfected into NIH3T3 cells and E. coli cells. Condi-tional media from the 3T3-transfected cells and K6 product vMIPα from E. coli. Cells were used to perform the experi-ments of ligand-receptor binding and cellular adhesion with peripheral blood macrophages. The conditional media and the purified vMIPα from E. coli could compete to bind to CCR5 located on macrophages from peripheral blood with 125 I-hMIP-1α chemokine of human. Cellular adhesion showed that the conditional media from transfected cells and the purified vMIPα did not induce the adhesion of mac-rophages from peripheral blood to ICAM-1. In conclusion, vMIPα encoded by K6 gene of HHV8 can bind to CCR5 of peripheral blood macrophage cells and does not induce their adhesion. This suggests that vMIPα enclosed CCR5, also known as HIV co-receptor, may be used to prevent and treat HIV infection.

目的：研究病毒基因来源的人趋化因子同源物vMIP-II的活性单链重组物在原核细胞的表达及制备方法，为大量获取单链vMIP-Ⅱ和其用于趋化因子受体封闭因子的临床应用打下基础。方法：采用双酶切定点克隆、渗透法破碎菌体，并用MBP亲和层析及重组肽段自脱离方式对表达产物进行纯化。纯化产物用SDS-PAGE蛋白印迹及抑制粘附反应等方法进行鉴定。结果：融合蛋白MBP-vMIP在原核细胞中高效分泌型表达，MBP-vMIP在体外 自断裂分离出vMIP-Ⅱ，终产物单链vMIP-Ⅱ具有结合趋化因子受体 CCR5活性。结论：vMIP-Ⅱ在原核细胞中的融合表达及终产物自脱离法可用于大量获取重组单链vMIP-Ⅱ。单链 vMIP-Ⅱ对人趋化因子受体的结合活性有可能对与此受体有关的疾病如HIV感染、慢性炎症过程有作用。

目的：构建病毒趋化因子（vMIP-Ⅱ）基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP-Ⅱ重组肽。方法：用 PCR法获得vMIP-Ⅱ基因片断，将其插入表达 载体pQE，构建重组表达载体pEh-vMIP。表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5d，用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果：阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP-II重组肽，蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符（约8×103）的诱导表达条带，其表达量约占菌体总蛋白的20%。分析表明，vMIP-Ⅱ重组肽主要以可溶性形式表达。结论：用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量 vMIP-Ⅱ的成功，为进一步研究vMIP-Ⅱ的功能及应用奠定基础 ，也为同类小分子、易降解的肽类物提供基因工程表达方法。

目的：探讨优化vMIP-II/MBP融合蛋白表达载体pMal在原核细胞中的表达条件，并对其表达产物进行纯化。方法：通过接菌、诱导表达，实验 了解诱导时不同的温度、诱导时间、IFTG浓度对蛋白表达量的影响，并进行SDS-聚丙烯酰氨凝胶（SDs-PAGE）电泳分析。结果：发现该菌在含0.3mmol/L IFrG的TB培养基中，28诱导表达4h，可使诱导蛋白表达量占菌体蛋白总量的10%。结论：vMIP-II/MBP的表达受温度条件影响较大，低温诱导时表达水平较高。从而为该工程菌的中试提供了实验基础。

目的：了解重组病毒趋化因子vMIP作用前后及内毒素刺激后细胞内细胞因子IL-4和IFN-γ水平的变化，探讨vMIP对免疫功能的影响。方法：通过放射性配体一受体结合实验、ELISA法及流式CD4+T细胞的细胞内染色法检测外周血单个核细胞的培养上清IL-12水平及细胞内细胞因子IFN-γ及IL-4分泌水平的变化。结果：通过竞争结合细胞膜表面趋化因子受体，vMIP-II可减缓高浓度LPS引起的爆发式细胞因子IL-12、IFN-γ产生；vMIP可促进IL-12、IFN-γ和11-4分泌。结论：病毒趋化因子vMIP-II可调节CD4+T细胞分泌IFN-γ和IL-4，从而下调过激的炎症反应，并对感染性休克可能有拮抗作用。

背景与目的：CXCR4-SDF-1α体系在乳腺癌靶向转移中具有重要作用，已证明多种CXCR4拮抗剂对乳腺癌转移有抑制作用本研究拟探讨作为CXCR4封闭因子的病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ（viral macrophage inflammatory protein-II。vMIP-Ⅱ）对乳腺癌细胞株MCF-7转移相关因素的影响方法：MTT法检测不同浓度v MIP-Ⅱ刺激下MCF-7的增殖效应；软琼脂集落形成实验评价克隆形成率；粘附和趋化实验观察vMIP-Ⅱ不同转移阶段MCF-7细胞的作用结果：（1）系列浓度的vMIP-Ⅱ处理细胞72h后，细胞没有表现出增殖效应（P>0.05）（2）vMIP-Ⅱ以浓度依赖的方式抑制细胞集落的形成，50、100、500和1000ng/ml vMIP-Ⅱ作用后，细胞的琼脂集落抑制率在18.2%-54.6%之间（3）经300ng/ml的vMIP-II处理不同时间（0min、30min、2h和6h）后，细胞在2h对纤维连接素（FN）和Matrigt-I的粘附都达到了抑制高峰（4）在趋化实验中，500ng/ml vMIP-II组穿膜细胞数（24±10）比对照组（60±9）要低（p<0.05）结论：MCF-7的克隆形成率与vMIP-Ⅱ的刺激浓度呈负相关、rMIP-II能降低MCF-7对FN和Matrigel的粘附和有效抑制MCF-7对人肺蛋白粗提物的靶向性趋化作用

研究重组病毒巨噬细胞炎性蛋白（rvMIP）的致畸胎和致细胞染色体损伤作用。方法：采用大鼠致畸胎、小鼠骨髓微核实验。结果：不同浓度的rvMIP实验组SD大鼠母鼠的畸胎率分别为29%，17%和25%，胎鼠总畸形率分别为3.1%，2.5%和1.6%。NIH小鼠骨髓微核率在给药后24 h雌鼠分别为1.50，1.00和1.00，嗜多染红细胞与正染红细胞比值（PCE/NCE）分别为0.4，0.4和0.5，雄鼠分别为1.33，1.33和1.67，PCE/NCE比值分别为0.6，0.5和0.5。给药后48 h的微核率雌鼠分别为2.00，1.33和1.33，PCE/NCE比值分别为0.5，0.5和0.5，雄鼠分别为1.50，2.00和1.00，PCE/NCE比值分别为0.3，0.4和0.5。各项检测指标在实验组与阴性对照组之间差别没有显著意义，P>0.05：在实验组与阳性对照组之间差别有非常显著意义，P<0.01。结论：在本实验条件下，rvMIP没有致畸胎和细胞染色体损伤作用。