目的 构建趋化因子受体CXCR4shRNA质粒重组体，并进行序列分析，为下一步探索肿瘤基因治疗的新途径打好基础。方法 设计有小发夹结构的两条DNA序列。经退火成互补双链，再克隆至Psilencer2. 1-U6 neo质粒栽体中构建重组体，转化DH5a菌株，提取质粒行酶切鉴定后，进行测序分析。结果 成功构建了CXCR4hRNA质粒重组体。结论 CXCR4 shRNA质粒重组体的成功构建为研究CXCR4靶向RNA干扰抗肿瘤的作用打下基础。

目的 探讨癌基因c-raf-1的反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 设立c-raf-1正义寡核苷酸组和非处理组（仅加入等量的脂质体，作对照，用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后c-raf-1表达水平的变化。用平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-raf-1反义寡核苷酸作用前后受60C0γ射线不同剂量照射后的集落形成率。结果 c-raf-1反义寡核苷酸能抑制c-raf-1癌基因的表达，经脂质体介导的c-raf-1反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降（P<O.01），而转染c-raf-l正义寡核苷酸组的集落形成率与单纯照射组相比无明显差异（P>0.05）。结论 c-raf-l反义寡核苷酸通过抑制c-raf-1的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-raf-1反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。

背景与目的：针对c-erbB2与c-raf-1单基因的反义寡脱氧核苷酸（antisense oligodexynucleotide，ASODN）治疗肿瘤的研究报道很多，这些研究往往局限单个基因或细胞水平，从肿瘤发生的多基因学说上是不恰当的。本研究旨在探讨c-erbB-2与c-raf-1基因联事ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用，方法：在BALB/c裸鼠上建立卵巢上皮癌模型，然后随机分成阴性对照组和6个实验组（分别为脂质体c-erbB-2 SODN组、脂质体c-raf-1 SODN组、脂质体c-erbB-2 ASODN组、脂质体c-raf-1 ASODN组、全剂量联合反义给药组、半剂量联合反义给药组）。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化、计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果：给药后，全剂量联合反义给义给药组与半剂量联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率分别为72.5%和78.4%，肿瘤重量抑瘤率分别为70.7%和75.3%，肿瘤缩小率分别为29.7%和41.6%。在给药后，各组裸鼠体重变化无明显统计学差别。结论：C-erbB2与c-raf-1基因联合ASOD在体内能明显地抑制肿瘤生长。

[目的]探讨癌基因e-raf-1的反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞受照后Ki-67表达的影响。[方法]设立e-raf-1正义寡核苷酸组和非处理组（仅加入等量的脂质体）作对照，用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后e-raf-1表达水平的变化，用免疫组化技术检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体-e-raf-1反义寡核苷酸作用前后受60COγ射线照射后细胞Ki-67的表达情况。[结果]e-raf-1反义寡核苷酸能抑制e-raf-1癌基因的表达，经脂质体介导的e-raf-1反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其Ki-67表达较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下调，而转染e-raf-1正义寡核苷酸组和单纯照射组相比无明显差异。[结论]e-raf-1反义寡核苷酸通过抑制e-raf-1的表达降低人卵癌细胞株SKOV3受照射后的增殖能力。该作用可能与e-raf-1反义寡核苷酸抑制了引起肿瘤细胞辐射抗拒的细胞信号传导途径有关。

背景与目的：探讨新抑癌基因KAII与全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid. ATRA）对小细胞肺癌NCI-H446细胞株抑制增殖和诱导分化的作用。材料与方法：用脂质体介导的基因转染方法，借助质粒表达载体（PCMV-NEO-XhoI），将抑癌基因KM1转入小细胞肺癌NCI-H446细胞中，经G418筛选，获得稳定表达的细胞克隆。用10-6mol/L ATRA作用于转染及未转染KAII基因的小细胞肺癌NCI-H446细胞株，集落形成率检测细胞体外增殖能力，流式细胞仪进行细胞周期和凋亡分析，间接免疫荧光染色结合流式细胞仪检测转染前后细胞CD82蛋白的表达 免疫组化测定MYC的表达，放射免疫测定LN（层连蛋白）表达。结果：ATRA处理脂质体-KAII基因转染的小细胞肺癌细胞CD82表达降低，细胞增殖能力下降，凋亡增加，更多的细胞被阻止于G1/G0期，MYC及LN表达下降。结论：抑癌基因KAII与ATRA对抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞株的增殖和促分化有协同作用。

报道反义探针99Tcm -EC-ASODN 的合成和标记。将次乙酰双半胱氨酸（L，L-ethylene dicysteine，EC）与反义寡脱氧核苷酸（Antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）进行偶联，形成复合物EC-ASODN，通过核磁共振图谱（1H-NMR）、红外图谱（IR）、紫外（A260）吸收和电泳，鉴定EC-ASODN 复合物的结构。用锝（99Tcm）标记EC-ASODN，通过薄层层析评价99Tcm-EC-ASODN 的标记率、放化纯和稳定性。结果显示，1H-NMR、IR 谱图、紫外吸收和电泳都证实EC 与ASODN 联结形成EC-ASODN，99Tcm -EC-ASODN 的标记率为77.28%，放化纯为97.52%，Rf=0.95-1，4h 内具有很好的稳定性。结论：EC 与ASODN 能形成稳定的复合物EC-ASODN，用99Tcm 标记，方法简便，能得到标记率高和稳定性好的反义探针。