目的 探讨反义c-jun寡核苷酸（ODN）转染体外培养成纤维细胞后，对中波紫外线（U-VB）辐射诱导基质金属蛋白酶（MMP）表达的抑制作用。方法 用蛋白印迹法测定UVB辐射后，成纤维细胞原癌基因c-jun和c-fos的蛋白c-jun和c-fos的表达变化；用RT-PCR方法测定c-jun反义ODN转染后，其mRNA的表达变化。用ELlSA方法测定c-jun反义ODN转染后，对UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3的合成变化。结果 不同剂量UVB（IO、20、30 mJ/cm2）辐射成纤维细胞，均可诱导c-jun蛋白表达显著增加，分别为未辐射对照组的1.8、2.6、3.3倍；而c-fos的表达未见显著变化。UVB辐射还可以显著增加pro-MMP-1和MMP-3的合成。不同浓度c-jun反义ODN转染成纤维细胞后，均可以抑制UVB诱导的c-jun mRNA表达；对UVB诱导的pro-MMP-I和MMP-3合成具有显著抑制作用。经统计学分析，差异有显著性（P<0.01）。结论 UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3表达可以由c-jun介导；c-jun反义ODN可以抑制pro-MMP-1和MMP-3的合成。

目的 探讨湿疹和特应性皮炎（AD）皮损处的细菌学特点及金黄色葡萄球菌（金葡菌）在湿疹及AD发病中的作用。方法 多中心随机双盲对207例湿疹患者和119例AD患者皮损及非皮损处取材做细菌培养，并对所分离到的金葡菌进行常规药敏试验和噬菌体分型。结果 1207例湿疹患者皮损处的细菌检出阳性率、金葡菌的比例及定植均明显高于非皮损处，差异有显著性（P<0．Ol）。119例AD患者皮损处的细菌检出阳性率及金葡菌的定植明显高于非皮损处，差异有显著性。对分离到的141株金葡菌进行噬菌体分型。l组占6.3%，Ⅱ组占7.0%，Ⅲ组占3.5%，V组占0.7%，杂组占1.4%．不能分型占56%，MRSA分型噬菌体26株混合组占6.3%。药敏试验结果表明：在常用的6种外用抗菌药物中莫匹罗星对金葡菌和表皮葡萄球菌的抗菌活性最强，其MIC范围、MIC90和MIC50是6种抗菌药物中最低的。且莫匹罗星对金葡菌及其中的各噬菌体分型和表皮葡萄球菌中的耐甲氧西林和耐甲氧西林凝固酶阴性菌株也有较好的抑菌能力。结论 湿疹和AD的发病与细菌感染密切相关，其中金葡菌是最重要的细菌，对湿疹和AD患者外用药治疗合并使用外用抗菌药物是必要的，根据对金葡菌抗菌活性的测定，莫匹罗星的效果较好。

目的：从尖锐湿疣（CA）标本中克隆出人乳头瘤病毒11型（HPV 11）早期蛋白E6、E7基因，并进行序列测定及编码氨基酸序列分析，为HPV感染的检测和基因工程疫苗研究奠定基础。方法：用PCR法，从CA标本中扩增出HPVII E6、E7基因，与载体pGEX-6P-1连接成重组质粒pGEX-6P-1，E6、pCEX-6P-1，E7，酶切鉴定及双脱氧法测序观察其变异状况。结果：克隆出HPV11早期蛋白E6、E7基因，成功构建重组质粒pGEX-6P-l/E6、pGEX-6P- W7。本研究克隆出的HPVII E7基因与GenBank标准株序列完全相同，E6基因有两个位点的变化。结论：本研究克隆出的HPVlI E6、E7基因与标准株基蔫相同，这将为进一步研究E6、F7基因的表达、免疫活性及流行病学奠定基础。

目的：探讨角质形成细胞（KC）增生行为与p16INK4a蛋白表达及其基因失活的相关性。方法：对20例皮肤鳞状细胞癌、24例基底细胞癌、18例Bowen病、12例光线性角化病以及8例脂溢性角化病共计82例患者中具不同增生行为的KC，分别应用免疫组化检测其p16INK4a蛋白表达；应用聚合酶链反应（PCR）、PCR-单链构象多态性以及PCR-限制性内切酶分析方法分别检测p16INK4a基因外显子1和外显子2的缺失、突变和甲基化。结果：p16INK4a蛋白表达的阳性率和表达强度随着KC恶性程度的增加而降低，基因缺失和甲基化是皮肤癌pl 6INK4a基因失活的主要方式，p16IIWAa蛋白失表达与其基因失活是一致的。结论：p16INK4a基因失活在KC恶性转化中起重要作用；p16Ira基因有可能成为皮肤癌诊断与治疗的一种新靶位。

目的 构建人乳头瘤病毒11型（HPV 11）E7蛋白基因腺病毒载体，并在真核细胞表达。方法 用PCR法，扩增出HPV11 E7基因，定向克隆至pENTR-TOPO载体形成重组质粒TOPO -E7。TOPO-E7与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DEST™重组反应，E7基因被重组到腺病毒载体上。该载体经Pacl酶切，脂质体法转染人胚肾293A细胞，获得重组腺病毒载体pAD-E7。pAD-E7转染人HaCaT细胞，激光共聚焦显微镜分析E7蛋白表达情况。结果 经酶切及序列分析鉴定，重组质粒TOPO -E7成功构建。重组子pAD-E7转染293A细胞后，获得滴度为1.4×107 pfu/mL的重组腺病毒载体。该载体转染HaCaT细胞，48 h后激光共聚焦显微镜下可见细胞内E7蛋白表达。结论 重组腺病毒载体能有效介导HPV11 E7基因在真核细胞的表达。

目的 探讨自体血清皮肤试验阳性的慢性荨麻疹患者的临床特点。方法 从82例慢性荨麻疹患者中筛选出29例自体血清皮肤试验阳性患者，对其症状体征及病史等进行分析，并用放免法测定其血清中的抗甲状腺球蛋白抗体（TG-AB）和抗甲状腺微粒体抗体（TM-AB），与自体血清皮肤试验阴性的慢性荨麻疹患者进行对比。结果 自体血清皮肤试验阳性与阴性的慢性荨麻疹患者在年龄分布、病程上差异无统计学意义（P>0 05）。两组患者症状体征评分比较，自体血清皮肤试验阳性患者皮疹发作时风团较大（P<0.05），数量较多（P<0.01），每次发作持续时间较长（P<0.05），瘙痒更剧烈（P<0.05）；但风团外观较红，隆起不明显（P<0.01）；而两组患者的皮疹发作频次差异无统计学意义（P>0.05）。自体血清皮肤试验阳性的慢性荨麻疹患者伴发血管神经性水肿及系统症状的比例较高，伴随其他自身免疫相关疾病和甲状腺抗体阳性的比例也明显高于自体血清皮肤试验阴性患者（P<0.05）。结论 自体血清皮肤试验阳性的慢性荨麻疹多表现为较严重的慢性荨麻疹。

目的：克隆人高亲和力IgE受体а链基因，并进行原核表达，制备出可溶性FceRIa蛋白。方法：应用RT - PCR技术，从皮肤组织的总RNA中扩增人高亲和力IgE受体a链基因，连接至PUCm-T载体，重组克隆进行DNA测序。将测序证实的目的片段与高效表达载体pFI30a连接，构建重组质粒并转入表达宿主菌BI21（DE3），以IPTG诱导表达，Ni- NTA树脂柱亲和层析纯化。结果：RT-PCR扩增出一个约950 bp的DNA片段，测序结果显示该片段与GenBank上登录的FceRla基因序列完全一致；经原核表达后，获得相对分子质量37 000的FceRIa融合蛋白。结论：本实验成功克隆、表达了人FcRla基因，制备出可溶性FceRla蛋白，为抗FceRIa抗体的检测及自身免疫性慢性荨麻疹发病机制的研究提供了条件。