目的 探讨姜黄素对兔视网膜色素上皮（RPE）细胞增生的抑制作用及其作用机制。 方法 选取第4代RPE细胞进行实验，分为姜黄素组和空白对照组，姜黄素组设l0、15、20μg/ml3个质量浓度。噻唑蓝比色（MTT）法检测姜黄素10、15、20μg/m1分别在24、48、72、96 h对体外培养的RPE细胞增生的抑制率。线性回归分析计算各时间段的半数抑制率（ICS）剂量。流式细胞仪（FMC）检测姜黄素15μg/ml作用72 h后对RPE细胞周期的影响，并且检测姜黄素15/2μg/ml作用24、48，72h后RPE细胞增生细胞核抗原（PCNA）的表达量和凋亡率。透射电子显微镜进行RPE细胞形态学检测。 结果 姜黄素24、48、72、96 h的IC50分别是29.31、17.50、13.24、10.99μg/ml。姜黄素使RPE细胞阻滞在G0/G1期。姜黄素15μg/ml作用24、48、72h后，RPE细胞的PCN人表达量分别为（565.04±23.60），（473.61±36.88），（396.15±32.45），凋亡率分别为（12.83±0.13）%，（32.27±4.51）%，（56.81±8.67）%，各浓度组与对照组相比，差异均有统计学意义（P<0.05）。透射电子显微镜显示RPE细胞出现凋亡特征。 结论 姜黄素可以影响RPE细胞的PCNA合成，诱导其凋亡，从而有效抑制RPE细胞增生。姜黄索有望成为一种有效的防治PVR的天然药物。

目的 探讨姜黄素对兔视网膜色素上皮细胞（R1）E）DNA含量（凋亡率）、线粒体膜电位（△Ψm）和胞质内钙离子（Ca+）的影响。方法 实验研究。选取体外培养的第4代RPE细胞进行试验，分为姜黄素组和空白对照组（10%FBS-DMEM含二甲基业砜0.5%），姜黄素组设10、15、20mg/L 3个质量浓度。噻唑蓝（M1TI'）法检测姜黄素10、15、20 mg/L 3个质量浓度分别作用24、48、72及96 h后对体外培养的RPE细胞增殖72及96 h后对体外培养的RPE细胞增殖的抑制率。相关回归分析计算24、48、72及96 h的半数抑制率（ICso）剂量。流式细胞仪检测姜黄素15 ms/L作用8、24、48及72 h，后RPE细胞DNA含量（凋亡率）、△Ψm和胞质内ca+的变化。对抑制率分别在同浓度不同时间组间、旧时间不同浓度组间进行方差分析（多个样本问两两比较）；采用相关回归分析计算姜黄素各时间段半数抑制率剂最；对凋亡率、线体△Ψm、细胞质内ca+等对照组与姜黄素组间进行两独市样本￡检验；对凋亡率、线粒体△Ψm、细胞质内ca+等姜黄素不同时『BJ组问进行方差分析（多个样本间两两比较）。结果姜黄素对RPE细胞有明显抑制作用，呈时间和剂量依赖件。姜黄素在24、48、72及96h对RPE细胞的Ic50分别是29.31、17.50、13.24及10.99mg/’L。姜黄素作用8、24、48、72h后，细胞质内Ca2+浓度明显升高与空白对照组相比，差异有统计学意义（t=7.50，10.61，20.74，21.14；P<0.01）△Ψm 明显下降，与对照组相比均有统计学意义（t<7.50，11.74，14.91，15.29；P<0.01）。姜黄素作用8 h DNA含量未见明显下降，24、48及72 h DNA含量明显下降（即凋亡率升高），与卒自对照组相比均有统计学意义（t=10.00，14.68，13.68；p<0.01）。结论姜黄素可以使RPE细胞质内ca+浓度升高，△Ψm下降，进而使DNA含量明昆下降，诱导RPE细胞凋亡。姜黄素可以有效抑制RPE细胞增殖，有单成为防治增牛性玻璃体视网膜病变的理想天然药物。

目的 分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮（RPE）细胞进行体外分离、培养和鉴定，探讨二者的异I司点及注意事项。方法 对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代，取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细胞进行鉴定。光学显微镜F观察并比较培养的2种动物来源RPE细胞的形态、特征，并对2种动物来源的RPE细胞的培养过程进行比较。结果 2种动物来源的RPE细胞分离片法的不同与各自眼球的解剖结构相关，主要体现在消化过程，猪眼RPE细胞1次消化即可分离，兔眼RPE细胞需2次消化得到。原代猪眼RPE细胞24 h内贴壁较兔眼48～72 h贴壁时间。培养早期细胞生长活跃，随传代次数增加活力下降，色素颗粒减少。免疫细胞化学染色提示细胞角蛋白（AEl/AEl3）表达阳性。结论 2种动物来源的RPE细胞均可通过胰蛋白酶消化法分离，获得的RPE细胞数量多，培养成功率高。猪眼RPE细胞的分离培养更为容易。4代以内的RPE细胞适合于实验研究。

目的 研究姜黄素在兔眼玻璃体内的代谢过程。方法 将36只新西兰白兔随机分为标准及质控组3只兔（6只眼）和实验组33只兔（66只眼）。实验组再随机分为11组，每组3只兔（6只眼）。标准及质控组动物无须手术操作，实验组动物穿刺抽取玻璃体0.1mL后玻璃体腔内注入姜黄素0.1mL（含0.1mg）。注药后0、1、3、7、12、24、36、48、72、96及120h分别摘除眼球并制备玻璃体待检样品。应用高效液相色谱技术（ITPC）检测玻璃体腔内药物质量浓度。用DAS软件计算主要的药代动力学参数。结果姜黄素与玻璃体内源性物质之间的色谱峰分离良好，姜黄素保留时间为4.4min。提取回收率约90%，日内和日间变异较小。玻璃体内姜黄素质量浓度在0.01-4 ug/ml范围内呈线性关系，标准曲线为y=143 973x+603.32（r=0.999 1）。在上述时间点测得的清除率分别为1.06%、4.02%、9.44%、19.77%、23.90%、35.44%、57.54%、70.63%、84.65%、91% 76%及96.34%。半衰期t1/t2=（26.68±2.66）h。 结论 HPLC法检测玻璃体内姜黄素质量浓度特异性好。姜黄素在玻璃体内半衰期较长，0.1mg注射后整个代谢过程先为零级动力学代谢，48h后为一级动力学代谢。

目的 研究苦参碱聚乳酸微球玻璃体腔注射后的药代动力学特点。方法 将30只新西兰白兔随机分为10组，每组3只兔（6只眼）。除空白组外，其余各组每只眼玻璃体腔均注入苦参碱聚乳酸微球（含苦参碱4mg）。分别在注药后10min，2h，1、3、7、14、21、28、35 d各处死l组动物取双侧眼球并制备玻璃体样本。应用高效液相色谱法检测玻璃体腔药物质量浓度，用DAs软件计算主要的药代动力学参数。 结果 玻璃体腔注入苦参碱聚乳酸微球（含苦参碱4 mg）后，药物在玻璃体内的平均滞留时间MRT=（221.64±9.70）h，半衰期t1/2=（173.77±32.33）h。缓释微球在玻璃体腔释药可达35d以上，35d时药物质量浓度为（121.8±34.6）μg/mL。随时间延长，药物的总体清除率稳定增加。结论 玻璃体腔注入苦参碱聚乳酸微球（含苦参碱4 mg），药物在眼内清除较慢，清除时间明显延长，在玻璃体腔内能够长时间维持较高的质量浓度，表现出良好的体内缓释性。

目的 观察和探讨羊膜匀浆在封闭视网膜裂孔中的作用及其机制。方法 40只新西兰白兔随机分为A、B、C、D 4组，其中A、C为治疗组，B、D为对照组，每组各10只兔。每只兔随机取1只眼进行实验。经扁平部玻璃体切割，视网膜造孔，人为造成视网膜脱离，气液交换。治疗组裂孔表面滴加0.1ml羊膜匀浆，而对照组滴加0.1 ml磷酸盐缓冲液（PBS）；术毕视网膜复位，20%SFs眼内填充。A、B组于手术后14 d处死动物，C、D组于手术后28 d处死动物，进行光学显微镜、电子显微镜和免疫组织化学染色检查。结果 手术后14 d，A组视网膜复位6只眼，占60%，B组视网膜复位2只眼，占20%（P=0.021）。手术后28 d，C组视网膜复位8只眼，占80%，D组视网膜复位3只眼，占30%（P=0.046）。各组之间视网膜复位的比例比较，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组手术后出现轻度前节炎症反应，经局部应用糖皮质激素后炎症于3～5 d消退。光学显微镜检查结果显示，治疗组应用羊膜后在视网膜裂孔边缘有多层成纤维细胞样细胞增牛，与其下脉络膜和视网膜色素上皮细胞发生粘连。对照组视网膜裂孔边缘细胞增生明显减少，视网膜不能和脉络膜形成粘连。电子显微镜检查与光学显微镜检查结果一致。成纤维细胞样细胞免疫组织化学染色显示胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性，提示裂孑L边缘增生细胞主要是视网膜胶质细胞。 结论 羊膜匀浆有助于封闭视网膜裂孔，通过刺激裂孔边缘视网膜胶质细胞增生，促进视网膜脱离复位。

目的 探讨重组B因子（CFB）小干扰RNA（SIRNA）抑制激光诱导的大鼠脉络膜新生血管（CNV）的效果。方法 采用基因重组的方法获得重组CF＆siRNA，取棕色挪威（BN）大鼠42只84只眼，用激光光凝方式建立CNV模型，随机分为尾静脉注射组、玻璃体腔注射组．视网膜下腔注射组、对照组。3种不同的注射方式组分别设有相应的空质粒注射组。除对照组外，其余各组于激光光凝后第1、3、5夭分别进行注射CFBsiRNA，尾静脉、玻璃体腔、视网膜下腔注射组的注射剂量分别为50、20、10 pg；对照组激光光凝后不给于任何干预。激光光凝前和光凝后14d分别行荧光素眼底血管造影（FFA）。根据荧光渗漏程度对各激光光斑评分来检测CNV的牛成情况；免疫组织化学法检测各组大鼠脉络膜内血管内皮生长因子（VEGF）、第Ⅷ因子的表达情况。结果 各组激光光斑荧光渗漏程度评分结果显示，CF隆siRNA尾静脉注射组与对照组相比荧光渗漏程度明显减轻（F-15.1620，P<0.05）。免疫组织化学结果显示，cF&siRNA尾静脉注射组VEGF、第Ⅷ因子的阳性表达强度在激光光凝后不同时间点之间差异无统计学意义（F-20.35，18.33；P>0.05），而与同时间点其他各组相比，明显降低（F-77.96，55.68；P<0.05）。其他各组VEGF、第Ⅷ因子的阳性表达强度在激光光凝后14 d均显著强于激光光凝后7 d（F=60.89, 61.12；P<0.05）。结论 通过下调VEGF及第Ⅷ凶子的表达水平，重组CF&siRNA能有效的抑制CNV的生成。

目的 研究羊膜对兔视网膜Mnller细胞表皮生长因子受体（EGFR）表达的影响及其机制。方法 取出生15 d新西兰白兔视网膜Miiller细胞进行原代培养及传代, 采用神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S-100进行细胞鉴定。0.25%胰蛋自酶、0.05%EDTA酶消化取第3代Mnller细胞, 实验组加0.5mL羊膜匀浆上清液继续培养12 h, 采用免疫组织化学法检测羊膜诱导和非诱导条件下兔视网膜Mnller细胞EGFR表达的变化并进行分析。 结果 培养的兔视网膜Mtiller细胞GFAP和s。100表达阳性, 透射电镜检查细胞质内可见8～10nm的中间丝。未经羊膜诱导的视网膜Mnller细胞EGFR有少量表达, 经羊膜诱导12h后, EGFR表达明显增多, 2组灰度值分别为571588.80-67.862。68和1000 352.00-98386.22, 差异有统计学意义（t=4.035, P<0.01）。结论 经羊膜诱导后可促进培养的兔视网膜Mnller细胞EGFR的表达。

目的 分析中心性浆液性脉络膜视网膜病变（CSC）患者荧光素眼底血管造影（FFA）特征。方法 回顾分析FFA确诊的598例CSC患者640只眼的临床资料。所有患者均进行视力、裂隙灯显微镜、直接检眼镜检查并采用德国海得堡眼底造影系统行绿色激光扫描眼底照相及FFA检查。观察视网膜色素上皮（RPE）渗漏点发生的部位并分析其特点，统计测量其年龄、视力、视网膜神经上皮脱离面积、RPE渗漏形态并分析其相关性。结果 渗漏灶集中发生于后极部，上方象限多于下方象限，差异有统计学意义（x2=67.13，P<0.01）；鼻侧多于颞侧象限，差异有统计学意义（20.93，P<0.01）；距中心凹距离越近渗漏灶发生频率越高，差异有统计学意义（p<212.715，P<0.01）。渗漏灶形态分析发现渗漏灶形态与年龄有关。64例≥50岁患者中微漏型35例，占该组患者的54.7%；154例35～39岁患者中扩散型82例，占该组患者的53.2%；多渗漏灶浆液性视网膜脱离面积小，单渗漏灶浆液性视网膜脱离面积大，两者差异无统计学意义（F-1.925，P>0.05）；CSC患者视力与浆液性视网膜神经上皮脱离面积呈负相关（r=0.335，P<0.01），与病程及渗漏灶距中心凹距离无相关性（0.029，-0.145；P>0.05）。结论 CSC患者FFA渗漏灶的发生有区域性差别，浆液性视网膜脱离面积与渗漏灶多少无关。

目的 评价苦参碱聚乳酸微球防治实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的效果。方法 30只新西兰白兔玻璃体腔注入成纤维细胞悬液制备PVR模型。随机分为3组，玻璃体腔分别注入载药微球（含苦参碱4 mg）、游离苦参碱（2mg）、生理盐水和空白聚乳酸微球。玻璃体腔手术操作后第1、3、7、14、21、28、35天观察跟前节炎症反应情况、玻璃体混浊程度、玻璃体腔内微球分解过程、玻璃体内增生情况及视网膜是否脱离以及脱离的程度。 结果 所有动物1周内前房有轻～中度的炎症反应，1周后消失。各组均有不同比例的动物在不同时间点发展为PVR I～Ⅲ级。视网膜脱离的发生率：游离药物组与对照组比较，除35d外，其余各时问点差异均有统计学意义（P<0.05）；载药微球组与对照组相比，各时间点差异均有统计学意义（P<0.05）；载药微球组与游离药物组比较，28d和35d时差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 苫参碱聚乳酸微球兔眼玻璃体腔注射能够有效防治实验性PVR。