Double-stranded RNA (dsRNA)-specific endonucleases belonging to RNase III classes 3 and 2 process dsRNA precursors to small interfering RNA (siRNA) or microRNA, respectively, thereby initiating and amplifying RNA silencing-based antiviral defense and gene regulation in eukaryotic cells. However, we now provide evidence that a class 1 RNase III is involved in suppression of RNA silencing. The single-stranded RNA genome of sweet potato chlorotic stunt virus (SPCSV) encodes an RNase III (RNase3) homologous to putative class 1 RNase IIIs of unknown function in rice and Arabidopsis. We show that RNase3 has dsRNA-specific endonuclease activity that enhances the RNA-silencing suppression activity of another protein (p22) encoded by SPCSV. RNase3 and p22 coexpression reduced siRNA accumulation more efficiently than p22 alone in Nicotiana benthamiana leaves expressing a strong silencing inducer (i.e., dsRNA). RNase3 did not cause intracellular silencing suppression or reduce accumulation of siRNA in the absence of p22 or enhance silencing suppression activity of a protein encoded by a heterologous virus. No other known RNA virus encodes an RNase III or uses two independent proteins cooperatively for RNA silencing suppression.

本文用亲合印迹法测定了玉米矮花叶病毒（MDMv）与MDMV Hc-Pro及二者与蚜虫蛋白之司的互作。结果表明，MDMv Hc-Pr0可以与MDMv结合，也可以直接与MDMv的介体——麦二叉蚜（Schizaphis graminum）中分子量约为56 kD的可溶性蛋白结合，而MDMV不能与麦二叉蚜的可溶性蛋白直接结合。无论是MDMvHc-Pro，还是MDMv，都不能结合非介体灰飞虱（Laodelphax striatellus）的可溶性蛋白。酶联板模型的结果与此一致。上述结果说明，病毒不能直接与蚜虫口针中的病毒附着位点(vAs)结合；Hc-Pro一端连接病毒，一端连接vAs，在蚜虫传播MDMv的过程中起桥梁作用。这是关于病毒Hc-Pr0与介体蚜虫蛋白直接互作的第一个生化证据。

用胶体金标记法和荧光抗体标记法研究了麦二叉蚜（Schizophis graminum）传播玉米矮花叶病毒（Maize dwarf mosaic virus, MDMV）的机制。麦二叉蚜传播玉米矮花叶病毒需要辅助成份一蛋白酶（Helper component-proteinase，HC-Pro）的参与。在电镜下观察到HC-Pro可以与MDMv粒子结合。用FITC标记的HC-Pro抗体和MDMv抗体证明，Hc-Pm可以直接结合到蚜虫口针上；而MDMV粒子不能直接结合到蚜虫口针，必须在Hc-Pm的辅助下才能结合到蚜虫口针上。这为HC-Pro在蚜虫传毒过程中起桥梁作用提供了新的证据。MDMv粒子主要吸附在蚜虫口针的尖端和中间部分。

本文用生物学、血清学和分子生物学证据证明，引起潍坊萝卜红心病的病原为芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus，TuMV)。该病毒可系统侵染曼陀罗、油菜、咸阳黄瓜、丝瓜、大白菜和普通烟，局部侵染苋色藜和假酸浆，不侵染豌豆。病毒粒体弯曲线状，长约700 mm，可由蚜虫传播，在红心病组织内形成风轮状和片层凝集状内含体，它在SDS一琼脂糖凝胶免疫双扩散试验中可与TuMV的抗血清形成明显的沉淀线。该病毒的CP基因共867个核苷酸，编码288个氨基酸，分子量为32.98 kD。该序列与国内外20个TuMV分离物的CP氨基酸序列比较结果表明，这些分离物可以分为5组，其中引起萝卜红心病的病毒与日本的HlJ、KYID8lJ、意大利的ITA7同属一组。

萝卜Raphanus astiuus 是潍坊有名的土著人特产和潍坊部分地区重点发展的作物。近年来潍坊萝卜上发生的红心病严重地影响了潍坊萝卜的产量和质量，制约经潍坊萝卜的生产。生物学、血清学和分子生物学等方面的研究表明，引起潍坊萝卜红心病的是芜菁花叶病毒（TuMV）[1]，作者对其发病规律和防治方法作了进一步研究。

从河北、北京、山东泰安和潍坊等地区的萝卜、大白菜、甘蓝、油菜上得到8个芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）分离物，测定了它们3-末端cDNA片段的序列。根据衣壳蛋白基因（cp）核苷酸序列可以将这8个分离物与另外2个TuMV分离物分为3组：泰安旧镇大白菜（JzBc）、甘蓝（JzGL）和萝卜（JzLB）分离物为一组；北京（BJLB）、潍坊萝卜分离物（wFLB）与引起萝卜红心病的TuMV分离物（wFLB99）为一组；泰安范镇、河北、潍坊（wFLB04）萝卜和泰安旧镇油菜（JzYc）上的TuMV分离物为一组。衣壳蛋白氨基酸序列比较结果与此基本一致，所不同的是分离物WFLB99与所有分离物的差异均较大，形成单独一个分支。有必要对TuMV的变异情况和致病机理进行深入研究。

从表现红心病的潍坊萝卜块根上得到一芜菁花叶病毒（Turno mosaic virus，TuMV）分离物（TuMV.Ra），通过RT-PCR获得了该分离物的外壳蛋白（CP）基因，对其进行了序列测定，并将其核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中登录的其它20个TuMV萝卜分离物的相应序列进行比较和分析。结果表明，TuMV.Ra与这20个分离物CP基因核苷酸序列的同源性为89.9%～99.0%，CP氨基酸序列同源性为94.8%～99.7% ；其中与中国浙江杭州萝卜的两个分离物HZLB1、HZLB2同源性最高，核苷酸序列的同源性为98.7%和99.0%，氨基酸序列同源性为99.0%和99.7%。TuMV-Ra与1999年从表现相同症状的潍坊萝b得到的分离物CHINA-wF CP基因核苷酸同源性为93.66%，氨基酸同源性为96.53%，说明病毒发生了比较大的变异，而且变异的位点主要在CP的N末端。将TuMV-Ra cP基因克隆到原核表达载体pET-22b（+），在大肠杆菌BI21（DE3）中表达出分子量为38 kD的融合蛋白。Western blotting分析证明TuMV-Ra CP在大肠杆菌中得到了正确表达。

以烟草品种三生烟（N.tabacum cv. Samsun）为测试寄主，采用酶联免疫检测实验（TAs-ELIsA）和电镜观察的方法，在温室条件下研究了马铃薯Y病毒（PvY）和马铃薯X病毒（Pvx）复合侵染所引起的寄主症状和病毒浓度变化的特点、不同条件下复合侵染时病毒浓度的变化规律以及复合侵染对寄主细胞超微结构的影响。结果表明，PvY/Pvx在烟草植株内发生了协生作用，PvY是协生病毒，Pvx是被协生病毒。与单独侵染相比，PvY和Pvx的复合侵染使烟草植株症状明显加重。PvY在复合侵染植株中的浓度与在单独侵染植株中相比，没有明显的变化，而Pvx在复合侵染植株中的浓度明显高于在单独侵染植株中的浓度。这种现象不受PvY株系、处理季节和接种次序的影响。但是，不同PvY株系、不同处理季节或不同接种次序对PvY/Pvx协生作用中Pvx浓度的影响程度存在着一定的差异。电镜观察表明，与不接种病毒或单独侵染的植株相比，受复合侵染的烟草叶片细胞超微结构发生了明显的病理学变化。细胞肿胀，叶绿体、线粒体等细胞器受到严重损伤，细胞质内有风轮状、薄片状的内含体，由于在细胞质中常常有大量纤维状的Pvx病毒粒子聚集体存在，这意味着Pvx浓度的增加可能是在复合侵染的细胞中病毒大量繁殖的结果。