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张书霞

动物病理学，研究细胞凋亡及其主要调控基因与动物疫病发生的关系，细胞内信号转导异常在动物主要疫病发生发展中的作用及其防治。

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姓名：张书霞
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学位：
学术头衔：

博士生导师
职称：-
学科领域：

畜牧科学、动物医学
研究兴趣：动物病理学，研究细胞凋亡及其主要调控基因与动物疫病发生的关系，细胞内信号转导异常在动物主要疫病发生发展中的作用及其防治。

个人简介

张书霞，1977年毕业于江苏农学院牧医系兽医专业，1994年获南京农业大学兽医病理学硕士学位，1999年获南京农业大学兽医病理学博士学位，发表论文五十多篇，出版专著六部，全国高等农林院校“十五”规划教材“兽医病理生理学”主编。现为中国病理生理学会理事，中国畜牧兽医学会兽医病理学分会副理事长。1998年获教育部科技进步三等奖一项，2000年获江苏省普通高校优秀课程奖（第一完成人），2004年获江苏省普通高校优秀课程群奖（第一完成人）。曾从事过牛白血病发病机理、兔病毒性出血热、鸡马立克氏病等发病机理的研究。近期主要从分子病理学角度研究肠毒素性大肠杆菌黏附素、肠毒素致病机理及其防治，猪圆环病毒2型致病机理的研究。

研究方向和领域:
动物病理学，研究细胞凋亡及其主要调控基因与动物疫病发生的关系，细胞内信号转导异常在动物主要疫病发生发展中的作用及其防治。

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2011-03-28

【期刊论文】热应激对鸡脾脏和法氏囊细胞凋亡的影响及其调节

张书霞，华荣虹，鲍恩东

中国农业科学，2005，38（1）：176～180，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

18只AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时，随机分成3组，分别进行0、5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测应激后不同时间脾脏和法氏囊细胞DNA含量、细胞凋亡率以及Caspase-3和Bcl-2的表达。结果表明，应激处理0、5和10h时，脾脏DNA合成期（S期）细胞比例分别是4.67%、5.11%、4.78%，法氏囊S期细胞分别是30.52%、24.71%、24.04%，脾脏和法氏囊细胞凋亡率分别是0.22%、0.42%、0.32%和0.32%、0.62%、0.41%，脾脏和法氏囊caspase-3表达阳性细胞率分别为5.49%、10.36%、9.80%和8.60%、10.51%、9.41%，Bcl-2表达阳性细胞率脾脏分别是31.32%、24.01%和29.26%，法氏囊则是30.24%、27.10%、31.54%，脾脏细胞凋亡率，应激后5h与0和10h有显著差异（P<0.05），在高温应激过程中，脾脏和法氏囊的细胞凋亡率与Caspase-3表达阳性细胞率呈方向一致的变化关系，均是从0h到5h逐渐升高，以后又逐渐下降，而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。据此说明高温应激能明显影响脾脏和法氏囊细胞凋亡，而这种细胞凋亡的变化受Caspase-3和Bcl-2表达的调节。

鸡,，热应激,，脾脏,，法氏囊,，细胞凋亡

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2011-03-28

【期刊论文】ETEC肠毒素基因多重PCR检测方法的建立

张书霞，张雪寒，，何孔旺，华荣虹

中国人兽共患病杂志，2003，19（2）：67～70，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

肠毒素性大肠杆菌的致病性与其具有粘附性的菌毛和产肠毒素的能力密切相关。由于菌毛的血清型多而复杂，肠毒素只有不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）两种，因此成为研究的对象。用三对扩增产物分别为110bP、237bP、368bp的引物建立了检测LT和STⅠ、STⅡ毒素基因的多重PCR方法。扩增产物分别用HindⅢ、HincⅡ、sau3AⅠ限制性内切酶酶切，均得与预期一致的2个片段。对各个参考株的检测结果为100%符合。结果表明该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性。该方法可用于肠毒素性大肠杆菌腹泻病的辅助诊断以及大肠杆菌的分类检测。

肠毒素性大肠杆菌，不耐热肠毒素，耐热肠毒素Ⅰ、Ⅱ，多重PCR

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2011-03-28

【期刊论文】热应激对鸡胸腺细胞凋亡的影响及其调节机理

张书霞，华荣虹，鲍恩东

南京农业大学学报，2003，26（1）：66～69，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

18只AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时，随机分成3组，分别进行0，5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测胸腺细胞DNA含量、细胞凋亡率以及细胞caspase-3和Bcl-2的表达。结果：应激处理O，5和10h时，（1）DNA合成期（S期）细胞比例分别是2.77%，3.28%和2.31%；（2）胸腺细胞凋亡率分别是3.99%，11.15%和3.31%：（3）caspase-3表达阳性细胞率分别为14.24%，27.01%和10.84%，Bcl-2表达阳性细胞率分别是20.59%，15.13%和27.92%；（4）应激5h与0和10h的细胞凋亡率、caspase-3和Bcl-2的阳性细胞表达率均有显著差异（P<0.05）；（5）应激处理鸡的胸腺细胞凋亡率、caspase-3表达阳性细胞率从0h到5h逐渐升高，以后又逐渐下降。在高温应激过程中，胸腺细胞凋亡率与caspase-3表达阳性细胞率呈平行的变化关系，而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。这些结果均说明：高温应激能明显影响胸腺细胞凋亡，而这种细胞凋亡的变化受caspase-3和Bcl-2表达的调节。

鸡，胸腺，细胞凋亡，半胱天冬酶， Bcl-2蛋白

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2011-03-28

【期刊论文】肠毒素性大肠杆菌菌毛对产蛋鸡免疫性的研究

张书霞，华荣虹，何孔旺，白文霞，张雪寒

畜牧与兽医，2002，34（5）：7～9，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

采用热抽提法提取4种肠毒素性大肠杆菌苗毛蛋白。K88、K99、F41和987p菌毛置白分别制成弗氏佐剂苗；K88还制成白油佐剂苗，氧氧化错胶苗和蜂胶佐剂苗；另将4种菌毛等比例混合制成弗氏佐剂菌。分别对产蛋鸡进行免疫。用微量凝集反应和血凝抑制试验检测卵黄抗体效价。结果表明。K88菌毛较其他3种菌毛免疫性好。诱导抗体效价最高而且能长时间维持；987p菌毛能快速诱导抗体的产生，但整体效价低。K88不同佐剂苗中。铝胶佐剂能较快地诱导抗体的产牛，蜂胶佐剂苗抗悼持续时间短，弗氏佐剂能诱导高效价的抗体产生而且能长时间持续。

肠毒素性大肠杆菌，菌毛，佐荆，卵黄抗体

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2011-03-28

【期刊论文】检测987p+肠毒素性大肠埃希氏菌PCR方法的建立

张书霞，华荣虹，何孔旺，倪艳秀，杨宗照

中国兽医科技，2002，32（1）：3～5，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

以987p菌毛结构基因保守序列为靶序列，设计舍成了1对可扩增459bp目的片段的引物，建立了检测肠毒索性大肠埃希氏菌987p茵毛基因的PCR方法。该方法对K88+（+为菌毛阳性）、K99+、F41+参考菌株和链球菌、葡萄球菌、己氏杆菌的检测结果均为阴性；该方法的敏感度可达102CFU，对20株腹泻仟猪粪便分离物进行检测，有1株为阳性与血清学检测的结果一致。结果表明，此方法特异性和敏感性都很高，可用于临床987P肠毒素性大肠埃希氏茵病的快速诊断和流行病学调查。

肠毒素性大肠块埃希氏酋，茸毛基因， PCR

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2011-03-28

【期刊论文】bcl-2基因家族与肿瘤形成

张书霞，陈万芳

Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2001 Vol. 33 No.6，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B-celllyncphoma/leukenia-2bcl-2）自1985年分离到后，对其作用及机理日趋深入的研究发现，它的编码产物Bcl-2蛋白具抗细胞凋亡，延长细胞寿命的作用。bcl-2有一个庞大的家族，家族成员间的作用主宰荷细胞的生与死。我们的研究也表明，鸡bcl-2基因可通过抵抗细胞凋亡，促进鸡马立克氏病的发生发展。同时，对bcl-2基因的开发利用，可为畜牧业的发展产生影响。

bcl-2基因，细胞凋亡，肿瘤，癌基因

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2011-03-28

【期刊论文】bcl-2在鸡马立克氏病肿瘤中的表达

张书霞，陈万芳

畜牧兽医学报，32（1）：58～63，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用来克亨SPF鸡复制马立氏病（Marek'sdisease，MD）肿瘤模型，取肿瘤和相应正常组织，液氮保存。AGPC（AcldGuanidiniumThiocvanate-Phenol-Chloroform）法提取组织总RNA（TR-NA），紫外测定其浓度，甲醛变性胶电泳观察其纯度。将一个含鸡bcl-21.2kb片段的质粒（PTTCB1），经转化扩增，提取质粒DNA，限制性内切酶（RE）消化，回收纯化bcl-2片段，放射性α-32P标记，制成探针。通过Nothern分子杂交检测MD肿瘤组织中bcl-2的表达，并与相应的正常组织比较。结果：鸡MD肿瘤组织和相应正常组织中均有bcl-2的表达；MD肿瘤组织中bcl-2的表达显著高于相应的正常组织。结合已进行的凋亡研究表明，bcl-2表达产物通过阻遏细胞凋亡促进MD淋巴瘤的形成。

bcl-2基因，马立克氏病，肿瘤，表达

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2011-03-28

【期刊论文】鸡bcl-2表达质粒的构建及其对转染细胞凋亡的影响

张书霞，步志高，陈万芳

中国农业科学，13（6）：88～94，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

构建了CMV驱动及牛生长激素polyA加尾信号修饰的bcl-2cDNA真核表达质粒pCDCB1。随后，采用脂质体转染方法，将扩增并纯化的pCDCB1转染至培养的SPF鸡胚次代单层成纤维细胞（CEF）内，96h后收集全部贴壁及上清脱落细胞，用Dotblot检测bcl-2的表达，用流式细胞术测定其细胞凋亡率。结果，pCDCB1转染后96h，bcl-2在CEF中呈高度表达；CEF平均凋亡率为1.14%，明显低于转染空白载体质粒的对照组7.64%的凋亡率，DNA合成期（S期）细胞为21.58%，也低于对照组。结果证实鸡bcl-2的表达可显著抑制体外培养CEF，亡进程，其效应与细胞DNA合成和增殖无关。

bcl 2， cDNA，真核表达质粒，转染，细胞凋亡

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2011-03-28

【期刊论文】鸡MD肿瘤细胞DNA含量及细胞凋亡的特性

张书霞，陈万芳，鲍恩东

南京农业大学学报，2000，23（3）：81～84，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用SPF来杭鸡复制MD肿瘤模型，取MD肿瘤组织和相同日龄鸡的正常组织，制成单个细胞悬液，碘化丙锭染色后，用流式细胞仪检测细胞DNA含量和细胞凋亡率。结果：（1）MD肿瘤有二倍体肿瘤和异倍体肿瘤，31例MD肿瘤中26例为二倍体肿瘤，5例是异倍体肿瘤；（2）MD肿瘤细胞动力学特点是：DNA合成期（s期）细胞比例明显增加，肾、肝、卵巢和睾丸MD肿瘤细胞S期分别为12.13%，11.30%，12.31%和15.26%，相应组织细胞依次为1.37%，1.27%，1.54%和0.07%，增殖指数（prollferationindex，PI）显著增高；（3）MD肿瘤细胞凋亡率明显低于正常组织，肾、肝、卵巢和睾丸MD肿瘤细胞凋亡率分别是0.33%，0.69%，0.73%，0.16%，而相应组织细胞凋亡率则为1.40%，2.44%，1.92%和2.11%。提示细胞周期紊乱、细胞增殖活跃、细胞凋亡受阻是MD淋巴瘤形成的共同细胞学基础。

马立克氏病， DNA含量，细胞凋亡，流式细胞术

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2011-03-28

【期刊论文】bcl-2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡的关系*

张书霞，陈万芳，于勇，鲍恩东

南京农业大学学报，1999，22（4）：65～68，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用一步法从17日龄来克亨SPF鸡胚和90日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总RNA（TRNA），用鸡B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因（bcl-2）cDNA探针进行Northernblot杂交。发现bcl-2在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同，成年鸡bcl-2的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊，而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况，胚胎鸡法氏囊、脾脏和胸腺的细胞凋亡率分别是0.40%，0.68%和0.38%；成年鸡则是6.98%，1.17%和0.61%。结果表明，鸡bcl-2基因通过阻抑细胞凋亡直接调控正常免疫器官的发育，在淋巴细胞发育过程中bcl-2是免疫细胞亚型选择的重要调节物。

bcl-2，鸡，免疫器官，表达，细胞凋亡