目的：用酵母双杂交技术筛选白细胞中与NSA5TP1结合蛋白的编码基因。方法：用多聚酶链反应（PCR）法扩增NS5ATP1基因，连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒，转化酵母细胞AH109并在其内表达，然后与转化了人白细胞文库质粒的酵母细胞Y187进行配合，在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落，增菌后提出质粒，转化入大肠杆菌（DH5a），提出质粒并测序进行生物信息学分析。结果：成功隆出NS5ATP1基因并在酵母细胞中表达，配合后选出在四缺（SD/-Trp-Leu-Ade-His）培养基及铺有X-a-半乳糖（X-a-gal）的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落10个，其中2个人HLA-B27；2个人亚砷酸盐转移子（arsA）；1个人单倍型E22i线粒体；1个人pyrin（MEFV）；1个人肌动蛋白素1（cofilin 1）；1个人染色体15；1个来自RP11-353N14克隆人的DNA基因，位于染色体17；1个新基因。结论：成功克隆出NS5ATP1的结合蛋白，为进一步研究HCV的作用提供了新线索。

目的 探讨慢性HBV感染中Th1/Th2应答特征及其与乙肝病毒（HBV）侵犯外周血单个核细胞（PBMC）的关系。研究对象为60例慢性HBV感染者。ELISA法检测患者PBMC体外植物血凝素（PHAP）刺激培养上清液中Th1类细胞因子（IL-2,IFN-γ）和Th2类细胞因子（IL-4, IL-10），套式多聚酶链反应（n-PCR）检测PBMC中HBVDNA。统计学处理采用t检验、方差分析和卡方检验。66.67%（40/60）的慢性HBV感染者PBMC中检出HBVDNA，其中9例血清HBVDNA阴性；慢性HBV感染者PBMC分泌Th1类细胞因子量明显低于正常对照，P<0.01（pg/mL,IL-2:54.40±17.92vs74.53±17.73），Th2类细胞因子显著高于对照组，P<0.01（pg/mL,IL-4:98.23±23.27vs29.57±11.36,IL.10:pg/mL,56.77±19.02vs25.30±8.87）；PBMC中HBVDNA阳性组与阴性组比较，IL-2水平相对高，P<0.01（pg/mL,64.40±23.73vs40.40±15.89），而IL-10相对低，P<0.05（pg/mL,53.85±18.54vs64.60±19.11），且见PBMC中HBVDNA阳性血清ALT异常发生率（47.5%,19/40）显著高于阴性组（15.0%,3/20），P<0.05。结论 慢性HBV感染时，HBV侵犯PBMC为常见事件，血清HBVDNA消失后PBMC中仍可有HBV存在；Th2优势应答为慢性HBV感染的主要Th1/Th2应答，与感染慢性化有关；HBV侵犯PBMC可改变Th1/Th2应答，在Th2优势应答前提下，Th1应答相对升高,Th2应答相对降低，与肝细胞损伤加重有关。

目的：对新基因NS5A-TP4转染肝癌细胞的基因表达谱进行分析，探索该基因表达对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能。方法：应用生物信息学（bioinformatics）技术，分析我室通过抑制性消减杂交技术筛选得到的新基因NS5A-TP4的全长编码序列，并NS5A-TP4构建基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A-TP4. 应用基因表达谱芯片技术对重组表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A-TP4转染的HepG2细胞和空载体处理的相同细胞差异表达的mRNA进行检测。结果：确定基因NS5A-TP4由762 nt组成，编码253 aa的蛋白。基因表达谱芯片所检测的1152条目的基因均为GenBank中登录的基因，NS5A-TP4表达质粒转染的细胞有18条差异表达基因其中12条基因表达增强，6条基因表达降低。这些差异表达的基因与细胞信号转导、凋亡、生长调节密切相关。结论：基因表达谱芯片技术可为初步探索新基因的功能提供重要的资料。本实验结果为进一步阐明NS5A-TP4生物学功能及HCV-NS5A的致病机制提供了理论依据。

Twenty patients with chronic hepatitis C were investigated during the treatment with in- terferon to explore the changes of antibodies to HCV (anti-HCV). Anti-HCV was tested with recom- binant immunoblot assay (RIBA) by using three antigens (C22, C33c, and C100-3) encoded by dif- ferent regions of HCV genome. The changes of Individual antl-HCV and ALT were compared with the change of HCV RNA. The results showed that persistent disappearance of serum HCV RNA was closely related to the changes of anti-C33c (P<0.01) and anti-C100-3 (P<0.005), but there was no relation between ersistent ALT normaiity and HCV viremia clearance (P>0.05). In conclu-sion, monitoring anti-C33c and anti-C100-3 could Indicate the changes of HCV viremia. The normal-ization of ALT after interferon treatment did not indicate disappearance of HCV viremia. Key words hepatitis C;

目的 探讨孕妇主动与被动联合免疫预防乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染的作用和机理。方法 将53例HBsAg(+)孕妇分成两组，预防组30例子，自孕20周起多次注射乙肝疫苗（HBVac）和乙肝免疫球蛋白（HBIGl）；对照组23例，不用HBvac和HBIG。母儿血清HB sAg，HBeAg和抗一HBs用固相放免法检测,HBV-DNA用套式PcR检测。结果 预防组新生儿血清HBsAg HBV-DNA检出率明显低于对照组（3.3%与26.1%，l0%与34.8%）P均<0.05，预防组新生儿抗一HBs阳率显著高于对照组（33 3%与8 7％1 P<0.05）。结论 孕妇于孕期通过HBIG和HBVac免疫，可有效预防HBv宫内感染，其机理可能为胎儿获得被动免疫。

探讨HcV复制水平与肝病进展的关系。方法：用竞争性逆转录聚合酶链反应（cRT—PCR）定量检测27例慢性丙肝患者（cHc）血清HcV RNA。结果：CHc患者血清HcV RNA水平变化范围10一106copies/50ul serum。13例慢性迁延性肝炎（cPH）患者血清HCV RNA平均水平(5.068±1.04，Log10copies/50ul serum)明显低于10例慢性活动性肝炎患者（cAH）（5.79±0.25）和4例肝硬化（cir）患者（5.83±0.75），P值均<0.05。血清HcV RNA水平同ALT水平间呈正相关（r=0.4997，P值<O.05）。结论：表明丙肝病毒感染后病毒血症水平低，HcV复制水平与肝损伤相关，在慢性感染中HCV仍活跃复制，并与肝病进展相关。

探讨慢性乙型肝炎发病过程中Thl/Th2细胞平衡失调的原因方法：用CD3和CD28 121Ab LPS分别体外刺激慢性HBV感染者和健康对照者的PBMC ELISA法检测培养上清液中IL-10 IL-12及IFN-v的水平结果：用m An诱导刺激PBMC后慢性HBV感染组IFN-v和IL-10水平与健康对照组无差异LPS诱导刺激后慢性HBV感染组IL-1 2水平显著低于健康对照组（34±8讲77±9，P<0 051），且HBV阳性者IL-1 0分泌水平显著高于阴性者（975±101讲895+97 P<0 051）结论：慢性HBV感染时Thl/Th2失衡并非T细胞本身缺陷所致APC功能缺陷可能为Thl/Th2失衡的原因APC功能缺陷可能与HBV侵犯APC有关

探讨HBv侵犯外周血单个核细胞（PBMC）对新生儿免疫接种的影响，并从IL2角度分析其可能机制。HBv宫内侵犯PBMc后，新生儿免疫接种失败率显著高于PBMc未受侵犯组（P<0 05）；新生儿PBMc培养上清液中IL2含量显著低于未受侵犯组和正常对照（p<0.51）。免疫接种失败组新生儿PBMC培养上清液中

目的 探讨庚肝病毒HGV与HBV、HCV重叠感染状况。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（RT—NPCR）技术检测了22例乙肝病毒感染者及48例丙肝病毒感染者血清HGVRNA。结果 HGV与HBV、HCV重叠感染率分别为31.8%（7/22）、31.3％（15/48），重叠感染病例与单纯HBV、HCV感染者在ALT、SBIL水平及疾病的临床分型上无统计学差异。结论HGV与HBV、HCV重叠感染的几率均等，HGV似不加重乙肝及丙肝患者的病情。

To explore the possible mechanism of intrauterine infection of hepatitis B virus (HBV).