方建培
长期从事儿科医教研临床工作。擅长儿童血液病,肿瘤,骨髓移植的诊治。
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- 姓名:方建培
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- 担任导师情况:
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学术头衔:
博士生导师
- 职称:-
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学科领域:
儿科学
- 研究兴趣:长期从事儿科医教研临床工作。擅长儿童血液病,肿瘤,骨髓移植的诊治。
方建培,中山大学博士研究生导师,教授,现任中山大学附二院儿科主任,小儿血液专科主任。兼任国际小儿肿瘤协会 ( The international society of paediatric oncology,SIOP )会员,中华医学会儿科分会全国青年委员和广东省医学会儿科学分会委员,广东省地中海贫血防治协会副会长,广东省抗癌协会小儿肿瘤专业委员会委员等。分别于1997年和2001年在香港中文大学威尔斯亲王医院,美国Duck大学医学院进修,长期从事儿科医教研临床工作。擅长儿童血液病,肿瘤,骨髓移植的诊治。
1991年荣获中华人民共和国卫生部属高等院校“优秀教师”奖.。作为主要技术骨干1998年1月取得了国内首例脐血移植治疗地贫的成功。1999年国内首例外周血干细胞移植治疗地贫成功。2000年国际首例无关供体脐血移植治疗地贫成功和国内首例(世界第二例)新生儿未“动员”外周血混合脐血移植成功。2004年7月国际首例无关供体脐血移植治疗假肥大型肌营养不良症成功,至2006年9月,领导的课题组共完成各种造血干细胞移植94例。治疗病种包括:急性淋巴细胞性白血病,急性非淋巴细胞性白血病,地中海贫血,再生障碍性贫血,淋巴瘤,系统性红斑狼疮,粘多糖病,假肥大型肌营养不良症等。1986年以来开展了小儿白血病的临床和实验研究,参与了中山医97’小儿白血病方案的制定和99’方案的修订工作,使本院系统治疗标危ALL 5年治愈率达80.3%的国际先进水平。2002年协调成立了“广州地区小儿白血病化疗协作组”。论文在第36届SIOP和第4届亚洲SIOP大会发言。共发表学术论文148篇 [ 其中在国外杂志上发表6篇( SCI收录),中华系列杂志31篇],参加专著、教材编写9本(其中人民卫生出版社5本、副主编2本),承担国际合作基金1项,省科委、省团队、省卫生厅科研基金共6项,中山大学5010计划1项。参加美国中华医学基金会(CMB),国家自然科学基金、卫生部临床重点项目,卫生部科研基金、省自然、省科委、中法合作计划等各类基金18项。 “脐血造血干细胞移植的基础与临床系列研究”获教育部科技进步一等奖(2003年)和广东省科技进步二等奖(2004年)。
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【期刊论文】异基因造血干细胞移植后供-受者细胞嵌合定量方法的建立和临床疗效相关性的观察
方建培, 甄子俊, 李志光, 庞应轩, 徐宏贵, 黄绍良
中华儿科杂志,2006,44(7):50~51.,-0001,():
-1年11月30日
我们建立了异基因造血干细胞移植(auogeneichematopoieticstemcellransplantation,allo-HSCT)后供-受者细胞嵌合定量的新方法。
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方建培, 徐宏贵, 魏菁, 黄文革, 陈凤英, 黄绍良, 李树浓
中国病理生理杂志,2003,19(1):46~50,-0001,():
-1年11月30日
目的:探讨小鼠脐血(umbilicalcordblood,UCB)造血干/祖细胞含量与特性。方法:采用体外集落培养和流式细胞术检测C57BL/6(H-2b)小鼠脐血与骨髓(bonemarrow,BM)造血干/祖细胞。结果:小鼠脐血培养7d粒单系祖细胞(CFU-GM)及早期红系祖细胞(BFU-E)集落产率与骨髓相近,但14dCFU-GM、多向祖细胞(CFU-GEMM)明显高于后者(P<0105),且见含细胞多体积巨大的致密型集落。脐血CD34+Sca-1+细胞亚群也明显高于骨髓(P<0.05)。结论:小鼠F脐血富含造血干/祖细胞,具有高增殖潜能。
Fetal blood, Mice, Hematopoietic stem cells, Flow cytometry3
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【期刊论文】脐血外周血造血干细胞移植治疗遗传性溶血性贫血的疗效比较
方建培, 黄绍良, 陈纯, 周敦华, 黎阳, 黄科, 吴燕峰, 包蓉
中国实用儿科杂志,2003,18(12):719~722,-0001,():
-1年11月30日
目的:比较亲属异基因脐血造血干细胞移植(UCBT)与亲属异基因外周血造血干细胞移植(PBSCT)治疗遗传性溶血性贫血(溶贫)的临床疗效。方法:16例遗传性溶贫(重型β地中海贫血14例,先天性特发性溶血性贫血2例)中9例行UCBT,7例行PBSCT。预处理方案以白消安14~20mg/kg、环磷酰胺160~200mg/kg和抗胸腺细胞球蛋白90mg/kg为基础,8例加马法兰90mg/m2,2例加噻替哌6mg,4例加噻替哌和氟达拉宾150mg/m2。结果:UCBT组植入7例(7/9),其中2例于移植术后60d(+60d)内排斥、回复地中海贫血(地贫)状态,1例发生急性肾衰竭死亡;4例出现急性移植物抗宿主病(aGVHD),1例出现慢性移植物抗宿主病(cGVHD);中位随访时间49个月(38~64个月)。PBSCT组植入6例(6/7),无继发排斥,1例发生肝衰竭死亡,1例于+3d死于败血症;5例出现aGVHD,其中3例延续为cGVHD;中位随访时间39个月(25~49个月)。结论:UCBT、PBSCT治疗遗传性溶贫具有不同的特点。PBSCT治疗具有植入率高,GVHD发生率也高的特点。UCBT具有GVHD程度较轻,提示人类白细胞抗原配型不全相合也可开展移植,但应改善低植入率的问题。
Anemia, Haemolytic, Hereditary, Stem cell transplantation
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【期刊论文】环磷酰胺预处理脐血移植小鼠模型的建立及其对骨髓龛位的影响
方建培, 徐宏贵, 黄绍良, 黄文革, 魏菁, 陈凤英
中山医科大学学报,2002,23(6):414~418,-0001,():
-1年11月30日
[目的]建立环磷酰胺(CTX)预处理脐血移植(UCBT)小鼠模型,并探讨预处理后骨髓龛位腾出的特点和机制。[方法]分别以100,200,380mg/kg3种剂量CTX腹腔注射BALB/c小鼠,检测注射后1周内外周血象、骨髓及外周血CD34+细胞含量、骨髓细胞凋亡及病理学改变。用C57BL/6鼠脐血(FNPB)作供体移植经“致死量“CTX预处理的BALB/c鼠,动态观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及移植物抗宿主病(GVHD)情况。[结果]在CTX处理后3~4d内,骨髓造血细胞损伤渐加重,血窦结构紊乱,细胞碎屑弥漫分布,外周血与骨髓CD34+细胞水平进行性降低至最低值,下降的速度和程度与CTX剂量呈正比。骨髓细胞凋亡发生率的峰值出现在第1天,第3天恢复正常。FNPB移植能明显提高受鼠存活率,重建部分造血与免疫功能,未见明显GVHD表现,并在受体内检出供体细胞的植入。[结论]成功建立CTX化疗预处理小鼠脐血移植模型。干细胞占据的龛位是在化疗预处理后4d逐渐完成腾空,凋亡是参与此过程的机制之一。
cyclophosphamide, mice, hematopoietic stem cell transplantation, umbilical cord blood
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【期刊论文】含氟达拉滨的预处理方案在脐血移植治疗重型β地中海贫血的疗效观察
方建培, 黄科, 黄绍良, 周敦华, 陈纯, 徐宏贵, 黎阳
中国实用儿科杂志,2005,20(2):87~90,-0001,():
-1年11月30日
目的:观察在“Bu+Cy+ATG”典型预处理中加入氟达拉滨(Flu)对脐血造血干细胞移植(UCBT)治疗重型β地中海贫血(地贫)的植入和移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法:2000年6月至2004年6月中山大学附属二院儿科对22例行脐血干细胞移植的地贫患儿,按预处理方案是否含Flu分为无Flu组(8例)和Flu组(14例)。无Flu组:Bu,Cy和马抗人胸腺细胞球蛋白(ATG);Flu组在此基础上加Flu。观察两组植入率,急、慢性GVHD(aGVHD、cGVHD)的发生率及其程度。结果:无Flu组8例患儿HLA全相合5例,不全相合3例,接受单个核细胞(MNC)为7103×107/kg[(417~1217)×107/kg],其中CD34+数为410×105/kg[(016~1117)×105/kg],6例植入,中性粒细胞绝对计数(ANC)≥015×109/L时间平均为18d,血小板(BPC)≥20×109/L时间平均为3615d,4例发生aGVHD,1例发生cGVHD;Flu组14例,HLA全相合6例,不全相合8例,平均输入供者MNC为7153×107/kg[(314~10)×107/kg],其中CD34+数为5101×105/kg[(016~1117)×105/kg],4例植入,ANC≥015×109/L时间平均为16d,BPC≥20×109/L时间平均为72d,2例发生aGVHD,3例发生cGVHD;两组植入率、aGVHD及cGVHD发生率无明显差异。Flu组的HLA不全相合病例多于非Flu组。结论:allo2HSCT治疗地贫中,不限定HLA相合条件下,预处理中加入Flu对植入率、aGVHD及cGVHD发生率无明显影响。
Hematopoietic stem cell transp lantation, Fludarabine, Engraftment, Graft-versus-host-disease
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方建培, 夏婷*, 吴燕峰, 徐宏贵, 魏菁
中国实验血液学杂志,2006,14(4):745~748,-0001,():
-1年11月30日
本研究探讨多种细胞因子(TPO、SCF、FL、IL-1、IL-3、IL-6)组合的几种培养体系对人外周血CD34+细胞体外诱导扩增生成巨核细胞的作用,研究人外周血来源的巨核细胞体外扩增的最佳细胞因子组合及培养时间。用Ficoll-Hapaque分离法分离动员的外周血(MPB)单个核细胞,免疫磁珠法分离纯化CD34+细胞,并将其在含胎牛血清的液体培养体系中、各组细胞因子诱导下培养15天。在不同时间点采用血细胞计数板进行细胞计数,采用流式细胞术检测培养体系中CD41+细胞的含量;同时采用甲基纤维素半固体培养法进行巨核细胞集落培养,测定巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的数量。结果表明:经过15天的培养,在MPB来源的CD34+细胞体外诱导并扩增巨核祖细胞体系中,以TPO/FL/IL26/IL23组合的扩增效果最好,明显高于其它3组,CD41+细胞第5天、10天分别扩增了93.97±17.27倍、131.23±18.26倍。第15天CD41+细胞含量及CD41+细胞数迅速下降。CFU-MK产率(/1×103个细胞)第5天、10天分别为83.33±10.02个、120.67±13.01个,明显高于其余3组。结论:以TPO/FL/IL26/IL23因子组合为体外诱导扩增巨核祖细胞的最佳组合,动员外周血的巨核祖细胞体外诱导扩增以培养第10天为宜。本实验建立了动员人外周血来源的巨核祖细胞体外扩增体系。
mobilized peripheral blood, megakargocyte, exvivo expansion
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方建培, 黄绍良, 徐宏贵, 黄料, 周敦华, 陈纯, 黎阳
临床儿科杂志,2006,24(2):121~123,-0001,():
-1年11月30日
目的评估异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗β地中海贫血(β地贫)的临床疗效和合并症。方法allo-PBSCT治疗9例小儿L重型β地贫,男4例,女5例;年龄2~14岁(中位数9.0岁)。同胞供者8例,亲属供者1例;供者年龄3~33岁(中位数13岁);男6例,女3例。HLA全相合7例,5/6相合1例,4/6相合1例。供者皮下注射G-CSF5μg/(kg•d)×5d,用CS3000Plus血细胞分离机采集PBSC。预处理方案以白消胺(Bu,14~20mg/kg)、环磷酰胺(CTX,160-200mg/kg)和马抗胸腺细胞球蛋白(ATG,90mg/kg)为基础,6例加用噻替哌(TT)、2例马法兰(Melph)和氟哒拉宾(Fludarabine)。移植物抗宿主病(GVHD)预防方案有:①单独环孢素(CsA)方案(2例);②CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案(4例);③CsA+短程MTX+霉酚酸酯(MMF)方案(3例)。受者获得的有核细胞(NC)数10.4(4.7~18.4)×108/kg,CD34+细胞数6.7(2.1~14.9)×106/kg,CFU.GM14.2(3.5~42.9)×10/kg。结果8例患儿植入,1例同胞HLA4/6相合患儿于2次PBSCT后d+60才自体恢复。aGVHD6例,cGVHD4例。CsA、MTX联合MMF方案者尤cGVHD发生,而CsA或CsA+MTX的6例中发生cGVHD4例。随访时间11~67个月(中位数31个月),总牛存率6/9例,无病生存(EFS)6/9例。结论allo-PBSCT是治疗地贫的有效临床方法。
造血干细胞, 移植, 外周血, 异基因, 地中海贫血
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【期刊论文】血清透明质酸等四项指标在重型β地中海贫血肝纤维化诊断中的价值
方建培, 徐宏贵, 黄绍良, 李海刚, 钟凤仪, 郭海霞, 苏红
中华儿科杂志,2003,41(8):603~606,-0001,():
-1年11月30日
目的探讨血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和层粘蛋白(LN)在重型β地中海贫血(简称β地贫)肝纤维化诊断中的价值。方法检测49例重型β地贫患儿和41例正常小儿血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平,其中45例地贫患儿行肝组织学检查,进行肝纤维化的对比研究。结果B地贫组血清HA、PcⅢ、cⅣ、LN四项指标水平均显著高于正常小儿组(P<0.01),HA、PCⅢ水平与纤维化分期呈低度正相关(r=0.379、0.455,P均<0.05),CⅣ及LN水平与纤维化分期无显著性相关(r=0.312、0.310,P均>0.05)。四项指标联合诊断肝纤维化的判别函数为:0.002HA+0.003PcⅢ+0.002CⅣ+0.006LN-1.859。判断的准确率为82.16%,诊断的灵敏度、特异度、阳性预测价值和阴性预测价值分别为93.88%、68.29%、77.97%和90.32%。HA、PCⅢ水平的升高与肝脏铁含量有一定的相关性(r=0.342、0.305,P均<0.05)。结论血清HA、PCⅢ在重型B地贫肝纤维化诊断中的价值高于CⅣ及LN,四项指标联合检测可提高临床诊断的准确性和可靠性。
β地中海贫血, 透明质酸, 胶原Ⅲ型, 胶原Ⅳ型, 层粘连蛋白, 肝硬化
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【期刊论文】胎鼠血及新生鼠外周血分次移植对造血干细胞植入影响的实验研究
方建培, 徐宏贵, 黄绍良, 魏菁, 黄文革, 陈凤英, 郭芬芬, 麦惠容
中华血液学杂志,2002,23(12):658~659,-0001,():
-1年11月30日
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方建培, 陈国华, 徐宏贵, 刘四喜, 黄绍良
中国实验血液学杂志,2005,13(4):660~663,-0001,():
-1年11月30日
本研究旨在探讨各种细胞因子对人脐血CD34+细胞体外扩增生成巨核细胞的作用,以建立人脐血巨核系祖细胞体外扩增的最佳体系。采用Ficou分离液分离脐血单个核细胞,免疫磁珠法分离纯化cD34+细胞,进行体外半固体集落培养和液体培养,观察各种细胞因子组合对cD41+细胞和巨核细胞集落形成单位(CFu-MK)的影响。结果显示:TPO+IL-6+IL3+FLT-3L4因子组合体外培养14天效果最好,在第7、14天CD41+细胞分别扩增了154.67±32、21倍、193、23±25.24倍。结论:本实验建立的巨核系祖细胞体外扩增体系,为促进脐血移植后血小板恢复奠定了实验基础。
巨核细胞, 脐血, 体外扩增
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