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2010年12月07日

【期刊论文】水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 郑喜邦, 余四九*

中国兽医学报,2007,27(6):950~954,958,-0001,():

摘要

采用组织学苏木精伊红(HE)染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术,检查了水牛健康优势卵泡(HDF)和闭锁优势卵泡(ADF)中颗粒细胞(GCs)调亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF。应用流式细胞术(FCM)方法检查该激素诱发CCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示,HDF和ADF都含有凋亡的GCs,只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小,染色浓黑,荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明,在HDF中未发现GCs的DNA降解。而在ADF中因闱锁程度不同而表现不同程度的DNA降解,出现典型的“拖尾”带,但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA“Ladder”。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解。孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示。在水牛的HDF中,GCs的凋亡很少。在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡。少量是以凋亡方式发生的。而坏死是主要方式。

关键词: 水牛, 卵泡颗粒细胞 优势卵泡, 细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

余四九, 何宝祥, 郑喜邦, 李彩萍, 杜玉兰, 房慧伶, 郭亚芬, 李恭贺

中国兽医科技,2004,35(7):542~546,-0001,():

摘要

体外培养水牛卵泡颗粒细胞(BFGCs),待一定阶段后撤除胎牛血清,在对照组培养基中不加任何抗氧化剂,在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸(AA)和N-乙酰L-半胱氨酸(NAC),培养6h后观察细胞生长变化,并用噻唑蓝比色法进行细胞计数,探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明,对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少,150.0mmol/LAA组无存活细胞,0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组(P<0.05)。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少,其余5个试验组随NAC浓度升高,凋亡细胞逐渐增多,5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡,而高浓度时可促进其凋亡,它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。

关键词: 卵泡颗粒细胞 抗坏血酸, N-乙酰L-半胱氨酸, 水牛, 细胞凋亡

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