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2011年04月29日

【期刊论文】真皮生物模板对成纤维细胞生物学行为的影响

陆树良, 刘英开, 青春, 廖镇江, 史济湘

中华修复重建外科杂志,2005,19(1):10~14,-0001,():

摘要

目的 研究真皮生物模板的应用对皮肤组织创伤修复过程中成纤维细胞(fibroblast,FB)生物学行为的影响,探讨其在影响组织修复及减轻瘢痕形成中的作用机制。方法 SD大鼠120只,在背部造成2.5cm×2.5cm的全层皮肤组织缺损创面,随机分为4个处理组,即开放创面组、全厚皮移植组、刃厚皮移植组、复合移植组(无细胞真皮基质+刃厚皮移植),分别于术后1、2、4、6及12周取材。通过免疫组织化学及图像分析技术检测组织标本中肌成纤维细胞(myofibroblast,MFB)的标志蛋白——α平滑肌肌动蛋白(α sinoothmuscle actin,α SMA)的表达以及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、整合素α2、β1及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF β1))的表达量。结果 复合移植组αSMA在术后1~12周低于开放创面组,术后1、4、6周低于刃厚皮移植组,术后2、12周高于全厚皮移植组(P<0.05);复合移植组FN在术后1~12周低于开放创面组和刃厚皮移植组,术后1~4周高于全厚皮移植组(P<0.05);复合移植组整合素α2在术后1~12周低于开放创面移植组,术后1~4周低于刃厚皮移植组,术后1、2周高于全厚皮移植组(P<0.05);复合移植组整合素β1在术后1~12周低于开放创面组,术后2~12周低于刃厚皮移植组,术后1~6周高于全厚皮移植组(P<0.05);复合移植组TGFβ1在术后1~12周低于开放创面组,术后2~12周低于刃厚皮移植组,术后4~12周高于全厚皮移植组(P<0.05)。结论 真皮生物模板可减少创面愈合过程中FB向MFB的转化,并有利于FB中FN、整合素α2、β1及TGFβ1,表达量下调。真皮生物模板弥补了单纯刃厚皮移植的不足,减少瘢痕形成、改善创面愈合质量。

关键词: 创面愈合 复合移植 成纤维细胞 真皮模板

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2011年04月29日

【期刊论文】糖尿病病程对真皮成纤维细胞生物学行为的影响

陆树良, 王敏骏, 青春, 花兰女, 史桂英, 盛昭园, 廖镇江

上海第二医科大学学报,2005,25(5):459~462,-0001,():

摘要

目的 探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法 通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测。结果 短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)蓄积,真皮S期细胞比例升高和单位面积皮肤羟脯氨酸含量减少。高糖和AGE—HSA导致真皮FB生长抑制和凋亡,呈剂量依赖性。结论 糖尿病皮肤随着病程延长,病理生理异常会不断加重;糖尿病真皮FB的生物学改变与皮肤高糖和AGEs蓄积存在直接关系。

关键词: 糖尿病, 晚期糖基化终末产物, 成纤维细胞

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2011年03月18日

【期刊论文】黄芪多糖、淫羊藿多糖和淫羊藿总黄酮对新城疫病毒感染细胞的影响

胡元亮, 任宇皓

南京农业大学学报,2001,24(2):102~105,-0001,():

摘要

入到培养24h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,即先加中药后接种病毒、先接种病毒后加中药、病毒和中药混合感作后同时加入。于病毒接种后72h测定NDVⅠ系的半数组织培养感染剂量(TCID50)和NDV Ⅳ系的血凝效价,以评价3种中药成分对NDV 感染细胞的影响。结果表明,APS和EPS仅在先于病毒加入时对NDV 有抑制作用,而EF 无论以何种方式给药均呈抑制作用。提示它们有一定的抗病毒作用,且与其浓度有相关性。

关键词: 黄芪多糖, 淫羊藿多糖, 淫羊藿总黄酮, 新城疫病毒, 鸡胚成纤维细胞

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2011年03月18日

【期刊论文】10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响

胡元亮, 孔祥峰, 胡元亮*, 刘家国, 张宝康, 陈玉库, 王德云

南京农业大学学报,2003,26(2):84~87,-0001,():

摘要

将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等10种中药成分分别加入已培养24h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,在加药后12,24,36,48 和60h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖; 淫羊藿多糖主要具抑制效应; 其他5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖,而在某些浓度和时间点则抑制增殖,并有一定的量效和时效关系。

关键词: 中药成分, 鸡胚成纤维细胞 细胞增殖

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2011年03月18日

【期刊论文】黄芪多糖和淫羊藿多糖对培养细胞增殖和衰老的影响

胡元亮, 任宇皓, 宋大鲁, 刘家国, 张宝康, 顾友成

中国兽医学报,2005,25(3):304~306,-0001,():

摘要

将安全浓度范围内的黄芪多糖(ast ragalus po lysaccharide,A PS) 和淫羊藿多糖(epimedium po lysaccharide, EPS)分别加入到培养12 h 和24 h 的鸡胚成纤维细胞(CEF) 中,测定加药后CEF 增殖率和成层率的动态变化。结果表明,2 种多糖均能促进细胞增殖和延缓细胞衰老,EPS 的作用强于APS,具有一定的量效、时效关系。

关键词: 黄芪多糖(, APS), 淫羊藿多糖(, EPS), 鸡胚成纤维细胞(, CEF), 增殖, 衰老

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2010年12月08日

【期刊论文】人皮肤成纤维细胞早期损伤后EDA-FN表达与损伤时间的关系

赵子琴, 贺盟, 余松, 薛爱民, 沈忆文, 陈龙, 顾云菊

Journal of Forensic Medicine, April 2007, Vol.23, No.2,-0001,():

摘要

目的 探讨培养的人体皮肤成纤维细胞损伤后纤维连接蛋白EDA片段的表达情况与损伤时间的关系。方法 培养人体皮肤成纤维细胞,利用单克隆抗体进行免疫组织化学染色及Western检测。结果 培养中的人体成纤维细胞可以微量表达EDA,随损伤时间延长而表达量增加。结论 EDA片段表达变化可以作为法医学早期损伤时间推断的比较理想的指标。

关键词: 纤维连接蛋白, EDA片段, 损伤时间, 成纤维细胞

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛胎儿成纤维细胞的分离培养

余四九, 屠迪, 崔燕

中国兽医科学,2006,36(7):573~577,-0001,():

摘要

采用30d胚龄左右的牦牛胚胎,用2种不同的消化液消化后,将所得的牦牛胎儿成纤维细胞(vakembrvonlcflbrflblasts,YEF)培养于不同血清含量的RPMIl640培养液中,并接种于2种不同材质的培养瓶表面,对YEF的分离方法、培养所需胎牛血清(FBs)添加量和不同基质表面对YEF生长的影响进行了研究。结果表明,含150mL/LFBs的RPMIl640培养基最适合YEF生长,可传代27次以上;经用RPMIl640和D-Hank's液配制的2.5g/L胰蛋白酶消化,所得的YEF的细胞活率差异不显著(P>0.05),其原代细胞在含100mL/L胎牛血清的RPMll640培养液中的贴壁率差异极显著(P<0.01);不同生长基质对YEF的形态没有显著影响。

关键词: 牦牛, 胎儿成纤维细胞 体外培养

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2009年11月20日

【期刊论文】凝血酶受体激活肽和凝血酶对人成纤维细胞释放TGF-[3和VEGF的影响

黄跃生, 杨宗城

中华烧伤杂志,2003,19:5~7,-0001,():

摘要

目的探讨凝血酶受体激活肽TP508和d一凝血酶对体外培养的人成纤维细胞Lu13释放转化生长因子-[3(TGF-[3)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响,以了解其促进创面愈合的部分机制。 方法在体外培养融合的Lu13中,加入不同浓度的凝血酶和TP508,置培养箱培养一定时间后,收集上清液离心,采用ELISA法测定TGF-pl、TGF-[32和VECF的含量。 结果 d一凝血酶能显著促进Lu13释放TGF-[3l;单纯TP508使Lu13释放TGF-[3l显著减少(P<0.01),与小剂量凝血酶复合应用,对Lu13释放TGF-pl有一定协同作用。经凝血酶处理后,Lu13释放TGF-[32也显著增高(P<0. 05)。在较大剂量(100 yg/ml)时,TP508对Lu13释放TGF-[32呈轻度抑制作用(P>0.05)。经凝血酶处理后,VECJF释放量显著增加,TP508使Lu13释放VEGF减少。 结论凝血酶可刺激Lu13释放TGF-[3.、TCF-[3.和VEGF,TP508抑制上述生长因子释放。TP508对TGF-[3.释放的抑制作用,可能有助于减少瘢痕形成,提高创面愈合质量。

关键词: 凝血酶, 成纤维细胞 转化生长因子一B, 内皮生长因子

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2009年11月08日

【期刊论文】c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞增殖的调节作用及机制

周元国, 刘霞, 李平, 张恩, 刘萍, 周萍

细胞生物学杂志,2005,27:559~564,-0001,():

摘要

c-ski是成纤维细胞增殖的复杂调节子,它对中胚层来源的皮肤成纤维细胞增殖的作用还不清楚.在观察正常成纤维细胞周期c-ski表达的时相特点的基础上,通过体外转染c-ski,观察它对细胞增殖活性、细胞周期进展以及周期蛋白表达的影响.结果显示:c-ski mRNA表达在加入血清后开始升高,在细胞周期G,期的高峰期达到峰值,S期显著下降,在G2/M期维持在较低的水平;转染的c-ski可以以剂量依赖的方式增加细胞的增殖活性,并且可以逆转Smad3对细胞增殖活性的抑制作用;C-ski使成纤维细胞提前达到Go/Gi期的最低点,进入S期;同时细胞Gi期周期蛋白cyclinD的表达增加.这些结果表明:c-ski是皮肤成纤维细胞Gi期的调节子,通过加快G,期进展促进增殖,抑制Smad3活性,促进cyclinD的表达可能与这一作用的分子机制有关.

关键词: c-ski, 成纤维细胞 增殖, 细胞周期

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2009年11月01日

【期刊论文】人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长

王亚平, 刘永刚, 韩兵, 陈地龙, 李芳菲, 王亚平*, 王莎莉

解剖学报,2005,36(3):716~719,-0001,():

摘要

目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3-4月胚胎成纤维细胞,取3~15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用;分离6~11周胚胎原始生殖细胞,将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上,在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞;用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA-1和SSEA-4;钙,钴法检测碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上(6月),3~15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落,并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA-1、SSEA-4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,Oct-4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

关键词: 胚胎生殖细胞, 胚胎成纤维细胞 细胞培养, 免疫细胞化学, 逆转录聚合酶链反应, 人胚

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2009年10月21日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子对小鼠脾脏细胞凋亡的抑制作用*

洪岸, 许艳丽, 李校坤, 林剑, 刘树铮

中国病理生理杂志,2000,16(2):131~134,-0001,():

摘要

目的和方法:X射线照射结合无血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡,采用流式细胞术定量分析碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对睥细胞凋亡的抑制作用,井采用淋巴细胞转化试验[3H]-TdR掺人法检测bFGF对脾细胞的增殖效应。结果:小鼠经过不同剂量X射线照射、脾细胞再经过不同时程无血清培养,都出现了典型的亚二倍体Ap峰,1μg/mL和2μg/mL的bFCF均可降低Ap峰中的细胞数(细胞凋亡率)。并能显著增强睥细胞的增殖反应能力。结论:bFCF可抑制外周免疫器官脾细胞的凋亡、井促进其增殖。增强机体免疫力。

关键词: 成纤维细胞生长因子、碱性, 脾, 细胞, 小鼠

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2009年10月21日

【期刊论文】大肠杆菌可溶性表达人碱性纤维细胞生长因子的研究

洪岸, 孙晋华, 洪岸*, 张玲, 孙奋勇, 宋照熙

微生物学报,2003,43(4):448~452,-0001,():

摘要

包涵体的形成与外源基因在大肠杆菌中的表达量高度相关,在适当的范围内,降低hbFCF在表达宿主BL21(DE3)plysS中的表达,成为实现高可溶性表达的关键。在不改变氨基酸序列的条件下,对hbFCF高表达菌株突变重组子起始密码ATC下游前3个密码子的摇摆碱基进行随机回复突变,共有7种组合,合成引物PCR扩增后,克隆至表达载体pET-3e,将重组子转导BL21(DE3)plysS后,IPTC诱导表达,发现其中1株有较高可溶性和活性的菌株。可见部分降低外源蛋白的表达量可以避免与减少包涵体的形成。

关键词: 可溶性表达,, 包涵体,, 人碱性成纤维细胞生长因子,, 大肠杆菌,, 回复突变

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2009年08月30日

【期刊论文】反义c-jun寡核苷酸对成纤维细胞中波紫外线辐射损伤的抑制作用

毕志刚, 宋秀祖, 夏济平

中华皮肤科杂志,2004,37(10):581~583,-0001,():

摘要

目的 探讨反义c-jun寡核苷酸(ODN)转染体外培养成纤维细胞后,对中波紫外线(U-VB)辐射诱导基质金属蛋白酶(MMP)表达的抑制作用。方法 用蛋白印迹法测定UVB辐射后,成纤维细胞原癌基因c-jun和c-fos的蛋白c-jun和c-fos的表达变化;用RT-PCR方法测定c-jun反义ODN转染后,其mRNA的表达变化。用ELlSA方法测定c-jun反义ODN转染后,对UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3的合成变化。结果 不同剂量UVB(IO、20、30 mJ/cm2)辐射成纤维细胞,均可诱导c-jun蛋白表达显著增加,分别为未辐射对照组的1.8、2.6、3.3倍;而c-fos的表达未见显著变化。UVB辐射还可以显著增加pro-MMP-1和MMP-3的合成。不同浓度c-jun反义ODN转染成纤维细胞后,均可以抑制UVB诱导的c-jun mRNA表达;对UVB诱导的pro-MMP-I和MMP-3合成具有显著抑制作用。经统计学分析,差异有显著性(P<0.01)。结论 UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3表达可以由c-jun介导;c-jun反义ODN可以抑制pro-MMP-1和MMP-3的合成。

关键词: 紫外线, 成纤维细胞 基因, jun, 基因, fos, 基质金属蛋白酶

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2009年07月14日

【期刊论文】反义碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

陈剑秋, 孙晋津

中华实验外科杂志,2004,21(9):1123~1125,-0001,():

摘要

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义脱氧寡核苷酸(A0DN)对血管平滑肌细胞(vSMCS)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 利用脂质体分别将浓度为5μmol/L的bFGF反义、正义及随机寡核苷酸(ODN)导入体外培养的VSMCs;应用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和westem blot半定量测定方法,观测ODN对bFGF基因表达的影响;通过细胞活性测定观察ODN对VSMCs增殖的抑制作用。结果 bFGF AODN作用于VSMCs后1~5d,其相应的mR-NA表达和蛋白表达均明显减弱,细胞增殖活性受到抑制。反义组与对照组相比,mRNA在第1~4天表达差异有非常显著性(P<0.01),第5天有显著性(P<0.05);蛋白表达在1~5d差异有显著性(P<0.05);细胞增殖率在1~4d差异有非常显著性(P<0.01),第5天差异无显著性(P>0.05)。而正义、随机组无此效应,同单纯脂质体和空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 反义bFGF ODN可通过特异性抑制其相应基因表达来实现阻遏血管平滑肌细胞增殖。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义, 成纤维细胞生化因子,, 碱性, 平滑肌细胞, 增殖

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2009年07月14日

【期刊论文】大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达

陈剑秋, 孙晋津

天津医科大学学报, 2005,11(1):8~10(下转第l4页),-0001,():

摘要

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法:建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定;使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-l的mRNA表达;用免疫组织化学和Western Blot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果:通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定;原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-l的mRNA;免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达,Western Blot显示bFGF有18KDa、22KDa、22.5KDa 3种异构体形式。结论:大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1 mRNA,bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子, 受体, 血管平滑肌细胞, 大鼠

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2009年06月09日

【期刊论文】人胚胎成纤维细胞与小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性比较

赵连三, 张怡, 八汪成孝, 雷秉钧

生物医学工程学杂志:251-254,-0001,():

摘要

探讨人胚胎成纤维细胞用于人胚胎干细胞体外长期培养的可行性,以含10%胎牛血清的DMEM(低糖)溶液为培养基,对人胚胎成纤维细胞的生长形态、对胰酶的敏感性、生长曲线及细胞周期进行研究,并与小鼠胚胎成纤维细胞作比较。结果显示,人胚胎成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞在体外均为贴壁生长型细胞,与小鼠胚胎成纤维细胞相比,人胚胎成纤维细胞生长更旺盛,且细胞寿命更长;在室温条件下,对0.255胰酶更敏感,消化时间不宜超过3mim。提示人胚胎成纤维细胞不仅在生长状况上与小鼠胚胎成纤维细胞类似,而且作为人胚胎干细胞体外长期培养的饲养层,在使用期限上优于后者,值得进一步研究。

关键词: 人胚胎成纤维细胞 小鼠胚胎成纤维细胞 生物学特性

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2009年04月23日

【期刊论文】大鼠牙囊细胞体外培养技术的建立及其鉴定

凌均棨, 凌均, 谷海晶, 高燕, 王阿丹

华西口腔医学杂志,2004,22(1):19~22,-0001,():

摘要

目的 建立体外培养大鼠牙囊细胞的方法,观察牙囊细胞体外生长的生物学特性。方法 分离乳鼠下颌第一、第二磨牙牙胚的牙囊组织,应用组织培养的方法进行牙囊细胞原代和传代培养。显微镜观察培养细胞的形态,电镜观察体内牙囊组织和体外培养的牙囊细胞的超微结构。免疫组化法检测细胞波形蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白的表达。结果 分离组织培养24h后,梭形细胞和多角形细胞从组织块中游出,经消化排除法获得纯化的牙囊细胞。显微镜下牙囊细胞为成纤维细胞样,电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网(RER)。免疫组化染色显示牙囊细胞表达波形蛋白、Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白。结论 运用组织培养和细胞生物学技术可以成功获得原代和传代培养的大鼠牙囊细胞,体外培养的细胞具有与正常大鼠牙囊细胞相一致的生物学特性。

关键词: 牙囊, 细胞培养, 成纤维细胞 牙齿萌出

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2009年04月19日

【期刊论文】γ-干扰素对OSF成纤维细胞的生物学效应*

彭解英, 吴颖芳, 方厂云, 刘蜀凡

临床口腔医学杂志,2001,17(4):288~290,-0001,():

摘要

目的 了解γ-干扰索(IFN-γ)对口腔黏膜下纤维化(OSV)患者颊黏膜成纤维细胞(OSF-FB)的生长增殖及胶原合成的影响,探讨IFN-γ用于治疗OSF的可能性。方法 取6例OSF患者及5例正常人颊黏膜,行成纤维细胞原代培养并传代,采用MTT比色法及羟脯氨酸试剂盒分别观察IFN-γ对NM-FB及OSF-FB的生长增殖及胶原合成的影响,并通过电镜观察IFN-γ对NM FB及OSF-FB超微结构的影响:结果 IFN-γ明显抑制NMFH及OSF-FB的生长增殖及胶原合成,电镜发现IFN-γ使NM-FB及OSF-FB的粗面内质网、游离核糖体减少,线粒体减少并有肿胀。结论 IFN-γ是CSF形成过程中的一种负性调节因子,有可能用于临床治疗OSF。

关键词: γ-干扰素, 口腔黏膜下纤维化, 成纤维细胞

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2009年03月27日

【期刊论文】外源性碱性成纤维细胞生长因子对缺血大鼠脑内源性碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

叶诸榕, 陆锦标, 刘颖, 施建英

中国神经科学杂志,2004,20(4):290~294,-0001,():

摘要

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制。方法 用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1),bFGF,碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达。结果给药组在3h-3d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小。对照组和给药组Egr-1表达均表现为3~6h的增强过程,但给药组更强于对照组。对照组12h见有bFGF表达增强,而bFGFR表达3h到达高峰,6h起下降,12h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配)。给药组bFGF表达提前且增强,3h即见有bFGF表达增强,6h时出现第一峰,从而与bFGFR 3~6h的表达增强过程相吻合。结论 外源性bFGF能缩小梗死灶,该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前,从而与bFCFR的表达增强过程重叠而实现的。

关键词: 脑缺血, 碱性成纤维细胞生长因子, 碱性成纤维细胞生长因子受体

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2009年03月27日

【期刊论文】bFGF, bFGFR及Egr-1基因蛋白在大鼠局灶性脑缺血后的表达

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标, 朱建辉, 张秀荣, 赵仲华

中国神经科学杂志,2002,18(3):602~606,-0001,():

摘要

观察持续性局灶性脑缺血(permanent middle cerebral artery oeellasion, pMCAO)损伤后表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblas growth factor, bFGF)的细胞种类、时相与不同细胞之间的相互影响,并探讨Egr-1基因蛋白对bFGF表达的影响。结果表明:在持续性局灶性脑缺血后,缺血梗死灶周边区免疫组化结果显示bFGF表达出现双相增强。缺血1h缺血边缘区主要在星形胶质细胞(Astrocyte, As)中bFcF出现一过性增强,并见细胞外基质中出现bFGF点状着色。缺血6h~1d时bFCF染色再次增强,神经元及各类胶质细胞中的表达均有增强。但是经Western-blot定量测定发现脑组织bFGF含量仅在缺血后6h~1d时出现增强。缺血1h时,bFGF可能经缺血细胞受损的细胞膜到达细胞外,与细胞外硫酸肝素或相关分子结合,内化进入缺血边缘区细胞,从而造成bFGF免疫组化染色一过性增强。第二次增强可能是缺血损伤刺激及内化的bFGF诱导的蛋白合成的增加。缺血2~6h bFGFR在神经元及各类胶质细胞中的表达均增强,主要位于缺血区的边缘。由于bFGFR表达时程早于bFGF转录合成增加,因此限制了内源性bFGF发挥保护缺血损伤神经元的作用,这使得外源应用bFGF成为必要。Egr-1基因蛋白的表达在缺血损伤后1~6h增强,其表达增高的时相早于bFGF蛋白转录合成的增加,并且因为其能够促进bWGF启动子的活性,因而可能在bFGF自分泌机制中发挥重要作用。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子(, bFGF), 碱性成纤维细胞生长因子受体(, bFCFR), 早期生长反应蛋白-1(, Egr-1), 脑缺血

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