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2011年05月03日

【期刊论文】细胞周期依赖性蛋白激酶5/p35在2, 5-己二酮中毒大鼠神经组织中的表达

谢克勤, 王青山, 侯丽艳, 张翠丽, 曾涛, 杨曦伟

中华劳动卫生职业病杂志,2008,26(6):336~340,-0001,():

摘要

目的探讨细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)在2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病发病过程中的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,随即分为对照组、200mg/kgHD染毒组和400mg/kgHD染毒组,每组10只。染毒途径为腹腔注射,每周5次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型。利用Westernblotting方法检测大脑、脊髓和坐骨神经胞浆蛋一和膜蛋白中CDK5、p35和p25的相对含量。结果与对照组相比,P35蛋白含量在200、400mg/kgHD染毒大鼠大脑和脊髓胞浆蛋白组分中明显降低,而在脊髓和坐骨神经膜蛋白组分中含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p25变化趋势与p35基本一致。CDK5在200、400mg/kgHD染毒大鼠大脑胞浆和膜蛋白中均明显下降;除坐骨神经膜蛋白组分中未检出外,在脊髓和坐骨神经中CDK5含量明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HD中毒后大鼠神经组织中CDK5及其激活因子p35和p25发生明显改变,这种改变可能与HD中毒性周同神经病的发病机制有关。

关键词: 己烷类, 细胞周期蛋白质依赖激酶类 神经组织

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2011年04月29日

【期刊论文】晚期糖基化终末产物对表皮角质形成细胞周期的调控及信号通路的影响

陆树良, 谢挺, 牛轶雯, 葛奎

中华烧伤杂志,2008,24(1):22~25,-0001,():

摘要

目的 了解晚期基化终末产物(AGE)对表皮角质形成细胞细胞周期的影响及其可能的信号通路。方法 体外制备AGE修饰的蛋白质(AGE-HAS, 150mg/L)作为干预手段。将原代培养的表皮角质形成细胞分为;正常组,采用无血清DK-SFM培养液培养;AGE干预组,采用含150mg/L AGE-HAS的DK-SFM培养液培养;对照组以10μmol/L U0126处理后同正常组条件培养;干预对照组以上述U0126处理后AGE干预组条件培养。采用流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1、B1以及细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)和p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达。结果 与正常组比较,AGE干预组S期和G2/M期细胞百分比均显著降低(P<0.05)。与正常组比较,其余3组细胞周期蛋白D1表达下降,其中干预对照组该蛋白仅有微弱表达;正常组,AGE干预组CDK4、细胞周期蛋白B1、p44/42 MAPK蛋白表达相似,对照组,干预对照组的3种蛋白表达显著低于前2组。结论 AGE通过下调细胞周期蛋白D1的表达阻碍表皮角质形成细胞的周期过程。

关键词: 糖基化终产物,, 高级, 细胞外信号调MAP酶类 细胞周期, 角质形成细胞

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2011年04月25日

【期刊论文】谷胱甘肽S-转移酶π、DNA拓扑异构酶Ⅱ及P-糖蛋白在难治性癫癎患者脑内的表达

毕建忠, 尚伟, 刘伟红, 孙琳, 王晓云, 许继平, 迟兆富

中华神经科杂志,2005,38(9):540~542,-0001,():

摘要

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及P-糖蛋白(P-gp)在难治性癫癎(RE)患者脑内的表达及意义。方法 32例RE患者手术切除标本,采用免疫组化方法检测GST-π、TopoⅡ及P-gp表达。8例脑血管畸形患者作为对照。结果 癎对照组正常脑组织内星形胶质细胞及血管内皮细胞中有少量GST-π表达(2.2),癫痈组GST-π表达明显增强(10.9,P<0.05)。TopoⅡ在对照组中无表达,癫癎组2例标本有少量表达(0.4,P>0.05)。对照组中P-gp只在脑内血管内皮细胞中少量表达,癫癎组P-gp则在星形胶质细胞及血管内皮细胞中大量表达(12.9,P<0.01)。结论 GST-π、P-gp在RE患者脑内表达可能与患者对抗癫药耐药有关。

关键词: 谷胱甘肽转移酶, DNA拓扑异构酶类 Ⅱ型, P糖蛋白,

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2009年11月02日

【期刊论文】兔脑出血后血肿周围组织ATP和乳酸含量及磷酸果糖激酶活性变化

胡长林, 陈健, 王宇

中华神经科杂志,2004,37(5):420~423,-0001,():

摘要

目的观察兔脑出血后血肿周围组织能量代谢产物的变化规律。方法健康大耳白家兔采用随机数字法分成3组:正常组,脑出血组,假手术组。其中脑出血、假手术组义分成1、6、12、24、48、72 h组。采用二次注血法制备兔白体血脑出血模型。分离血肿周围组织,测定脑水含量、能量代谢产物三磷酸腺苷(ATP)和乳酸的含量以及磷酸果糖激酶活性变化。结果脑出血1 h血肿侧即有脑水肿,至72 h逐渐加重,血肿侧明显重于对侧。1 h后血肿周围组织ATP含量呈中度下降,但差异无显著意义。1~12 h间ATP含量略有波动,12 h后再次下降,至24 h达最低点[(13.29±2.92)vg/g,降至正常的58%],差异有显著意义。24 h至72 h间无明显变化。乳酸含量于1 h即有增高,12 h达高峰[(21.01±0.18) μmol/g],直至72 h乳酸水平[(12.89±0.25) μmol/g]仍明显高于正常组及假手术组。磷酸果糖激酶(PFK)活性th即有下降[(3.98±0.02) U/mg],72h内持续下降。与正常组及假手术组比较差异有显著意义。结论脑出血后血肿周围组织在24 h后才发生明显的能量代谢衰竭,滞后于脑水肿的发生,其发生机制可能与相关酶的活性减低有关。

关键词: 脑出血, 能力代谢, 三磷酸腺苷, 乳酸, 磷酸果糖激酶类

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2009年10月20日

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2009年09月12日

【期刊论文】参麦对小鼠移植瘤组织中bFGF和MMP-2表达的影响

沃兴德, 丁志山, 尹丽慧, 高承贤

肿瘤防治杂志,2003,4(10):345~347,-0001,():

摘要

观察参麦对小鼠移植瘤组织碱性成纤维细胞生长因子(bFCF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,探讨参麦抗肿瘤血管生成的机制。方法:通过建立小鼠S180实体瘤模型,采用免疫组织化学方法,检测参麦对肿瘤组织bFCF和MMP-2表达的影响。结果:参麦能减少肿瘤组织中MMP-2的含量,抑制肿瘤组织bFCF表达。结论:抑制bFCF和MMP-2表达是参麦抗肿瘤血管生成的重要机制。

关键词: 参麦, 血管生成, 肿瘤, 碱性成纤维生长因子, 金属蛋白酶类 注射剂

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2009年06月09日

【期刊论文】产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析

吕晓菊, 陈炫, 范昕建, 雷秉钧, 俞汝佳, 高燕渝

中华传染病杂志,2004,4(2):102-105,-0001,():

摘要

目的 了解四川大学华西医院产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM及SHV型ESBLs亚型,并分析其耐药性。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增分离四川大学华西医院住院患者的产ESBIS大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌株的TEM型及SHV型ESBLs基因并测序,用琼脂稀释法测定头孢他啶和头孢噻肟等8种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)值。结果 所有产ESBIS株均耐头孢噻肟,11株耐氨曲南,2株分别耐头孢他啶和头孢吡肟,对环丙沙星、阿米卡星及头孢西丁耐药的分别为11株、5株和3株。12株ESBIS菌中10株产SHV-2,2株产TEM-19。结论 本研究中的产ESBLs株以耐头孢噻肟和氨曲南为主,其中绝大多数为多重耐药株,产SHV2和TEM-19是其对头孢噻肟及氨曲南等氧亚胺基β-内酰胺酶类抗生素耐药的原因之一。

关键词: β-内酰胺酶类; 克雷伯菌, 肺炎; 大肠埃希菌; 抗药性, 微生物

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2009年06月09日

【期刊论文】鲍曼不动杆菌耐药性和金属β内酰胺酶的检测

吕晓菊, 宗志勇, 雷秉钧, 高燕渝, 俞汝佳

中华检验医学杂志,2005,10(10):999-1001,-0001,():

摘要

目的 了解本院鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性以及对碳青霉烯类抗生素和头孢他啶耐药菌株是否产金属β内酰胺酶。方法 对2002年4月-2003年1月本院临床分离的101株鲍曼不动杆菌采用NCCLS推荐的琼脂双倍稀释法测定了对15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MICs),将对亚胺培南耐药或对头孢他啶高度耐药的菌株用金属螯合剂-抗生素稀释法检测是否产金属β内酰胺酶。结果 101株鲍曼不动杆菌最常分离自痰,分布于全院16个临床科室,但有1/3以上来自于ICU病房。这101株对抗菌药物的耐药性突出,仅对亚胺培南、美罗培南和头孢吡肟保持较高的敏感率,分别为90.1%、88.1%和81.2%;而对包括头孢他啶的其他11种抗菌药物的敏感率均低于50%;而且多重耐药菌株常见。共有19株鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药。金属螯合剂-抗生素稀释法检测出9株产金属β内酰胺酶。结论 本院鲍曼不动杆菌分离率高、分布广,对抗菌药物耐药严重;仅碳青霉烯和四代头孢菌素保持较高的敏感性;存在对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药的鲍曼不动杆菌,其中部分耐药株产金属β内酰胺酶。

关键词: 不动杆菌属; 抗药性, 多药; β内酰胺酶类; 头孢他啶

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2009年03月27日

【期刊论文】肺纤维化大鼠中基质金属蛋白酶-2的表达

许祖德, 吴浩, 许杰, 卢韶华, 生炜, 张秀荣, 赵仲华, 张月娥

中华病理学杂志,2001,12(6):452-455,-0001,():

摘要

目的 研究基质金属蛋白酶-2(MMP2)在肺纤维化中的作用。方法(1)用免疫组织化学方法(ABC法)观察博莱霉素所诱导的实验性大鼠纤维化肺组织内MMP2表达的动态变化;(2)用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察博莱霉素所诱导的肺纤维化不同时期间质成纤维细胞MMP2mRNA的动态变化。(3)用Northern 印迹杂交和免疫细胞化学方法观察转化生长因子β1(TGFβ1)对体外培养的大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA和蛋白表达的影响。结果 (1)诱导纤维化组1~7d,病灶内浸润的单核巨噬细胞及肺泡间质细胞数量增多,MMP2免疫组织化学染色阳性。14d以后, 阳性单核巨噬细胞减少。用博莱霉素28d时,阳性间质细胞亦减少。(2)博莱霉素作用后1d,肺成纤维细胞MMP2基因转录即明显增强,为对照组的2.05倍,28d时下降。(3)TGFβ1作用后,大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA及其蛋白表达增强。结论 肺组织内MMP2的过度表达,可能是肺纤维化启动的重要原因。

关键词: 金属蛋白酶类 肺纤维化, 转化生长因子β

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2006年11月22日

【期刊论文】烧伤早期微量元素的变化及其与病情、血清酶和血清蛋白之间的相关性

蔡景龙, 冯孟林, 郑国玲, 贾云珠, 孙永华

山东医科大学学报,1998,36(4):324~327,-0001,():

摘要

为探讨烧伤早期微量元素随病情变化的规律,及其与病情、血清酶和血清蛋白之间的相关性,采集了烧伤后3-7d65例患者空腹血清,测定13种微量元素、7种血清酶和血清总蛋白(TR)、血清蛋白(A)。结果表明:10种微量元素的变化与烧伤程度呈负相关,其中Zn、Se、Cu、Ti在程度、特重度烧伤时显著低于正常人和轻、中度烧伤时的值(P<0.05);TP、A分别与12种、11各微量元素呈正相关,且与Zn、Se、Cu、Ti呈密切的正相关(r>0.5,P<0.05);铜蓝蛋白(CP)与Cu、Se之间呈高度正相关(r>0.5,P<0.05)。提示重度、特重度烧伤患者需尽早补充微量元素,且随病情不同应有所侧重;TP、A可反映血清多数微量元素含量;CP可作为血清铜含量的指标。

关键词: 烧伤, 痕量元素, 酶类 血蛋白质类

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2009年08月07日

【期刊论文】共轭亚油酸抑制苯并(a)芘诱导小鼠前胃癌的研究

陈炳卿, 薛英本, 刘家仁, 郑玉梅, 刘瑞海

中华预防医学杂志,2001,35(3):163~166,-0001,():

摘要

目的 探讨不同构成的共轭亚油酸(CLA)对苯并(a)芘[B(a)P]诱导的小鼠前胃癌的抑制作用及可能机制。方法 用B(a)P 在昆明种小鼠体内建立前胃癌模型,观察不同构成的CLA 对小鼠前胃癌形成的抑制作用,同时采用蛋白印迹法分析小鼠前胃组织中的蛋白表达情况。结果 B(a)P组、75%纯度c9,t11-CLA 组、98%纯度c9,t11-CLA 组、98%纯度t10,c12-CLA 组的前胃肿瘤发生率分别为100.0%、75.0%、69.2%、53.8%;蛋白印迹法分析结果表明,CLA 抑制ERK-1 的表达,促进MKP-1 的表达,而对MEK-1 的表达无明显影响。结论 不同构成的CLA 对B(a)P 诱导小鼠前胃癌均具有抑制作用;CLA 影响MAPKs 级联反应ERKs 及此途径负调控子MKP-1 蛋白的表达可能是其抑制肿瘤作用的机制之一。

关键词: 亚油酸, 胃肿瘤, 有丝分裂原激活蛋白激酶类 癌前状态

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2007年05月16日

【期刊论文】MMP-2、TIMP-2、Ki-67在库肯勃氏瘤中的表达及意义

娄阁, 宋冰冰, 李敬红, 刘明, 张岂凡

现代妇产科进展2003年5月第12卷第3期/Prog Obstet Gynecol, May 2003, Vol. 12, No. 3,-0001,():

摘要

卵巢肿瘤;库肯勃氏瘤;免疫组织化学;基质金属蛋白酶;金属蛋白酶类组织抑制剂;Ki-67抗原

关键词: 卵巢肿瘤, 库肯勃氏瘤, 免疫组织化学, 基质金属蛋白酶, 金属蛋白酶类组织抑制剂, Ki-67抗原

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2007年05月16日

【期刊论文】VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢原发性与转移性癌中表达的研究

娄阁, 高颖, 张岂凡

现代妇产科进展2004年9月第13卷第5期/Prog Obstet Gynecol, Sep., 2004, Vol. 13, No. 5,-0001,():

摘要

目的:探讨VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢原发上皮癌、库肯勃氏瘤中的表达差异及临床病理意义。方法:采用免疫组化S-P染色技术对83例卵巢癌(卵巢原发癌45例、库肯勃氏瘤38例)进行分析,观察VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢癌中的表达。结果:VEGF在卵巢原发癌和库肯勃氏瘤组织中的表达显著高于正常卵巢组织(P<0.05);MMP-2、MMP-9在正常卵巢组织中表达缺如;VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢原发癌与库肯勃氏瘤中表达均有显著差异(P<0.05);VEGF、MMP-2、MMP-9在库肯勃氏瘤中及卵巢原发癌中,任意两指标阳性表达均有正相关性(P<0.05)。结论:VEGF;MMP-2、MMP-9在库肯勃氏瘤的形成机制中起重要作用,与肿瘤的浸润转移密切相关,并可为鉴别卵巢原发癌与库肯勃氏瘤提供一定的依据。

关键词: 卵巢肿瘤, Krukenberg瘤, 内皮生长因子, 金属蛋白质酶类

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2006年05月25日

【期刊论文】帕病大鼠神经行为和中脑酪氨酸羟化酶mRNA表达的改变

蔡定芳, LI Wen-wei, CAI Dingfang, CHEN Xiqun

中华老年压学杂志,2000,19(6):439-442,-0001,():

摘要

目的研究帕金森病(PD)大鼠的神经行为学特点及其中脑酪氨酸羟化酶(TH)mRSA表达的改变:方法利用阿朴吗啡诱发旋转试验和前肢功能试验.检测PD大鼠的神经行为学特点,一管法逆转录聚合酶链反麻(RT-PCR)半定量检测其中脐TH mRNA的表达。结果造模28只,经阿扑吗啡诱发旋转试验洲试成功21只.术后第2、第l0周2次旋转试验的30 min旋转次数分别为214.6±30.4、4、217.5±26.5,两者差异无显著性(P>0.05)。前肢功能试验.PD大鼠患肢摄食颗粒数(17.71±4 82)比对照大鼠(34.43±3.55)明显减少(P<0.01);15周后第2敬测试.PD大鼠患肢的摄食颗粒数(18.86±3.89)仍明硅减少,与对照组(35.86±3.78)比较差异有显著性(P<0.01)。与其第1次测试比较没有明显改善(P>0 05)。PD大鼠中脑的THmRNA表达水平明显降低(P<0.01),模型组q34 mRNA表达约为对照组的30.44%。结论帕叠森病大鼠神经行为学异常表现稳定,中脑内TH神经运动mRNAr的表达下隆。

关键词: 帕金森病, 神经运动行为, 羟化酶类

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2006年12月01日

【期刊论文】恶性肿瘤组织的氧化还原态及其抗氧化能力的改变*

王树人, 吴琛珩, 王树人△, 刘漪沦, 乔小蓉, 张建成, 解晨浩, 李勇刚, 叶战勇

中国病理生理杂志, 2005, 21(11):2160-2165,-0001,():

摘要

目的:探讨恶性肿瘤组织的氧化-还原态及其抗氧化能力的改变。方法:42例原发性消化道恶性肿瘤(食管癌13例、胃癌14例及结直肠癌15例),以其相对应的癌旁正常粘膜组织为对照,测定其谷胱甘肽氧化还原对(GSH、GSSG)的含量及辅酶Ⅱ氧化还原对(NADPH、NADP+)的含量,并据此计算出GSH/GSSG、NADPH/NADP+比值以及GSH/GSSG氧化还原电位值、NADPH/NADP+氧化还原电位值。结果:癌组织中的GSH、NADPH含量明显高于癌旁组织(P<0.01)。GSH/GSSG、NADPH/NADP+的氧化-还原电位轻度还原偏移(P<0.05)。而GSSG含量及NADP+含量则与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:消化道恶性肿瘤组织的GSH、NADPH含量明显升高,提示其抗氧化能力明显增强;而在此基础上,其氧化-还原电位仅较癌旁组织轻度偏向还原方向,提示癌组织内仍存有较明显的氧化应激态。

关键词: 肿瘤, 氧化还原, 氧化还原酶类

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2005年11月09日

【期刊论文】中药补肾益气活血作用对生长受限胎鼠脑及肝细胞外信号调节激酶-1与丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

黄光英, WU Yunxia*, HUANG Guangying, LI Jing.

中华妇产科杂志,2002,37(11):672~675,-0001,():

摘要

目的 在地探讨补肾益气活血方剂对生长受限胎鼠脑及肝细胞外信号调节激酶-1(ERK-1)和丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。方法 采用被动吸烟法建立孕鼠的生长受限模型,对48只孕鼠随机分成生长受限组(12只)、精氨酸治疗组(12只)、补肾益气活血方剂(简称中药)中药治疗组(12只),另选12只正常孕鼠组成正常组。运用Western2blot方法,分别检测各组孕鼠所生产胎鼠的脑组织及肝组织内ERK-1和MKP-1的表达。结果 (1)脑组织:生长受限组、精氨酸治疗组、中药治疗组和正常组ERK-1的表达分别为7.63±0.22、10.03±0.41、11.03±0.30、11.44±0.09;MKP-1的表达分别为7.41±0.38、10.35±0.60、10.60±0.14、11.60±0.62。(2)肝组织:生长受限组、精氨酸治疗组、中药治疗组和正常组ERK21的表达分别为4.73±0.54、5.83±0.17、11.37±0.12、12.34±0.14;MKP-1的表达分别为9.07±0.61、10.66±0.08、14.27±0.73、14.92±0.17。(3)在肝组织和脑组织中,生长受限组ERK-1和MKP-1的表达较正常组明显降低(P<0.01),中药治疗组较生长受限组明显升高(P<0.01),且接近于正常组的表达水平(P>0.05)。脑组织ERK-1的表达,中药治疗组较精氨酸治疗组明显升高(P<0.05);MKP-1的表达,两组比较,差异无显著性(P>0.05),肝组织ERK-1和MKP-1的表达中药治疗组较精氨酸治疗组都明显升高(P<0.01)。结论 补肾益气活血方剂通过影响ERK-1和MKP-1的表达,可引起生长相关基因表达增强和凋亡抑制,这可能是该方剂防治胎鼠生长受限的机制之一,且其作用优于精氨酸。

关键词: 胎儿生长迟缓, 补肾, 益气活血, 有丝分裂素激活蛋白激酶类 蛋白质酪氨酸磷酸酶, 即早蛋白质类

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2006年01月12日

【期刊论文】人神经元性AADC基因的克隆、测序及其对帕金森病的治疗作用*☆

邢诒刚, Jun Liu, Dong Zheng, Dao-You Zhou, Qing-Jun Li, Song-Hua Xiao, Jun Yan, Yi Li, Lian-Hong Yang, Yi-Gang Xing

中国临床康复,2004,8(19):3893-3896,-0001,():

摘要

背景:帕金森病患者脑内黑质多巴胺能神经元变性异致芳香族氨基酸脱羧酸(aromatic L-amino acid decarboxylase, AADC)活性水平的降低及波动是产生帕金森患者临床症状和在L-dopa替代治疗时“症状波动”等不良反应出现的重要原因之一。目的:探讨AADC基因脑内移植对帕金森病的治疗作用及其在左旋多巴治疗过程中的地位,并控讨阳离子脂质体介导的基因治疗方法的有效性。设计:2×析因设计。地点和材料:中山在学附属第二医院林百欣医学研究中心,材料主要包括人嗜铬细胞瘤组织,Trlzol,真核表达载体质粒Pcdna3,阳离子脂质体,6-OHDA,阿补吗啡,AADC单克隆抗体,SD大鼠。干预:使用基因克隆、亚克隆技术构建Pcdna3-AADC真核表达框图体将帕金病模型的SD大鼠随机分为实验组与对照组,分别以Pcd-NA3-AADC重组体和Pcd-NA3空载体进行阳离子脂质体包裹后,注射浓度的L-dopa进行治疗。采用免疫组化方法确定AADC的表达。主要观察指标:①AADC基因脑内移植后两组大鼠的旋转行为。②采用一定浓度的L-dopa进行治疗对大鼠旋转行为的影响。结果:①阳离子脂质体包裹的Pcd-NA3-AADC重组体脑内注射扣,在3,7,14,21,38d时大鼠的旋转行为获得了一定的改善(p>0.05),分别改善了56.0%,62.6%,49.4%,36.3%,27.4%,以1周时最为明显,在第5周时,其旋转行为则于移植前无明显差异p>0.05)。②使用同等浓度的左旋多巴(L-dopa,10mg/kg体质量·d)冶疗后,在上述相同的时间点时,实验组较对照组明显改善模型大鼠的旋转行为(p>0.05),以1周时最为明显,其旋转行为改善达93.4%,在第5周时,两组间差异无显著意义(p>0.05)。③免疫组化方法确定AADC在纹状体区的稳定表达。结论:增加脑内AADC基因表达可有效改善帕金森病大鼠的旋转行为,并可增加L-dopa冶疗效果,有助在低剂量上长期维持L-dopa的疗效;阳离子脂质体介导师的裸基因脑内移植技术为基因治疗帕金森病提供一种手段。

关键词: 芳香族氨基酸脱羧酶类 基因, 帕金森病

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2005年03月16日

【期刊论文】永生化人晶状体上皮细胞细胞周期调控相关基因表达的检测

曾骏文, 吴明星, 李绍珍, 高劲松, 刘奕志

中华眼科杂志,2002,38(6):367-372,-0001,():

摘要

目的 探讨人类晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)周期调控中的细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白激酶(cyclin dependent kinase 2,CDK2)和细胞周期蛋白激酶抑制因子(cyclindependent2kinase inhibitor,CKI) p21基因的表达,阐明HLEC增殖和晶状体后囊膜混浊(posterior capsule opacification,PCO)的分子机制。方法 体外培养永生化HLEC系HLE-B3,用二步过量胸苷阻断法进行细胞周期同步化;流式细胞仪检测细胞周期;收集不同时相的细胞提取总RNA。用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测细胞周期蛋白E、CDK2和p21的mRNA表达;分别用免疫组织化学染色和Western blot法检测细胞周期蛋白E和CDK2及p21的蛋白表达。结果 流式细胞仪检测:HLE-B3细胞周期处于G1期,占33.5%;S期,占46.1%;G2期,占20.4%;处于S期及G2期细胞的比例约占总数的66.5%。RT-PCR检测:可见不同周期时相的HLE-B3细胞(细胞周期蛋白E和CDK2)mRNA的表达,但在不同步化的细胞时相中未检测出细胞周期蛋白E的表达。而在同步化的S期细胞中有少许p21mRNA表达。免疫组织化学染色未检测出细胞周期蛋白E阳性细胞,仅可检测出少部分p21阳性细胞。Western blot法检测结果:CDK2阳性表达以S期细胞明显,G1期和G2期略低于S期表达。不同步化细胞也有CDK2的表达。提示细胞周期蛋白E、CDK2与p21的mRNA蛋白表达不平衡。结论体外培养HLE-B3细胞周期过程中存在细胞周期蛋白E、CDK2和p21的表达,且存在表达不平衡。细胞周期蛋白E、CDK和CKI间的表达不平衡有可能是其体外增殖细胞周期分子机制之一。

关键词: 晶体, 上皮细胞, 细胞培养, 细胞周期蛋白E, 细胞周期蛋白质依赖激酶类

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2005年08月06日

【期刊论文】孤立性大肝癌分子病理特征的初步研究

杨连粤, 刘合利, 黄耿文, 杨平洲, 杨建青, 易为民

,-0001,():

摘要

目的 研究孤立性原发性大肝癌的分子病理特征。方法 比较20例孤立性大肝癌与13例小肝癌、10例结节性肝癌的病理特征,并且采用免疫组织化学方法检测三组肝癌组织中与恶性肿瘤侵袭转移有关分子标志物的表达情况,包括PTEN蛋白、Survivin 蛋白、整合素αv 亚基、基质金属蛋白酶2(MMP2)以及微血管密度(MVD)。结果 孤立性大肝癌大多有包膜且呈膨胀性生长,肝硬化少,癌细胞分化较结节性肝癌好(P<0.05)。孤立性大肝癌的Survivin蛋白、整合素αv亚基、MMP2的表达及MVD均低于结节性肝癌,而PTEN蛋白明显高于结节性肝癌(P<0.05),上述指标在孤立性大肝癌组与小肝癌组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论 孤立性大肝癌具有特殊的临床和分子病理特征及相对好的肿瘤生物学行为。

关键词: 癌, 肝细胞, PTEN, Survivin, 整合素, 基质金属蛋白酶类

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2005年01月21日

【期刊论文】腺病毒介导的TIMP-4基因转染抑制血管损伤后新生内膜形成

高炜, 郭艳红, 李黔, 陈光慧, 汤健, 高炜△

北京大学学报(医学版),2003,35(4):434~437,-0001,():

摘要

目的:应用腺病毒介导的转基因方式转染人组织型金属蛋白酶抑制剂24(TIMP24)基因,以观察TIMP24对球囊损伤后新生内膜形成的影响。方法:体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)并转染含有TIMP24基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdTIMP24),采用单层培养细胞刮片法,观察TIMP24对细胞迁移的影响;以大鼠颈总动脉球囊损伤模型为研究对象,损伤后即刻经血管外膜分别转入盐水、空载腺病毒载体和含有TIMP24基因的腺病毒载体,观察细胞迁移和新生内膜形成情况。结果:培养的VSMC转染AdTIMP24后,细胞迁移明显受到抑制,与对照组相比抑制率为63.9%(P <0.01);在大鼠颈总动脉球囊损伤模型中,转基因后4d时生理盐水组、空载腺病毒组和转染AdTIMP24组内弹力板内的细胞数依次为(32.5±4.8)个细胞、(33.8±7.0)个细胞和(8.2±2.4)个细胞,转染TIMP24可以显著抑制血管损伤后细胞向内膜的迁移;血管损伤后28d时,转染TIMP24组新生内膜面积与中膜面积比值与对照组相比降低了66.5%(P<0.01),空载腺病毒组与生理盐水组之间差异无显著性。结论:TIMP24可以抑制培养的VSMC的迁移,局部干预可以明显抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后细胞的迁移和血管新生内膜的形成。

关键词: 金属蛋白酶类组织抑制剂, 新生血管化,, 病理性, 基因疗法

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