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2010年12月07日

【期刊论文】水牛卵泡GCs体外培养发生凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 冯贵雪, 郑喜邦, 余四九*, 李恭贺

中国兽医学报,2007,27(5):747~751,-0001,():

摘要

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(腿)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈,TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。

关键词: 水牛, 卵泡, 颗粒细胞, 细胞凋亡, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛胎儿成纤维细胞的分离培养

余四九, 屠迪, 崔燕

中国兽医科学,2006,36(7):573~577,-0001,():

摘要

采用30d胚龄左右的牦牛胚胎,用2种不同的消化液消化后,将所得的牦牛胎儿成纤维细胞(vakembrvonlcflbrflblasts,YEF)培养于不同血清含量的RPMIl640培养液中,并接种于2种不同材质的培养瓶表面,对YEF的分离方法、培养所需胎牛血清(FBs)添加量和不同基质表面对YEF生长的影响进行了研究。结果表明,含150mL/LFBs的RPMIl640培养基最适合YEF生长,可传代27次以上;经用RPMIl640和D-Hank's液配制的2.5g/L胰蛋白酶消化,所得的YEF的细胞活率差异不显著(P>0.05),其原代细胞在含100mL/L胎牛血清的RPMll640培养液中的贴壁率差异极显著(P<0.01);不同生长基质对YEF的形态没有显著影响。

关键词: 牦牛, 胎儿成纤维细胞, 体外培养

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2009年07月16日

【期刊论文】星形胶质细胞条件培养液对体外海马神经元促生长作用的研究

张建宁, 孙红宇, 张卉, 张文治

中华缝合医学杂志,2001,2(10):877~879,-0001,():

摘要

目的:研究不同浓度的星形胶质细胞(AS)条件培养液对新生大鼠海马神经元生长活性的影响。方法:进行新生大鼠海马神经细胞的原代培养,AS条件培养液的制备,遏过测量海马神经细胞胞体直径和轴突长度及应用MTT法观察AS条件培养液对海马神经细胞生长活性的影响。结果:AS务件培养液能明显促进海马神经细胞胞体直径及轴突长度的增加,增强海马神经细胞内琥珀酸脱氢酶的活性,而且以高浓度的AS条件培养注作用最为显著。结论:AS条件培养液时体外培养的新生大鼠海马神经元有明显的促生长作用。

关键词: 星形胶质细胞条件培养液, 海马, 神经元, 体外培养

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2009年07月16日

【期刊论文】糖皮质激素对大鼠海马神经元影响的体外研究

张建宁, 张建宁*, 孙红字*, 杨树源*, 张卉△, 张文治△

中国神经精神疾病杂志,2003,29(3):196~199,-0001,():

摘要

目的 探讨在体外条件下糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)对海马神经元的影响及其机制。方法 取新生大鼠海马组织进行原代分离培养,通过细胞形态学观察,细胞酶学噻唑蓝(methylthiazolyl,胛r)测定、DNA原位末端标记(TdT-medialed dbq'P Nick End Izbleling method,TUNEL)法以及凋亡相关蛋白Bc1-2、Bax的表达观察0、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5md/L不同浓度的地塞米松(dexamethasone,DEX)作用24h对大鼠海马神经元的影响。结果 高浓度的DEX可以引起明显的海马神经元形态变化,降低海马神经元的活性,并通过上调Bax的表达,下调Bc1-2的表达促进海马神经元的凋亡。结论 高浓度糖皮质激素可促进海马神经元的凋亡从而降低海马神经元的活性。

关键词: 糖皮质激素 海马神经元 体外培养 凋亡

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2009年04月29日

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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫初产卵体外培养的研究

汪世平, 钟飞, 汪世平**, 李文凯, 徐绍锐, 吕志跃

中国人兽共患病杂志,2004,20(7):561~565,-0001,():

摘要

目的观察日本血吸虫未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力影响的效果。方法本研究通过体外培养系统,观察日本血吸虫成虫离体产卵及虫卵发育全过程中形态学特点的变化,检测抗未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力的影响。结果在含正常兔血清的培养基中,初产卵经12~14天培体外培养后,能完成发育至成熟期,对照组雌虫每周产卵总数为17657个(n=20)。但在含有抗未成熟虫卵超免疫兔血清的培养基中,雌虫产卵数量较正常兔血清培养对照组有显著降低(P<0.001);在培养后第10天,试验组雌虫即停止产卵,部分初产卵卵胚的发育和成熟过程被完全阻断;免疫荧光染色显示,抗卵免疫血清可作用于卵胚细胞及雌虫卵黄腺、肠腔内膜组织。结论体外培养结果表明,日本血吸虫未成熟虫卵抗原诱导的免疫应答,在抗虫卵胚胎发育及抗雌虫生殖产卵中起重要作用。

关键词: 日本血吸虫, 未成熟虫卵, 体外培养 胚胎发育, 免疫荧光染色

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2006年11月14日

【期刊论文】能量可控陡脉冲对人脐静脉血管内皮细胞的体外作用

胡丽娜, 罗小东, 孙才新, 姚陈果, 熊兰, 米彦, 王士彬

第三军医大学学报,2005,27(21):2139~2141,-0001,():

摘要

目的研究不同剂量的能量可控陡脉冲对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞生物学性状的影响。方法对人脐静脉血管内皮细胞施以不同剂量的陡脉冲,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及细胞增殖曲线观察细胞的损伤效应,流式细胞技术分析作用前后细胞周期的情况。结果①MTT试验证明能量可控陡脉冲对人脐静脉内皮细胞的作用存 在剂量效应关系,其杀伤率随剂量的增加而增加,揭示高剂量的能量可控陡脉冲可导致血管内皮细胞急性损伤效应;②细胞增殖曲线表明随能量可控陡脉冲剂量的增加,对细胞增殖能力抑制越明显;③流式细胞分析结果表明,能量可控陡脉冲处理前后,细胞周期变化不明显。结论能量可控陡脉冲对血管内皮细胞有明显的杀伤和抑制作用。

关键词: 陡脉冲, 血管内皮细胞, 体外培养

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